李麗娟 劉 敏

(大理大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，云南 大理 671000)

心肌梗死發(fā)生是由于冠狀動脈堵塞，心肌血液供應(yīng)中斷，導(dǎo)致心肌持續(xù)性缺血而發(fā)生局部壞死。大的冠狀動脈如發(fā)生缺血超過40 min，即可發(fā)生急性心肌梗死(AMI)〔1〕。AMI的發(fā)生基礎(chǔ)多是冠狀動脈硬化狹窄，加之人體內(nèi)部或外部的各種原因，冠狀動脈內(nèi)粥樣斑點(diǎn)發(fā)生破裂，血小板迅速凝集，在血管內(nèi)形成血栓，阻礙血液的流通，導(dǎo)致心肌缺血繼而發(fā)生壞死〔2〕。近年來，由于國內(nèi)生活水平的提高，心肌梗死的發(fā)生率也隨之升高。如果可以早期識別心肌梗死的高危因素，則對于心肌梗死的早期處理和AMI病死率的降低有很大的幫助。而研究表明動脈粥樣硬化屬于慢性炎癥疾病，其發(fā)生與多種細(xì)胞因子有關(guān)，如腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-8和轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β等〔3～5〕。 這些炎癥因子的產(chǎn)生和釋放，可以直接促使炎癥的發(fā)生，進(jìn)而誘發(fā)心肌梗死。因此，從炎癥因子的遺傳學(xué)角度來闡述心肌梗死的發(fā)生機(jī)制，成為近年來心肌梗死研究的熱點(diǎn)。CD14是一種由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞表達(dá)的糖蛋白，可與多種抗原相結(jié)合，并將信號傳遞給免疫細(xì)胞，促使各種細(xì)胞因子的釋放，進(jìn)而導(dǎo)致炎癥的發(fā)生與發(fā)展。編碼CD14的基因位于5號染色體的長臂3區(qū)1帶。多項(xiàng)研究表明CD14 C(-260)T(rs2569190)的基因多態(tài)性與心肌梗死的易感性具有顯著相關(guān)性〔6～9〕，但也有研究存在爭議性的結(jié)論〔7,10～16〕。由于研究中樣本量和其他因素的影響，二者的相關(guān)性一直無法得到定論。此次Meta分析旨在探討CD14 C(-260)T的基因多態(tài)性與心肌梗死的易感性的具體關(guān)聯(lián)。

1 材料與方法

1.1檢索策略 檢索PubMed、Web of Science、中國知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫(CNKI)、維普數(shù)據(jù)庫及萬方數(shù)據(jù)庫，收集2016年5月之前發(fā)表的關(guān)于CD14 C(-260)T基因多態(tài)性與心肌梗死易感性關(guān)聯(lián)性分析的病例對照研究或隊列研究。檢索中文關(guān)鍵詞為： “心肌梗死”、“急性心肌梗死”、“基因多態(tài)性”、“易感性”、“病例對照研究”、“隊列研究”；英文關(guān)鍵詞有：“CD14”、“C(-260)T”、“rs2569190”、“polymorphism”、“SNP”、“mutation”、“myocardial infarction”。主題詞檢索策略為：(“Antigens,CD14”〔Mesh〕) AND(“Myocardial Infarction”〔Mesh〕)。

1.2文獻(xiàn)資料納入和剔除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①CD14 C(-260)T基因多態(tài)性和心肌梗死易感性的研究；②病例對照研究或隊列研究；③等位基因、基因型數(shù)據(jù)完整；④對照組基因型頻率Hardy-Weinberg平衡。剔除標(biāo)準(zhǔn)：①基因型數(shù)據(jù)不完整或沒有基因型數(shù)據(jù)；②重復(fù)發(fā)表、收錄的數(shù)據(jù)信息；③基因型數(shù)據(jù)不符合Hardy-Weiberg平衡的研究；④Meta分析、綜述。

1.3文獻(xiàn)篩選和數(shù)據(jù)提取 根據(jù)文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn)，提取納入文獻(xiàn)的信息，包括：第一作者的姓名、發(fā)表年限、國家、種族、腫瘤類型、對照組來源、基因分型方法、病例和對照組基因型頻數(shù)。兩個研究者分別獨(dú)立提取信息，如有分歧，與其他研究者商討決定。

1.4評分標(biāo)準(zhǔn) 對所納入文獻(xiàn)進(jìn)行質(zhì)量評價，評分標(biāo)準(zhǔn)采用Newcastle-Ottawa Scale(NOS)文獻(xiàn)質(zhì)量評價表。評價內(nèi)容包括：病例的定義是否充分(1分)、病例的代表性(1分)、對照的選擇(1分)、對照的定義(1分)、病例與對照的可比性(2分)、研究對象暴露的確定方法(1分)、病例與對照的暴露是否采用了相同的確定方法(1分)和兩組應(yīng)答率是否相同(1分)。得分7～9分的文獻(xiàn)為高質(zhì)量文獻(xiàn)，4～6分的文獻(xiàn)為中等質(zhì)量文獻(xiàn)，1～3分的文獻(xiàn)為低質(zhì)量文獻(xiàn)。

