張衛(wèi)國 王晶 雷彩鵬 范俊利

在世界范圍內(nèi)，食管癌是腫瘤的第六大死因[1]。食管癌早期癥狀不明顯，出現(xiàn)臨床癥狀時往往已是中晚期。近年來診斷、分期和多學科綜合治療的發(fā)展，使得食管癌患者生存率有所改善，但5年總生存率仍為15%～25%[2]。食管癌治療失敗的原因主要歸結(jié)為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤侵襲。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤的局部侵襲能力大小與金屬基質(zhì)蛋白酶（MMP）高度相關(guān)[3]。其中金屬基質(zhì)蛋白酶2（MMP-2）的主要作用是降解Ⅳ型膠原蛋白[4]，在食管癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤及遠處轉(zhuǎn)移中具有一定的作用，受到學者的關(guān)注。隨著研究的深入，國內(nèi)外學者就MMP-2與食管癌臨床特征的關(guān)系進行研究，但結(jié)果不一。一些研究表明MMP-2在食管癌中高表達，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤深度、腫瘤大小、TNM分期密切相關(guān)，與腫瘤分化程度無關(guān)[5-6]。一些研究認為MMP-2與腫瘤大小無關(guān)[7-8]。有研究表明MMP-2與食管癌的腫瘤大小、分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無關(guān)[9]。因此，本研究收集國內(nèi)外發(fā)表的相關(guān)文獻，對MMP-2與食管癌臨床特征的關(guān)系進行Meta分析，為食管癌的治療提供依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 文獻檢索 利用計算機檢索PubMed、EMbase、知網(wǎng)、維普、萬方數(shù)據(jù)庫，最終納入28篇關(guān)于MMP-2與食管癌臨床特征關(guān)系的病例對照研究。中文檢索詞包括食管癌、MMP-2；英文檢索詞包括esophageal carcinoma、esophageal cancer、matrix metalloproteinase 2、MMP-2。采用主題詞與自由詞相結(jié)合的方式，手動檢索時限為建庫至2017年3月的參考文獻，語言限定：中文、英文。納入標準：（1）評價MMP-2與食管癌臨床特征關(guān)系的病例對照研究；（2）研究結(jié)果反映MMP-2在食管癌中的表達及其與臨床特征的關(guān)系，可直接或間接提供OR值及95%CI；（3）MMP-2的檢測采取免疫組化方法。排除標準：（1）質(zhì)量差、基本數(shù)據(jù)不全的文獻；（2）重復發(fā)表的文獻（對于重復報道的文獻，只納入最新發(fā)表或高質(zhì)量的文獻）；（3）僅有摘要，無法獲得全文數(shù)據(jù)的文獻。

1.2 方法

1.2.1 文獻質(zhì)量評價 應用紐卡斯爾-渥太華文獻質(zhì)量評價量表進行文獻質(zhì)量評價[10]。納入質(zhì)量評分≥6分的文獻。

1.2.2 文獻資料提取 由2位研究者分析并獲取納入文獻的原始數(shù)據(jù)，再比較雙方所獲取的數(shù)據(jù)。若雙方意見不一，重新找出原文討論，必要時請第三方仲裁。

1.3 統(tǒng)計學處理 應用RevMan 5.3統(tǒng)計軟件。對納入文獻進行異質(zhì)性檢驗，若無異質(zhì)性（I2＜50%或P＞0.05），則采用固定效應模型分析；若有異質(zhì)性（I2＞50%或P＜0.05），則采用隨機效應模型分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 文獻特征及質(zhì)量評價 28篇關(guān)于MMP-2與食管癌臨床特征關(guān)系的病例對照研究[5-8，11-34]，包括1 870例食管癌組織、1 044例正常對照組織。文獻特征及質(zhì)量評價結(jié)果，見表1。

2.2 Meta分析結(jié)果

2.2.1 食管癌組織與正常對照組織MMP-2表達比較有27篇文獻涉及食管癌組織與正常對照組織MMP-2表達，結(jié)果顯示MMP-2在食管癌組織中的表達明顯高于正常對照組織，差異有統(tǒng)計學意義（OR=10.90，95%CI：7.23～16.44，P＜0.05），見圖 1。

2.2.2 MMP-2與臨床特征的關(guān)系 涉及MMP-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床TNM分期、腫瘤浸潤深度、分化程度、腫瘤直徑的文獻分別有28、13、14、12、7篇。結(jié)果顯示有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌患者MMP-2表達明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學意義（OR=4.38，95%CI：3.42～5.60，P＜0.05），見圖 2；與 MMP-2 表達陰性患者比較，MMP-2表達陽性的食管癌患者臨床TNM分期較晚，差異有統(tǒng)計學意義 （OR=2.59，95%CI：1.46～4.58，P＜0.05），見圖3；在腫瘤浸潤深度方面，MMP-2表達陽性者腫瘤易侵及外膜（OR=5.00，95%CI：3.66～6.83，P＜0.05），見圖4；在腫瘤直徑方面，MMP-2表達陽性的食管癌患者較MMP-2表達陰性患者大（OR=1.70，95%CI：1.16～2.49，P＜0.05），見圖 5。關(guān)于 MMP-2 與腫瘤分化程度的關(guān)系，結(jié)果顯示組間差異無統(tǒng)計學意義（OR=1.51，95%CI：0.77～2.97，P ＞0.05），見圖 6；剔除曹婧、王曉旭的研究后，各研究結(jié)果間無統(tǒng)計學異質(zhì)性（I2=25%，P=0.22），故采用固定效應模型分析，結(jié)果顯示組間差異有統(tǒng)計學意義（OR=1.64，95%CI：1.15～2.33，P＜0.05），但該結(jié)果不可靠。

