劉曉鴿 王金生 曾錦婷

深圳市寶安區(qū)福永人民醫(yī)院檢驗科，廣東深圳 518103

糖尿病（DM）是因胰島素分泌和（或）作用缺陷所引起的一種代謝性疾病，臨床上以血葡萄糖濃度增高為主要特征，在發(fā)展中國家，DM 患者數(shù)量及發(fā)病率迅速增多[1]。DM 會引起多種并發(fā)癥，DN 為其最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一[2]。DN 是導(dǎo)致終末期腎臟疾?。╡nd-stage renal disease，ESRD）最常見的原因之一，是1 型DM 患者死亡的主要原因[3]，其發(fā)病率和死亡率顯著增加。目前臨床上，DN 診斷主要依賴尿MA 和腎小球濾過率（glomemlarfiltration rate，GFR），但部分早期DN 患者并無尿MA，且部分早期存有尿MA 的患者并未發(fā)展至ESRD，而GFR 濃度檢測又受多種因素影響，導(dǎo)致MA 和GFR 難以對DN 早期作出準(zhǔn)確診斷及預(yù)測其發(fā)展，且DN 所致腎臟損傷過程非常隱匿，早期癥狀一般不明顯，而出現(xiàn)明顯的癥狀和體征時已錯過了最佳治療時機(jī)[4]。因此，探索新的檢測標(biāo)志物或聯(lián)合標(biāo)志物對DN 早期診斷和預(yù)測其進(jìn)展具有非常重要的意義[5-6]。為此，本文通過聯(lián)合檢測HbA1C，MA 和Cys-C 指標(biāo)來探討其在DN 早期診斷和治療中應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016 年1 月～ 2017 年10 月來我院就診的 DM 患者 273 例，病史 1 ～ 20 年，年齡 16 ～ 72歲，平均（41±21.3）歲，其中經(jīng)臨床及腎活檢確診為DN 組患者95 例，非DN 組患者178 例。根據(jù)DM 患者病程分為 1 ～ 3 年組、3 ～ 6 年組及＞ 6年組，以上DM 患者均排除其他疾病導(dǎo)致的腎臟疾病。同時選擇同期健康體檢人群120 例為對照組，年齡19 ～ 76 歲，平均（42±22.9）歲。各組研究對象的性別、年齡及病史等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞ 0.05），且均經(jīng)同患者和家屬的知情同意并簽定知情同意書。

1.2 儀器與試劑

HbA1C 檢測用HA-8180 全自動糖化血紅蛋白分析儀、校準(zhǔn)品、質(zhì)控物、溶血劑和洗脫液均由日本愛科來公司提供；日立7600 全自動生化分析儀、定標(biāo)液、質(zhì)控物及配套試劑均由日本日立公司提供。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本采集 于清晨空腹采集靜脈動血3～ 4mL 于無抗凝劑的干燥管內(nèi)和1 ～ 2mL 靜脈血于EDTA-2K 抗凝管內(nèi)，充分混勻，并留取清晨第一次尿液2 ～ 5mL 于用一次性塑料管內(nèi)，并及時送檢。

1.3.2 標(biāo)本檢測 標(biāo)本室溫靜置30min 后，無抗凝劑靜脈血和尿液于離心機(jī)內(nèi)離心5min（3500r/min），分離血清和上清尿液上7600 生化分析儀檢測 MA，Cys-C，UA，CR 和 BUN；而 EDTA-2K 管抗凝血混勻后直接上HA-8180 全自動糖化血紅蛋白分析儀檢測HbA1C，所有檢測項目均于當(dāng)天檢測完成。標(biāo)本分析前對相應(yīng)儀器進(jìn)行保養(yǎng)、校準(zhǔn)和室內(nèi)質(zhì)控物檢測，待室內(nèi)質(zhì)控物檢測結(jié)果均在參考范圍之內(nèi)才進(jìn)行標(biāo)本檢測。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以百分比表示，采用χ2檢驗，P＜ 0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組別各檢測指標(biāo)結(jié)果

