□ 郭 容 長治市食品藥品檢驗所

隨著人們對生活質(zhì)量要求的提高，對食品安全檢測力度的加大，那么對三聚氰胺不確定度檢測數(shù)據(jù)的真實性和準確性的要求就更高，要求盡量把誤差減到最小。為了達到中國實驗委員會的認可，與國際技術(shù)接軌，加強國際之間的聯(lián)系，本文則根據(jù)JJF1059_1999《測量不確定度評定與表示》，運用HPLC（高效相色譜法）的方法來測試各種乳制品，例如：脫脂乳粉、全脂乳粉、酸奶等其中三聚氰胺的不確定度。因為高效液相色譜法相對來講步驟較簡便、穩(wěn)定性好、設(shè)備易找、便宜。

1 實驗部分

1.1 實驗用具

高效相色譜法儀、三聚氰胺樣品、電子天平、自動固相萃取儀、濃縮儀、3K30高速冷凍離心機、超聲波清洗機、超純水機、圓周振蕩器、過濾紙。

1.2 測試依據(jù)

以國家標準GB/T22388-2008《原料乳與乳制品中三聚氰胺測定方法》為依據(jù)，選擇其中的HPLC（高效液相色譜法）對其進行測定。

1.3 實驗操作流程

（1）在實驗最開始，先精確稱取混合均勻的樣品2.0024g，稱取之后，把這混合均勻的樣品倒入50 mL離心管之中，然后再往離心管中加入乙腈5 mL、三氯乙酸溶液15 mL，攪拌均勻。以上操作完成后，運用超聲提取10 min，再次振蕩提取10 min，使其不低于4000r/min離心10min，提高實驗精準度。

（2）準備好過濾紙，用三氯乙酸溶液打濕過濾紙之后，再把上清液在三氯乙酸溶液打濕過的濾紙上過濾，之后再取用三氯乙酸溶液25 mL，取用5 mL過濾后的上清液，倒入5 mL水攪拌均勻，放著備用。

（3）把上面?zhèn)溆玫幕旌弦旱谷牖罨蟮妮腿≈?，先? mL水進行洗滌，再用3 mL甲醇洗滌，擦至半干，最后準備6 mL氨水甲醇溶液，用于洗脫。

（4）在100 mL容量瓶中，放入100 mg三聚氰胺樣品，然后再容量瓶中倒入甲醇水用于溶化三聚氰胺，最后配置的儲備液濃度為1mg/mL。放在4℃的溫度環(huán)境中保存，注意要避免陽光直射影響溶液質(zhì)量。

（5）最后，在色譜過程中，用流動相攜帶三聚氰胺標準儲備液向前移動，稀釋三聚氰胺標準儲備液，并逐級稀釋成濃度為0.8、2、20、40μg/mL的標準工作液，再濃度由低到高或者由高到低依次進行測量。

2 數(shù)學模型

根據(jù)以上實驗得出計算公式如下。

公式（1）中：X是試樣中三聚氰胺的含量；As是標準溶液中三聚氰胺的峰面積；m是試樣的質(zhì)量；A是樣液中三聚氰胺的峰面積；c是標準溶液中三聚氰胺的濃度；V是樣液最終定容體積；f是稀釋倍數(shù)。

因為以上各種因素都具有不穩(wěn)定性，考慮因素的變動，所以公式（1）可以轉(zhuǎn)化為以下數(shù)學模型。

公式（2）中：R是測試過程中的回收率；f（重）為重復性修正因子，f（校）為校正曲線擬合修正因子。

3 不確定度來源分析

通過以上實驗，用高效相色譜法來測量乳制品中三聚氰胺的含量,其中，不確定度的來源大致是以下幾個方面。①檢測方法引入的標準不確定度；②待測樣品溶液定容體積或者待測樣品稱量引入的標準不確定度等。

4 測量結(jié)果分析

4.1 乳制品稱樣不確定度

依據(jù)測量方法稱取所需樣品，樣品質(zhì)量為2.0024g，稱量的允差為±0.1mg，分布要均勻，這樣稱樣產(chǎn)生的不確定度為：

相對標準不確定度為：

4.2 擴展不確定度評定

根據(jù)包含因子×合成標準不確定度=擴展不確定度，取置信概率p=95%，則k=2，那么測定的擴展不確定度為：

4.3 測量不確定度報告

乳制品中三聚氰胺測量的最終結(jié)果是：X=（3.07±0.22）mg/kg（k=2）。

5 結(jié)語

對此次乳制品中三聚氰胺的不確定性進行測量后的出相應結(jié)果，在測量過程中，導致不確定性的因素有好幾個，本實驗通過反復測量，減少不確定性的誤差，對每次的測量結(jié)果都做相應記錄和總結(jié)，再在測量的不同結(jié)果的基礎(chǔ)上對公式進行反復修改，最終得出結(jié)論。