1.5統(tǒng)計分析 信息提取以后，首先用SPSS19.0軟件計算所納入研究的對照組基因型數(shù)據(jù)Hardy-Weinberg平衡P值，剔除掉不符合Hardy-Weinberg平衡的研究。然后利用Stata12.0軟件進(jìn)行Meta分析。利用CochranQ檢驗(yàn)和I2檢驗(yàn)方法評價各研究之間是否存在明顯異質(zhì)性。當(dāng)P>0.05，I2<50%時，異質(zhì)性不明顯，采用固定效應(yīng)模型；若P<0.05，I2>50%時，說明研究之間異質(zhì)性明顯，則采用隨機(jī)效應(yīng)模型〔17,18〕。本次研究中，利用5種等位基因模型來評價CD14 C(-260)T基因多態(tài)性與心肌梗死易感性之間的關(guān)聯(lián)性，并繪制出森林圖。此外，采用Begg漏斗圖檢測來觀察是否存在發(fā)表偏倚，利用Egger法線性回歸驗(yàn)證漏斗圖的對稱性〔19〕。除總體分析外，根據(jù)人種和心肌梗死類型進(jìn)行分層分析，以排除這些因素給Meta分析帶來的影響。通過敏感性分析，逐一刪除每項(xiàng)研究，觀察結(jié)果是否發(fā)生大的變化，剔除異質(zhì)性較大的研究，保證最終結(jié)果的穩(wěn)定。

2 結(jié) 果

2.1文獻(xiàn)檢索結(jié)果 初檢文獻(xiàn)為51篇，包括1篇成果快訊和2篇綜述。將綜述類型的文章剔除后，剩余49篇文獻(xiàn)。通過閱讀題目和摘要，得到相關(guān)文獻(xiàn)16篇。閱讀全文后，有3篇文獻(xiàn)沒有C(-260)T基因型數(shù)據(jù)或數(shù)據(jù)不全，篩選得到13篇文獻(xiàn)。對剩余研究提取基因型信息并計算Hardy-Weinberg平衡，發(fā)現(xiàn)有1篇文獻(xiàn)對照組基因型數(shù)據(jù)不符合Hardy-Weinberg平衡，因此最終的Meta分析共納入12篇文獻(xiàn)15項(xiàng)研究，其中包括5 433例心肌梗死患者，5 631例正常對照組，3項(xiàng)研究與AMI相關(guān)，12項(xiàng)研究沒有區(qū)分AMI和慢性心肌梗死 (表1)。

表1 納入文獻(xiàn)基本特征

2.2Meta分析結(jié)果 總體分析結(jié)果顯示，心肌梗死的易感性與CD14 C(-260)T基因多態(tài)性存在顯著相關(guān)性，4種基因模型的χ2檢驗(yàn)P值都<0.05〔等位基因模型C vs TOR=1.08,95%CI:1.02～1.14,P=0.005;純合基因模型CC vs TTOR=1.16,95%CI:1.04～1.29,P=0.006;顯性基因模型 CC vs(CT + TT):OR=1.10,95%CI:1.01～1.20,P=0.02;隱性基因模型(CC +CA) vs AA:OR=1.11,95%CI:1.01～1.21,P=0.02〕。森林圖的結(jié)果顯示攜帶T等位基因的人群比攜帶C等位基因的人群，擁有更高的心肌梗死發(fā)病風(fēng)險。但在總體分析時，有異質(zhì)性存在，除采取隨機(jī)效應(yīng)模型外，該次分析把人種和疾病類型作為自變量，進(jìn)行了分組分析。根據(jù)森林圖，分組以后，在各亞組中，不再有異質(zhì)性存在。

亞組的分析結(jié)果顯示，CD14 C(-260)T基因多態(tài)性與AMI易感性具有顯著的關(guān)聯(lián)性。而在人種的亞組分析中，結(jié)果顯示心肌梗死易感性在亞洲人群中與CD14 C(-260)T基因多態(tài)性存在顯著相關(guān)性，在高加索人群中沒有顯著相關(guān)性。根據(jù)Newcastle-Ottawa Scale(NOS)文獻(xiàn)質(zhì)量評價表，本次Meta分析包含的研究，評分≥7分，屬于高質(zhì)量文獻(xiàn)(表2)。

2.3異質(zhì)性敏感性分析結(jié)果 在繪制森林圖過程中，基因模型(C vs T)和等位基因模型(CC vs TT)有異質(zhì)性存在，因此采用隨機(jī)效應(yīng)模型。當(dāng)按照人種和疾病類型進(jìn)行亞組分析時，發(fā)現(xiàn)可以消除異質(zhì)性。因此，CD14 C(-260)T基因多態(tài)性與心肌梗死易感性之間的關(guān)聯(lián)性分析，進(jìn)行了人種和疾病類型的亞組分析。發(fā)表偏倚用Begg漏斗圖顯示，并用Egger檢驗(yàn)驗(yàn)證漏斗圖對稱性，結(jié)果顯示沒有明顯發(fā)表偏倚存在。敏感性分析則顯示，在依次刪除每項(xiàng)研究時，研究結(jié)果并未發(fā)生明顯變化(圖1，圖2，圖3)。