DN 組患者血中 HbA1C、MA 和 Cys-C 濃度分 別 為（12.76±3.19）%，（83.03±34.27）mg/L 和（2.94±1.03）mg/L，明顯高于非 DN 組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=4.196，5.084，6.025，P＜ 0.05），UA，CR 和 BUN 結(jié)果分別為（512.53±142.74）μmol/L，（119.46±31.32）μmol/L 和（6.80±3.01）mmol/L，略高于非DN 組，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（t=1.052，1.383，1.603，P＞ 0.05）。DN 組和非 DN 組患者血中各檢測指標(biāo)均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）。見表 1。

表1 不同組別各檢測指標(biāo)結(jié)果（± s）

表1 不同組別各檢測指標(biāo)結(jié)果（± s）

注：*為DN組與非DN組比較；#為DN組與對照組比較；@為非DN組與對照組比較

組別 HbA1C（%） MA（mg/L） Cys-C（mg/L） UA（μmol/L） CR（μmol/L） BUN（mmol/L）DN組 12.76±3.19 83.03±34.27 2.94±1.03 512.53±142.74 119.46±31.32 6.80±3.01非DN組 8.92±2.61 42.26±19.41 1.52±0.61 479.29±138.23 108.72±28.58 6.16±2.82對照組 4.35±1.24 11.32±5.16 0.70±0.29 293.73±110.77 64.31±22.57 4.18±1.07 t 4.196* 5.084* 6.025* 1.383* 1.052* 1.603*9.352# 13.862# 10.186# 7.095# 7.621# 6.872#6.548@ 9.325@ 7.096@ 5.915@ 6.035@ 6.366@P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 不同病程DM患者HbA1C、MA和Cys-C結(jié)果比較

DM 患者血中HbA1C，MA 和Cys-C 水平隨病程的延長而呈逐步上升趨勢，且不同病程結(jié)果之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）。見表2。

表2 不同病程DM患者血中HbA1C，MA和Cys-C含量水平（± s）

表2 不同病程DM患者血中HbA1C，MA和Cys-C含量水平（± s）

注：*為1～3年組與＞6年組比較；#為3～6年組與＞6年組比較

組別 n HbA1C（%） MA（mg/L) Cys-C（mg/L）1～3年組 103 7.92±2.31 36.03±15.17 1.57±0.34 3～6年組 89 11.38±2.64 65.35±13.28 2.03±0.51＞6年組 81 14.02±3.73 94.29±20.41 2.92±0.97 t 5.625* 8.756* 6.078*2.932# 3.228# 3.009#P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 DN患者治療前后HbA1C、MA和Cys-C結(jié)果比較

DN 患者治療后血中HbA1C、MA 和Cys-C 濃度分別為（6.27±2.06）%，（49.38±21.05）mg/L 和（1.32±0.49）mg/L，明顯低于治療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）。見表 3。

表3 DN患者治療前后HbA1C，MA和Cys-C結(jié)果比較（± s）

表3 DN患者治療前后HbA1C，MA和Cys-C結(jié)果比較（± s）

組別 n HbA1C（%） MA（mg/L） Cys-C（mg/L）治療前 95 12.76±3.19 83.03±34.27 2.94±1.03治療后 95 6.27±2.06 49.38±21.05 1.32±0.49 t 4.916 3.035 4.232 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

