黃體龍 李麗娟(通訊作者)

（昆明市兒童醫(yī)院血液科 云南 昆明 650000）

神經(jīng)母細胞瘤（NB）占小兒惡性實體腫瘤10%和兒童腫瘤死亡率的15%[1],NB預后較差。筆者采用IHC方法分析ALK在NB患兒的表達特點。

1.資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年10月至2016年1月昆明市兒童醫(yī)院血液腫瘤科收治的90例經(jīng)病理初次證實NB患兒臨床資料，平均年齡（9.53±3.62）歲，35例患兒進行Nmyc基因擴增檢測，8例陽性，27例陰性，根據(jù)INSS分期將Ⅰ+Ⅱ+ⅣS期NB患兒分為低危組，INSSⅢ+Ⅳ期分為高危組，根據(jù)INSS分期和Nmyc基因擴增檢測對NB患兒采取手術(shù)或化療。

1.2 ALK檢測方法

免疫組織化學檢測：手術(shù)或組織活檢取得組織標本后，制作10%福爾馬林固定石蠟包埋細胞學蠟塊，常規(guī)切片，脫蠟，EDTA熱修復法修復抗原，滴加一抗，37℃溫箱中孵育40min，PBS緩沖液中沖洗5次，滴加二抗，37℃溫箱中孵育30min，PBS緩沖液中沖洗5次，加DAB顯色劑，清水沖洗5min,蘇木精染色2rnin,中性樹膠封片。高倍鏡下取4個不同視野共計數(shù)800個細胞，計算ALK陽性細胞比例，0～4分代表ALK細胞比例，未發(fā)現(xiàn)ALK細胞為0分，ALK陽性細胞數(shù)≤10%為1分，11%＜ALK陽性細胞數(shù)＜50%為2分，51%＜ALK陽性細胞數(shù)＜75%為3分，ALK陽性細胞數(shù)＞75%為4分。0分～3分表示染色強度，分值越高，染色越重。ALK細胞比例評分和染色評分結(jié)果的積為最終結(jié)果，0分為陰性（-），1～3為弱陽性（+），3～7為中度陽性（++），7～12分為強陽性（+++）。-、+為低表達，++、+++為高表達。

1.3 隨訪

所有患者隨訪期間截止2018年2月。

1.4 統(tǒng)計學分析

SPSS22.0進行數(shù)據(jù)分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

2.1 ALK表達情況

ALK高表達于NB患兒臨床特征見表1。

表1 ALK高表達于NB患兒臨床特征的關(guān)系[例（%）]

2.2 NB患兒生存狀態(tài)

NB患兒存活狀態(tài)見表2。

表2 NB患兒存活狀態(tài)的（n，%）

3.討論

正常情況下，ALK表達于人體胚胎的神經(jīng)系統(tǒng)[2]，出生以后ALK除在腦組織中較少表達外，其他組織均不表達ALK，ALK基因異?？蓪е录毎鲋撑c凋亡失調(diào)，引起腫瘤。目前ALK與NB疾病預后的關(guān)系尚不明確。

本研究發(fā)現(xiàn)ALK高表達與年齡存在一定的關(guān)系，NB低危組和高危組、ALK高度表達組和低度表達組的生存率明顯不同，INSS分期高危NB患兒死亡率顯著高于INSS分期低危組，ALK高度表達NB死亡率顯著高于ALK低表達患兒。

總之，我們認為ALK在國內(nèi)NB患兒中陽性表達率較高，ALK高表達與NB患兒不良預后有著密切的關(guān)系。