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        HPV癌基因E6/E7 mRNA在宮頸癌篩查中的臨床意義

        2018-08-22 00:46:12羅佩宜
        中國實用醫(yī)藥 2018年21期
        關(guān)鍵詞:采樣器拷貝數(shù)癌基因

        羅佩宜

        宮頸癌是繼乳腺癌的全球第二大癌癥, 其發(fā)病率位居發(fā)展中國家女性婦科腫瘤的首位, 嚴重威脅著我國女性的生命健康[1]。研究顯示, 宮頸癌的發(fā)生與 HPV感染密切相關(guān)[2]。事實上, HPV感染宮頸上皮細胞后將產(chǎn)生E6和E7兩種癌蛋白, 癌蛋白通過鈍化宿主細胞的抑癌蛋白如 p53、PRb等而導致細胞周期控制失常, 最終引發(fā)癌變[3]。因此, 在宮頸癌初步篩查中檢測HPV癌基因 E6/E7 mRNA是否更具有診斷價值是目前臨床研究的熱點。在本項研究中, 作者就HPV癌基因E6/E7 mRNA在宮頸癌篩查中的檢測價值進行了探討,現(xiàn)報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選取2017年1~12月于廣東省東莞市清溪醫(yī)院進行宮頸病變篩查的400例受試者作為研究對象, 納入標準:①就診癥狀主要表現(xiàn)為陰道分泌物增、異味、異常出血,宮頸炎;②均已婚或有性生活史;③對研究知情同意且經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會的批準;④排除存在子宮切除手術(shù)史或?qū)m頸手術(shù)史和盆腔放射治療史的受試者;⑤在檢查前未接受治療。本研究受試者年齡23~65歲, 平均年齡(46.8±6.6)歲。

        1.2 檢測方法 均接受宮頸TCT檢查及高危型HPV-DNA檢測, 并對結(jié)果為陽性者進一步進行陰道鏡下宮頸活檢和HPV癌基因E6/E7 mRNA檢測。采集標本前24 h內(nèi)禁止性生活、陰道檢查、陰道灌洗及用藥。HPV癌基因E6/E7mRNA檢測流程:①填寫送檢單必要信息。②專用采樣器采集送檢:樣本類型分為:a.宮頸脫落細胞:將采樣器的中央刷毛部分輕輕插入子宮頸管, 以便較短的刷毛能夠完全接觸到子宮頸口, 之后柔和的向前抵住采樣器, 并按同一個時針方向轉(zhuǎn)動采樣器5整周, 切勿來回轉(zhuǎn)動, 將采樣器按入保存液小瓶底, 迫使刷毛全部散開, 共10次, 然后在溶液中快速擺動采樣器以進一步的將細胞樣本漂洗下來, 取下采樣器,擰緊瓶蓋送檢。標本液需>5 ml, 專用細胞保存液保存2周。拒檢說明:在HPV-DNA保存液中保存的樣本;與TCT標本共用時, 檢測量<3 ml。b.蠟塊組織, 3個以上玻片。結(jié)果用光子數(shù)表示, 經(jīng)Diaearta計算機軟件轉(zhuǎn)換為拷貝數(shù)。

        1.3 分型標準 活檢結(jié)果根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)分類和診斷標準分為:正常/炎癥、CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級以及SCC。所有宮頸活檢結(jié)果均采用雙盲法由2名有多年臨床工作經(jīng)驗的病理科醫(yī)生共同確定, 若診斷不一致, 則由2名病理醫(yī)師在雙頭鏡下達成共識。

        1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料以均數(shù)±標準差表示, 采用t檢驗;計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。p<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

        2 結(jié)果

        2.1 TCT、HPV與宮頸活檢結(jié)果 TCT檢測顯示陽性139例、陰性261例, HPV-DNA檢測顯示陽性175例、陰性225例。兩種檢測結(jié)果陽性者為264例。見表1。宮頸活檢結(jié)果顯示正常/炎癥、CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級以及SCC例數(shù)分別為178例、48例、21例、11例以及6例。見表2。