3 討論

DN 早期一般無臨床癥狀，起病隱匿，若能及早發(fā)現(xiàn)并及時采取干預(yù)措施，可以防止DN 的發(fā)生。目前DN 早期診斷主要指標(biāo)是MA，當(dāng)DM 患者M(jìn)A為30 ～ 300mg 時可診斷為隱匿性DN[7-8]。本研究結(jié)果顯示，DN 組患者尿中MA 濃度明顯高于非DN組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05），這可能與在腎功能正常情況下MA 不易通過腎小球濾過膜，而DN會引起腎小球損傷，破壞蛋白質(zhì)濾過屏障分子篩作用，使其通透性增加，MA 就易濾出形成微量白蛋白尿等有關(guān)[9-11]。而MA 在一般的尿常規(guī)檢查中檢測不出來，易出現(xiàn)漏診。MA 檢測能及時發(fā)現(xiàn)隱匿性的DN，若這個時候采取治療干預(yù)措施，就可以防止DN 的發(fā)生，甚至逆轉(zhuǎn)DN 的病理過程。因此，MA是腎小球早期損傷的敏感指標(biāo)，對DN 早期診斷具有重要的臨床意義[12-13]。

HbA1C 于1958 年被使用色譜法首次從其它類型的血紅蛋白中分離出來，是人體血液中紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白與血糖結(jié)合的產(chǎn)物，是一種不可逆的非酶促反應(yīng)，不受每天血糖、運(yùn)動及食物的影響，反映過去6 ～ 8 周的血糖平均濃度，是評價近期血糖的控制情況的良好指標(biāo)[14-15]。本研究結(jié)果顯示，DN患者血清HbA1C 濃度明顯高于非DN 患者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05），這可能與在高血糖環(huán)境下，腎臟濾過屏障的基底膜膠原蛋白發(fā)生糖化，血壓升高致腎小球濾過率增加，促使尿蛋白發(fā)生等有關(guān)[16-17]。HbA1C 是評價長期血糖控制的可靠指標(biāo)，但在DN早期病變時濃度明顯增高。因此，加強(qiáng)DM 患者HbA1C 監(jiān)測，可及早發(fā)現(xiàn)DN，能有效預(yù)防和降低DN 的發(fā)生。

Cys-C 是一種分泌性蛋白，廣泛存于體液中，由于其分子量小，帶正電荷，能自由從腎小球濾過，又能被腎小管上皮細(xì)胞完全重吸收后在細(xì)胞內(nèi)降解，不重回血液，且腎小管上皮細(xì)胞不分泌，同時Cys-C 濃度不受多種生理因素的的影響，主要取決于腎小球濾過率大小，當(dāng)腎小球濾過率下降時，血中Cys-C 濃度呈翻倍增加，是反應(yīng)腎小球濾過率大小的新內(nèi)源性標(biāo)志物[18-19]。DN 是糖尿病引起的嚴(yán)重和危害性最大的一種慢性并發(fā)癥，由糖尿病引起的微血管病變而導(dǎo)致腎小球結(jié)節(jié)性和彌漫性硬化，導(dǎo)致腎小球濾過率降低，引起體內(nèi)各種代謝物從腎臟排泄減少[20-22]。本研究結(jié)果顯示，DN患者血清中Cys-C 濃度明顯高于非DN 患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05）。因此，Cys-C 對 DN 患者早期診斷具有較高的敏感性和特異性，與腎功能變化具有良好的相關(guān)性，對DN 進(jìn)行早期診斷是一個很好的指標(biāo)，DM 患者血中Cys-C 升高預(yù)示著DN 的發(fā)生[23]。

本研究結(jié)果顯示，DM 患者血中HbA1C，MA，Cys-C，UA，CR 及BUN 濃度均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05），且治療后濃度明顯低于治療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05），而DN 組患者血中UA，CR 及BUN 濃度雖均高于非DN 組患者，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞ 0.05）。因此，UA，CR 及BUN 指標(biāo)在DN 患者早期診斷不夠敏感，不能應(yīng)用于DN 患者的早期診斷。

綜以上述，HbA1C，MA 和 Cys-C 在 DN 患者體內(nèi)明顯增高，且三者呈正相關(guān)性，且治療后明顯降低，有利于DN 的早期診斷和療效的判斷，值得臨床推廣應(yīng)用。