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        經(jīng)皮穿刺法構(gòu)建新西蘭兔中心靜脈置管模型及評價*

        2018-08-20 09:48:32趙曉勇魏秀紅孫偉娟常渝昕李佳慧
        實驗動物科學 2018年1期
        關(guān)鍵詞:實驗手術(shù)模型

        沈 嬌 趙曉勇 王 曉 魏秀紅 孫偉娟 常渝昕 李佳慧

        (濰坊醫(yī)學院護理學院, 濰坊 261053)

        中心靜脈置管(Central vein catheters,CVC)是指各種靜脈導管插入后,尖端達到上、下腔靜脈與右心房交匯處[1],為臨床常用的靜脈給藥方式之一,對腫瘤患者化療至關(guān)重要[2-3]。據(jù)報道,每年約1 500萬患者選擇中心靜脈置管,15%以上的患者發(fā)生了并發(fā)癥[4]。對此,Pittiruti[5]、李全磊等[6]進行了相關(guān)臨床研究,但鑒于倫理學因素,尚不能在人體開展活體研究實驗。Barraza等[7]認為實驗動物中心靜脈置管是一個新信息,且具有挑戰(zhàn)性。因此,構(gòu)建實驗動物中心靜脈置管模型成為解決該問題的橋梁。本研究采用體外經(jīng)皮穿刺法,構(gòu)建新西蘭兔中心靜脈置管模型,并做出相關(guān)評價,報告如下:

        1 材料和方法

        1.1 動物

        普通新西蘭兔,10只,雌雄不拘,體質(zhì)量為2.0~2.5 kg,術(shù)前禁食8 h,禁飲4 h。所有實驗動物均由濰坊醫(yī)學院動物實驗中心提供。許可證號:SCXK(魯)20160002。

        1.2 器材

        PICC導管(美國BD公司,型號:4Fr),戊巴比妥鈉(Sigma公司,生產(chǎn)批號:69020100),鹽酸利多卡因(生產(chǎn)批號:1512J08),高敏C-反應蛋白檢測試劑盒(濰坊市康華生物技術(shù)有限公司,生產(chǎn)批號:170201),離心機(Eppendorf,德國產(chǎn)),鹽酸肝素鈉,生理鹽水,手術(shù)常規(guī)器械,20 mL空針等。

        1.3 建模方法

        1.3.1麻醉與固定:2%戊巴比妥鈉按照40 mg/kg體質(zhì)量,肌肉注射進行麻醉。待新西蘭兔后肢疼痛反射、角膜刺激反射消失后,將其固定于動物臺,保持呼吸道通暢,維持有效的呼吸功能。

        1.3.2備皮和消毒:雙側(cè)下頜骨以下及頸前區(qū)域全部剃毛,充分暴露頸部皮膚,然后用酒精消毒皮膚,再碘伏消毒三遍,其范圍大于備皮部位。無菌原則鋪上洞巾。

        1.3.3置管:助手按壓頸總靜脈近心端,使頸外靜脈充分暴露在視野下,操作者左手繃緊穿刺點處皮膚,右手執(zhí)穿刺針,順著頸外靜脈走向約30°角進針,針尖進入皮下后,進針角度調(diào)整約為15°繼續(xù)穿刺頸外靜脈,見穿刺針有回血時,再平行于頸部皮膚輕輕送入約1~2 cm,避免血管回縮致針尖脫出。穿刺成功后,左手固定針鞘,右手輕輕向外抽取針芯,針芯即將完全抽出時,左手食指迅速按住針鞘末端,以免血液溢出。右手持PICC導管緩慢送入7~8 cm[1],左手固定導管,右手拔出針鞘,然后抽出導絲。修剪導管外端留下約3~4 cm長度便于固定。連接導管延長器,連接導管延長管,20 mL空針抽回血,確保導管在血管中,并脈沖式推入5 mL生理鹽水,再以10U/mL肝素鈉溶液2 mL封管抗凝。

        1.3.4固定:PICC導管圍繞穿刺點環(huán)繞固定。2 mL空針抽取鹽酸利多卡因進行局部麻醉,順導管走向?qū)Ч芸p于皮膚。無菌紗布覆蓋穿刺點和導管,膠布纏繞固定。自制頭套固定于脖頸處,以保護導管,避免拔出。

        1.3.5模型保留:置管術(shù)后動物單籠飼養(yǎng),室溫25 ℃,濕度60%,環(huán)境清潔,室內(nèi)通風,置管后4~6 h恢復飲食、飲水。每天生理鹽水5 mL沖管一次,后以10U/mL肝素鈉溶液2 mL封管,直至模型終止。

        1.4 指標檢測

        分別于術(shù)前12 h,術(shù)后24 h,48 h,72 h采集右耳緣靜脈血,橘黃色促凝管內(nèi)放置3~4 h,待析出清亮血清后,移至離心機離心,3 000 r/mim,15 min。取上清液按高敏C-反應蛋白檢測試劑盒步驟進行檢測。

        1.5 評價標準

        確定建模成功的指標:①術(shù)后2~3 h恢復活動,72 h內(nèi)生命跡象平穩(wěn);②穿刺點處皮膚無紅腫、破潰、持續(xù)性出血等不良反應;③導管通暢無堵塞。

        模型終止條件:①穿刺點處皮膚紅腫、破潰、膿液流出等不良反應發(fā)生;②導管堵塞;③導管拔出;④動物死亡。

        1.6 統(tǒng)計方法

        2 結(jié)果

        2.1 建模結(jié)果

        本實驗共構(gòu)建10例新西蘭兔中心靜脈置管模型,術(shù)中麻醉耐受性良好,術(shù)后24 h模型存活率100%,建模成功率100%。

        2.2 指標檢測結(jié)果

        較術(shù)前12 h比較,各時點耳緣靜脈血中hs-CRP變化差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),且置管對模型產(chǎn)生的差異無統(tǒng)計學意義(P=0.11,α=0.05)。