表2 CD14 C(-260)T基因多態(tài)性與心肌梗死易感性關(guān)系Meta分析

圖1 CD14 C(-260)T基因多態(tài)性與心肌梗死易感性關(guān)系Meta分析漏斗圖(CC vs TT)

圖2 CD14 C(-260)T基因多態(tài)性與心肌梗死易感性關(guān)系Meta分析漏斗圖(C vs T)

圖3 CD14 C(-260)T基因多態(tài)性與心肌梗死易感性關(guān)系敏感性分析圖(CC vs TT)

3 討 論

CD14主要分為兩種，一種分布在單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性白細(xì)胞的膜外側(cè)，這種類型以糖基磷脂酰肌醇的方式結(jié)合在細(xì)胞膜上，成為膜結(jié)合型CD14〔21〕；另一種分布在人的血液中。這兩種類型的CD14來源于同一轉(zhuǎn)錄本。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)人體發(fā)生炎癥時，CD14的含量會升高，而且會隨炎癥的發(fā)展逐漸升高〔22〕。CD14可以與多種抗原結(jié)合，但是缺乏膜內(nèi)部分，不能將信號傳遞到細(xì)胞內(nèi)，但是TLRs受體可以，而CD14可以與TLR2、TLR4作用，傳遞抗原信號，激活單核細(xì)胞及T細(xì)胞，釋放TNFα、IL-6、IL-8和IL-1β等炎癥因子。這些抗原包括脂多糖(LPS)、肽聚糖(PGN)、脂磷壁酸(LTA)、脂蛋白(BLP)、病毒及甘露糖等〔23〕。CD14除可以識別上述抗原并呈遞信號外，還具有其他功能，如：CD14可中和、清除LPS從而減輕炎癥反應(yīng)；促進(jìn)單核細(xì)胞黏附在活化的上皮細(xì)胞上；能夠與活化的淋巴細(xì)胞表面的CD14配體相互作用，抑制T細(xì)胞增殖和B細(xì)胞產(chǎn)生抗體；可促使巨噬細(xì)胞與活化的內(nèi)皮細(xì)胞和T細(xì)胞的黏附；可識別革蘭陽性菌細(xì)胞壁成分中的肽聚糖(PGN)，并將信號呈遞給細(xì)胞。CD14 C(-260)T位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游的啟動子 260位點(diǎn)(野生型為CC)，當(dāng)C突變?yōu)門時，人體內(nèi)的血清CD14濃度會升高。血清CD14是體內(nèi)脂聯(lián)素的主要結(jié)合受體，與TLR2/TLR4受體形成復(fù)合物，參與炎癥的發(fā)生與發(fā)展。有研究發(fā)現(xiàn)，CD14 C(-260)T的基因多態(tài)性與冠狀動脈的不穩(wěn)定斑塊形成有關(guān)〔24〕。Koenig等〔25〕的研究顯示，血清CD14可能導(dǎo)致冠心病和心肌梗死的發(fā)病風(fēng)險增高。

本研究表明CD14 C(-260)T基因多態(tài)性是導(dǎo)致心肌梗死發(fā)生的一個危險因素。雖然CD14 C(-260)T基因多態(tài)性在心肌梗死的發(fā)生發(fā)展過程中的功能仍不十分明確，但CD14作為炎癥發(fā)生的一個重要趨化因子，其表達(dá)水平的增高是可以促進(jìn)炎癥的發(fā)生與發(fā)展的〔26〕。本研究結(jié)果顯示，CD14 C(-260)T基因多態(tài)性與心肌梗死易感性在亞洲人群中存在明顯關(guān)聯(lián)性。

在已有的各種多態(tài)性分析中，限制結(jié)論準(zhǔn)確性的因素主要有樣本量、民族、環(huán)境因素、臨床信息等。由于這些因素的影響，Meta分析所納入的研究可能存在發(fā)表偏倚。本研究通過繪制漏斗圖和敏感性分析圖顯示，沒有明顯的發(fā)表偏倚存在。但是仍可能存在以下一些缺陷：①關(guān)于亞洲人群和AMI人群的研究較少，導(dǎo)致基因型數(shù)據(jù)偏少，分析結(jié)果缺少說服力。②研究中并沒有涉及與心肌梗死相關(guān)的其他環(huán)境因素或臨床信息，也沒有排除這些因素的影響。③各項(xiàng)研究的校正因素不一致，研究對象的納入標(biāo)準(zhǔn)不一致，而且心肌梗死的發(fā)生有年輕化的趨勢。④本次Meta分析納入研究對照組人群多來自于醫(yī)院，分型方法多為酶切分型，未做分層分析。因此，具有臨床信息的大樣本量的多態(tài)性研究仍需要進(jìn)行，而環(huán)境因素和遺傳因素的共同作用也將是研究的重點(diǎn)。