        表1 400例受試者TCT及HPV-DNA檢測結(jié)果[n(%)]

        表2 264例受試者宮頸活檢結(jié)果[n(%)]

        2.2 不同宮頸活檢分級的HPV癌基因E6/E7 mRNA表達陽性率和拷貝數(shù)比較 HPV癌基因E6/E7 mRNA表達陽性率及拷貝數(shù)隨著病變級別的遞增而增加, 且各CIN分級以及SCC患者HPV癌基因E6/E7 mRNA表達陽性率均明顯高于正常/炎癥者, 同時各級宮頸活檢分級者HPV癌基因E6/E7 mRNA拷貝數(shù)兩兩比較差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。見表3。

        表3 不同宮頸活檢分級的HPV癌基因E6/E7 mRNA表達陽性率和拷貝數(shù)比較[n(%),]

        表3 不同宮頸活檢分級的HPV癌基因E6/E7 mRNA表達陽性率和拷貝數(shù)比較[n(%),]

        注:與正常/炎癥比較, ap<0.05;與CINⅠ級比較, bp<0.05;與CINⅡ級比較, cp<0.05;與CINⅢ級比較, dp<0.05

        宮頸活檢分級 例數(shù) HPV癌基因E6/E7 mRNA表達陽性 HPV癌基因E6/E7 mRNA拷貝數(shù)(copies/ml)正常/炎癥 178 86(48.31) 176.26±43.05 CIN Ⅰ級 48 41(85.42)a 1168.58±248.05a CIN Ⅱ級 21 21(100.00)a 2975.30±479.44ab CIN Ⅲ級 11 11(100.00)a 4238.35±836.20abc SCC 6 6(100.00)a 7493.16±1654.82abcd

        3 討論

        研究顯示, 99.7%的宮頸癌患者存在HPV 感染, 而高危型HPV的持續(xù)感染可逐步引起CIN 與宮頸癌[4]。TCT檢測和HPV-DNA是目前常用于宮頸癌的篩查手段[5-9], 前者子宮頸檢測結(jié)果與組織病理 CINⅠ~Ⅲ級的診斷符合率較低, 且存在較高的漏診率;后者則存在檢測特異性和陽性預測值低等不足。近年來, HPV癌基因E6/E7 mRNA檢測成為宮頸癌篩查的研究熱點, HPV的 E6、E7為HPV的兩條癌基因片段,其中E6 蛋白與抑癌蛋白p53 結(jié)合, 通過阻斷異?;蚣毎牡蛲? 導致細胞永生化和宮頸病變的發(fā)生;E7 蛋白通過特異性結(jié)合pRb蛋白而抑制細胞周期的進展, HPV E6/E7 mRNA過度表達可使細胞生長抑制劑失活, 加速異常細胞的過度增殖, 導致宮頸癌的發(fā)生發(fā)展[10]。本項研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)TCT檢測顯示陽性139例、陰性261例, HPV-DNA檢測顯示陽性175例、陰性225例。宮頸活檢結(jié)果顯示正常/炎癥、CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級以及SCC例數(shù)分別為178例、48例、21例、11例以及6例。HPV癌基因E6/E7 mRNA表達陽性率及拷貝數(shù)隨著病變級別的遞增而增加, 且各CIN分級以及SCC患者HPV癌基因E6/E7 mRNA表達陽性率均明顯高于正常/炎癥者, 同時各級宮頸活檢分級者HPV癌基因E6/E7 mRNA拷貝數(shù)兩兩比較差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。提示HPV癌基因E6/E7 mRNA 表達量與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)聯(lián)。

        綜上所述, HPV癌基因E6 /E7 mRNA拷貝數(shù)與宮頸病變程度相關(guān), HPV癌基因E6/E7 mRNA可作為本地區(qū)宮頸癌的篩查手段之一, 對于預測宮頸病變的發(fā)生發(fā)展具有重要意義。

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