安尼瓦爾·買買提 陳海林 依布拉音江·依布拉音

（喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院胸外科 新疆 喀什 844000）

前言

食管癌（esophageal carcinoma）是一種發(fā)病率較高的惡性腫瘤，其發(fā)生率在多發(fā)腫瘤中位居第八位，死亡率為第五位，我國是食管癌發(fā)生率最高的國家之一。此前針對該疾病的預(yù)防治理效果不佳，研究指出對食管癌的發(fā)生、發(fā)展進(jìn)行分析，了解其細(xì)胞株信號通路，對于化療等工作有一定的優(yōu)化作用。我院針對上述內(nèi)容進(jìn)行了分析調(diào)查，所獲結(jié)果如下：

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2017年1月-2017年12月收治的100例食管癌患者作為對象，收集術(shù)后癌組織及癌旁組織共50對標(biāo)本進(jìn)行研究。100例患者中，男性患者58例，女性患者42例，年齡45～66歲，平均年齡57.1±2.2歲，早期食管癌患者17例，中期食管癌患者29例，晚期食管癌患者54例。以樣本為基礎(chǔ)培育的細(xì)胞株分為兩組，即轉(zhuǎn)染NFκB s h RNA載體組、轉(zhuǎn)染NFκB過表達(dá)載體組，每組25對樣本，培育方式和時間相同。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

（1）所有標(biāo)本均來源于食管癌患者。（2）排除患有重大疾病的患者。

1.3 方法

收集患者術(shù)后癌組織及癌旁組織共50對標(biāo)本，提取mRNA及蛋白，了解NFκB、VEGF、VEGR1在轉(zhuǎn)錄及蛋白水平的變化情況。構(gòu)建NFκB過表達(dá)質(zhì)粒載體，在食管癌細(xì)胞株ECA109及KYSE150中，轉(zhuǎn)染NFκB過表達(dá)質(zhì)粒載體，設(shè)立對照組，通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染48小時后，提取mRNA及蛋白，了解NFκB、VEGF及VEFGR1在轉(zhuǎn)錄及蛋白水平的表達(dá)較對照組的表達(dá)變化差異；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡，了解對細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。明確NFκB的表達(dá)增高，可否伴隨著VEGF及VEGFR1的表達(dá)增高，初步確定以上因子的相互關(guān)系。重復(fù)構(gòu)建過程，明確NFκB的表達(dá)降低，可否伴隨著VEGF及VEGFR1的表達(dá)減少。

1.4 觀察指標(biāo)

本次調(diào)查主要觀察食管癌細(xì)胞株ECA109及KYSE150中NFκB與VEGF信號通路，收集細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡數(shù)據(jù)，對NFκB可否伴隨著VEGF及VEGFR1的表達(dá)變化出現(xiàn)變化，并了解這種變化的規(guī)律性。

2.結(jié)果

2.1 NFκB、VEGF及VEFGR1的變化情況

通過實驗發(fā)現(xiàn)，在轉(zhuǎn)染48小時后，NFκB、VEGF及VEFGR1在轉(zhuǎn)錄及蛋白水平的表達(dá)方面，較對照組表達(dá)變化差異不顯著，組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），隨著抑制劑濃度的增高，NFκB及VEGF的表達(dá)逐漸降低，對空白對照組差異明顯，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡

通過實驗發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)染48小時后，細(xì)胞周期與凋亡情況出現(xiàn)變化，轉(zhuǎn)染NFκB s h RNA載體組、轉(zhuǎn)染NFκB過表達(dá)載體組組間差異不顯著，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），與空白對照組相比差異顯著，且具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。數(shù)據(jù)信息如表1所示。

表1 細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡

2.3 NFκB與VEGF信號通路

對NFκB與VEGF的信號通路進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)當(dāng)VEGF及VEGFR1的表達(dá)出現(xiàn)變化時。NFκB的表達(dá)會同步出現(xiàn)變化，這種變化帶有典型的規(guī)律性，NFκB的表達(dá)增高，VEGF及VEGFR1的表達(dá)同步增高，NFκB的表達(dá)降低，VEGF及VEGFR1的表達(dá)同步降低，這表明了三個因素之間的相關(guān)性，即NFκB為調(diào)控VEGF表達(dá)的上游基因[1]。

3.討論

食管癌是一種發(fā)生率較高的惡性腫瘤，我國食管癌患者數(shù)占據(jù)世界食管癌患者總數(shù)的二分之一左右。新疆喀什地區(qū)民眾受到生活習(xí)慣、食物類型的影響，罹患食管癌的幾率較其他地區(qū)民眾更高。大部分患者確診時已經(jīng)進(jìn)入癌癥晚期，手術(shù)治療后存活不超過5年。本次研究將重點放在血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1（VEGFR1）與轉(zhuǎn)錄因子蛋白（NFκB）的信號通路方面。結(jié)果上看，VEGF會減少金屬蛋白酶抑制劑的釋放，并通過分泌（包括自分泌和旁分泌）與血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1（VEGFR1）結(jié)合，實現(xiàn)下游信號通路的激活，進(jìn)一步參與腫瘤的形成、遷移[2]。在此過程中轉(zhuǎn)錄因子蛋白會出現(xiàn)與之帶有相同規(guī)律的變化，是調(diào)控VEGF表達(dá)的上游基因，通過了解NFκB的變化，可以分析癌細(xì)胞的態(tài)勢和擴(kuò)散情況。

綜上所述，食管癌細(xì)胞株ECA109及KYSE150中，NFκB可參與VEGF的表達(dá)調(diào)控，NFκB為調(diào)控VEGF表達(dá)的上游基因。