2.2.3 MMP-2與3年生存期的關(guān)系 有2篇文獻涉及MMP-2與食管癌患者3年生存期的關(guān)系，結(jié)果顯示MMP-2表達陽性的食管癌患者3年生存期短于MMP-2表達陰性患者，差異有統(tǒng)計學意義（HR=1.46，95%CI：1.16～1.84，P＜0.05），見圖 7。

3 討論

食管癌病死率較高，與早期診治困難、局部轉(zhuǎn)移及浸潤的關(guān)系密切。因此，探討食管癌的發(fā)病機制、尋找確診早期食管癌的指標以及食管癌靶向治療的新靶點是食管癌研究的熱點。細胞外基質(zhì)、基底膜是惡性腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的重要屏障，主要由Ⅳ型膠原纖維構(gòu)成[4]。MMP是一類鋅離子依賴的蛋白水解酶，在細胞外基質(zhì)降解過程中不可缺少。正常狀態(tài)下的機體組織MMP表達極少，但當人體處于多種生理或病理過程中則表達增多，如炎癥、胚胎發(fā)生、血管形成、腫瘤發(fā)生與發(fā)展等[35]。MMP-2是MMP家族的重要一員，MMP-2酶原經(jīng)水解后激活，降解細胞間基質(zhì)成分及Ⅳ型膠原[4]。在腫瘤侵襲及轉(zhuǎn)移過程中，腫瘤細胞與基底膜纖連蛋白、層粘連蛋白結(jié)合，分泌MMP-2或誘導細胞外基質(zhì)中細胞分泌MMP-2，以降解基底膜及細胞外基質(zhì)的有效成分，突破基底屏障，使腫瘤細胞向周圍組織、淋巴管和小血管浸潤，促進腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移。此外，MMP-2與血管內(nèi)皮生長因子相互協(xié)同降解血管基底膜，促進新血管的形成，為腫瘤的生長提供營養(yǎng)[35-36]。因此，MMP-2被認為在多種惡性腫瘤的發(fā)展過程中發(fā)揮作用，是腫瘤細胞向周圍侵襲的生化基礎(chǔ)[35]。研究表明MMP-2表達是食管癌發(fā)生浸潤及轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素，但其與食管癌組織病理特征的關(guān)系尚不統(tǒng)一。Ao等[6]研究表明MMP-2在食管癌組織中高表達，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤深度、腫瘤直徑、臨床TNM分期密切相關(guān)，與性別、年齡、腫瘤分化程度無關(guān)。Guo等[31]研究表明MMP-2在食管癌組織中高表達，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤深度、腫瘤分化程度相關(guān)，與性別、年齡、腫瘤直徑無關(guān)。吳清泉等[12]研究表明不同食管鱗癌分化程度、浸潤深度、臨床TNM分期以及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，MMP-2表達陽性率差異均有統(tǒng)計學意義。繆文強等[9]研究認為MMP-2與食管癌分化程度、腫瘤直徑、臨床TNM分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等有關(guān)。本文Meta分析結(jié)果表明：（1）與正常對照組織相比，食管癌組織中MMP-2過表達，是食管癌發(fā)生的危險因素；（2）MMP-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床TNM分期、腫瘤浸潤深度、腫瘤直徑、3年生存期均相關(guān)，而與分化程度的關(guān)系尚不確定；（3）其中1篇文獻的研究人群是印度患者，發(fā)現(xiàn)剔除該文獻后的統(tǒng)計結(jié)果與未剔除的結(jié)果一致。

表1 文獻特征及質(zhì)量評價結(jié)果

圖1 食管癌組織與正常對照組織MMP-2表達比較

圖2 MMP-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

圖3 MMP-2與臨床TNM分期的關(guān)系

圖4 MMP-2與腫瘤浸潤深度的關(guān)系

圖5 MMP-2表達與腫瘤直徑的關(guān)系

圖6 MMP-2與分化程度的關(guān)系

圖7 MMP-2與3年生存期的關(guān)系

綜上所述，本項Meta分析表明食管癌組織中MMP-2表達明顯高于正常食管組織，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤深度、臨床TNM分期、腫瘤直徑、3年生存期等有關(guān)，而與分化程度的關(guān)系尚不確定。提示MMP-2在食管癌的發(fā)生、發(fā)展過程中可能起著重要作用。本研究存在一定的局限性：（1）目前國內(nèi)關(guān)于MMP-2表達的檢測方法不一，研究結(jié)論可能存在一定的選擇偏倚；（2）納入文獻的病例均為亞洲人群，可能會影響整個系統(tǒng)分析的抽樣代表性，造成抽樣偏倚和分布偏倚；（3）納入文獻為英文或中文，未納入其他語種的文獻，會產(chǎn)生發(fā)表偏倚和語言偏倚；（4）關(guān)于MMP-2與3年生存期關(guān)系的文獻有2篇，總樣本量較少，可能對結(jié)果的可靠性產(chǎn)生影響。