史新原，馬 雷，李紹民

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154000)

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2017年2月～2017年8月在我院就診的慢性HBV感染者(HBsAg和HBV-PCR檢測陽性，且超過半年[3]，近半年來未接受抗病毒治療；排除合并HAV、HCV、HDV、HEV、EBV、CMV感染者，排除合并脂肪肝、藥物肝及肝癌患者)76例作為研究對象，其中肝功能正常高病毒載量組8例，肝功能異常高病毒載量組26例，肝功能正常低病毒載量組26例，肝功能異常低病毒載量組16例。76例患者年齡22～61歲，平均(43.55±9.46)歲，其中男50例，女26例。肝功能情況以丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、膽堿酯酶(ChE)三個指標界定。高病毒載量：HBsAg陽性，HBV-DNA 20×103；HBsAg陰性，HBV-DNA 2×103。低病毒載量：HBsAg陽性，HBV-DNA<20×103；HBsAg陰性，HBV-DNA<2×103。同時選取21例年齡相匹配的健康體檢者(無肝病病史，無肝病癥狀及體征，病毒性肝炎血清標志物陰性、生化學(xué)指標正常)作健康對照組。

1.3所用儀器及試劑：雅培ARCHITECH I2000SR生化分析儀，BECKMAN COULTER Au5800生化檢測儀，BD FACSCantoTMⅡ流式細胞儀，Scientific Industries Vortex Genie 2T漩渦震蕩儀， LC-4012低速離心機。流式抗體、對照抗體及紅細胞裂解液購自 BD公司。

1.4試驗方法：肝功能及HBV-DNA檢測由我院檢驗科完成。T細胞亞群的檢測：取兩支試管，標記為Ⅰ、Ⅱ。兩管均加入100 μl抗凝全血，Ⅰ管加入20 μl熒光標記抗體，Ⅱ管加入等量對照抗體，在漩渦震蕩儀上震蕩10 s，室溫避光孵育15 min；兩管均加入1 ml經(jīng)10倍稀釋配比的紅細胞裂解液，同法震蕩10 s，室溫避光裂解15 min；兩管均添加鞘液2 ml，低速離心機(設(shè)定1 200 r/min)離心5 min，取出兩管，一次性傾倒上清液，在吸水紙上蘸干管口殘液；添加500 ul鞘液，同法震蕩10 s，上流式細胞儀進行檢測。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法：流式數(shù)據(jù)應(yīng)用BD FACSDiva Software分析。最終數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS19.0分析，檢驗各組的正態(tài)性，兩組間比較應(yīng)用兩獨立樣本t檢驗，多組間比較先進行單因素方差分析，而后應(yīng)用q檢驗(方差不齊時應(yīng)用校正方法)。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1各組受檢者資料分布：見表1。

表1各組受檢者資料

組別例數(shù)性別男(例) 女(例)年齡(x±s,歲)肝功正常高病毒載量組84447.63±4.47肝功異常高病毒載量組2618842.08±1.01肝功正常低病毒載量組26161044.12±9.23肝功異常低病毒載量組1612443.00±1.07健康對照組21101146.10±9.71

組別例數(shù)CXCR5+CD+8T慢性HBV感染組762.24±0.66①健康對照組210.41±0.12

注：與健康對照組相比，①P<0.05

組別例數(shù)CXCR5+CD+8T肝功能正常感染組342.77±0.45①②肝功能異常感染組421.82±0.48①健康對照組210.41±0.12

注：與健康對照組相比，①P<0.05；與肝功能異常感染組相比，②P<0.05

組別例數(shù)CXCR5+CD+8T低病毒載量組422.75±0.39①②高病毒載量組341.63±0.31①健康對照組210.41±0.12

注：與健康對照組相比，①P<0.05；與高病毒載量組相比，②P<0.05

組別例數(shù)CXCR5+CD+8T肝功正常高病毒載量組82.08±0.22①②③肝功異常高病毒載量組261.49±0.17①③④肝功正常低病毒載量組262.98±0.24①④肝功異常低病毒載量組162.36±0.26①健康對照組210.41±0.12

注：與健康對照組相比，①P<0.05；與肝功異常高病毒載量組相比，②P<0.05；與肝功正常低病毒載量組相比，③P<0.05，iP<0.05；與肝功異常低病毒載量組相比，④P<0.05

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