        表1 置管前后各時點hs-CRP含量Table 1 before and after catheterization hs-CRP content

        注:a表示與術(shù)前12 h相比,P>0.05

        Note:asaid compared with 12 h before surgery,P>0.05

        2.3 生命體征及體質(zhì)量結(jié)果

        術(shù)前、術(shù)后3 d新西蘭兔呼吸、體溫、體質(zhì)量相對平穩(wěn),手術(shù)日體溫稍升高,呼吸稍降低,體質(zhì)量減輕。見圖1,圖2,圖3。

        圖1 體溫在術(shù)前、術(shù)后3 d的均數(shù)分布情況Fig.1 The mean distribution of body temperature atpreoperative and postoperative 3 days

        圖2 呼吸在術(shù)前、術(shù)后3 d的均數(shù)分布情況Fig.2 The mean distribution of respiration atpreoperative and postoperative 3 days

        圖3 體質(zhì)量在術(shù)前、術(shù)后3 d的均數(shù)分布情況Fig.3 The mean distribution of body weight atpreoperativ and postoperatively 3 days

        3 討論

        目前,中心靜脈置管術(shù)在臨床各科頗受重視[8],但導管為異物,易引起感染、導管堵塞等并發(fā)癥[9-10],不僅加重患者經(jīng)濟負擔,還阻礙治療進程,帶給患者痛苦,嚴重時將會危及生命[11-12]。因此,醫(yī)護人員應當明確其并發(fā)癥的發(fā)病機制及其表現(xiàn),確保治療順利進行,提高患者生活質(zhì)量[13]。目前,中心靜脈置管術(shù)的基礎研究已逐步在動物實驗中開展。傳統(tǒng)的新西蘭兔頸外靜脈置管辦法[14-15]是通過手術(shù)來實現(xiàn)的,但由于損傷較大,期待新辦法建模。本研究采用經(jīng)皮穿刺新西蘭兔頸外靜脈構(gòu)建CVC模型,并對所建模型作出相關(guān)評價,以探討該建模辦法的可行性及創(chuàng)新性。

        3.1 穿刺損傷小,模型易保存

        Chauhau等[16],Allan 等[17]建模時均需要剪破皮膚分離頸外靜脈并結(jié)扎,此種辦法建??稍斐奢^大面積的創(chuàng)傷,因此,Larsson等[18]建議探索經(jīng)皮穿刺法行中心靜脈置管,精制模型,以減少建模所致的手術(shù)創(chuàng)傷和術(shù)后并發(fā)癥。本實驗在建模思路上摒棄了傳統(tǒng)的手術(shù)思維,采用體外盲穿法穿刺頸外靜脈,所建模型術(shù)后24 h存活率及成功率均為100%,建模結(jié)果較為理想。本實驗所采用的建模技術(shù)向臨床靠攏,減少了對實驗動物的損傷及刺激,有利于動物機體恢復,大大降低因技術(shù)方法迥異而造成的實驗誤差,而且提高了動物的存活率和模型的保存率。PICC導管末端接有透明延長管,既便于固定,防止導管脫出,又能很好地觀察導管內(nèi)回血情況。模型建成之后,自制紙殼頭套罩住動物頭部,防止動物抓撓導管,有利于模型的長期保存。

        3.2 可行性及實用性

        Ye等[19]認為建立適當?shù)膭游锬P褪菍嶒灣晒﹂_展的關(guān)鍵。因此,合適的實驗器材是實驗成功的保障,本實驗所選用的導管材質(zhì)為美國BD 公司生產(chǎn)的硅膠單腔三向瓣膜導管,型號為4Fr,符合臨床所用導管的要求,可避免因材質(zhì)問題而影響實驗結(jié)果。據(jù)實驗結(jié)果顯示,置管后3 d內(nèi),hs-CRP檢測結(jié)果差異無顯著統(tǒng)計學意義,表明該辦法置管尚未引起炎癥反應。據(jù)相關(guān)文獻報道,中心靜脈導管保留時間不宜超過4周[1],由此可見,該模型適用于中心靜脈置管術(shù)的實驗研究。結(jié)果顯示,手術(shù)日實驗兔體溫、呼吸、體質(zhì)量稍有波動,術(shù)后1 d即恢復正常水平,該種現(xiàn)象可能與麻醉藥的呼吸抑制作用有關(guān),且麻醉藥代謝及侵入性操作均可引起體溫波動,術(shù)前動物禁飲禁食,體質(zhì)量可稍降低。但與位娟等[1]的實驗中建立的模型相比,本實驗建立的模型生命體征較為平穩(wěn),可行性高。

        3.3 經(jīng)濟、方便

        手術(shù)有風險,易造成動物浪費,而Larsson等[18],Pardo等[20]B超引導下建模辦法,其成本較高。本模型僅需操作者經(jīng)皮穿刺頸外靜脈即可完成置管工作,且建模成功率100%,避免動物浪費,節(jié)省手術(shù)耗材;也不需要切皮、結(jié)扎靜脈、游離頸靜脈等具有難度又繁瑣的工作,為操作者省力;同時簡化了傳統(tǒng)手術(shù)建模的冗長工作,節(jié)省建模時間。構(gòu)建模型的經(jīng)濟效益是決定著實驗能否順利完成的重要保障。

        綜上所述,本實驗采用經(jīng)皮穿刺頸外靜脈的辦法構(gòu)建新西蘭兔中心靜脈置管模型,具有可行性、實用性及創(chuàng)新性,且能很好地模擬臨床,為臨床中心靜脈置管術(shù)開展實驗性研究奠定基礎。

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