張衛(wèi)國 王晶 雷彩鵬 范俊利

在世界范圍內(nèi)，食管癌是腫瘤的第六大死因[1]。食管癌早期癥狀不明顯，出現(xiàn)臨床癥狀時往往已是中晚期。近年來診斷、分期和多學(xué)科綜合治療的發(fā)展，使得食管癌患者生存率有所改善，但5年總生存率仍為15%～25%[2]。食管癌治療失敗的原因主要歸結(jié)為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤侵襲。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤的局部侵襲能力大小與金屬基質(zhì)蛋白酶（MMP）高度相關(guān)[3]。其中金屬基質(zhì)蛋白酶2（MMP-2）的主要作用是降解Ⅳ型膠原蛋白[4]，在食管癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中具有一定的作用，受到學(xué)者的關(guān)注。隨著研究的深入，國內(nèi)外學(xué)者就MMP-2與食管癌臨床特征的關(guān)系進(jìn)行研究，但結(jié)果不一。一些研究表明MMP-2在食管癌中高表達(dá)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤深度、腫瘤大小、TNM分期密切相關(guān)，與腫瘤分化程度無關(guān)[5-6]。一些研究認(rèn)為MMP-2與腫瘤大小無關(guān)[7-8]。有研究表明MMP-2與食管癌的腫瘤大小、分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無關(guān)[9]。因此，本研究收集國內(nèi)外發(fā)表的相關(guān)文獻(xiàn)，對MMP-2與食管癌臨床特征的關(guān)系進(jìn)行Meta分析，為食管癌的治療提供依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 文獻(xiàn)檢索 利用計算機檢索PubMed、EMbase、知網(wǎng)、維普、萬方數(shù)據(jù)庫，最終納入28篇關(guān)于MMP-2與食管癌臨床特征關(guān)系的病例對照研究。中文檢索詞包括食管癌、MMP-2；英文檢索詞包括esophageal carcinoma、esophageal cancer、matrix metalloproteinase 2、MMP-2。采用主題詞與自由詞相結(jié)合的方式，手動檢索時限為建庫至2017年3月的參考文獻(xiàn)，語言限定：中文、英文。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）評價MMP-2與食管癌臨床特征關(guān)系的病例對照研究；（2）研究結(jié)果反映MMP-2在食管癌中的表達(dá)及其與臨床特征的關(guān)系，可直接或間接提供OR值及95%CI；（3）MMP-2的檢測采取免疫組化方法。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）質(zhì)量差、基本數(shù)據(jù)不全的文獻(xiàn)；（2）重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)（對于重復(fù)報道的文獻(xiàn)，只納入最新發(fā)表或高質(zhì)量的文獻(xiàn)）；（3）僅有摘要，無法獲得全文數(shù)據(jù)的文獻(xiàn)。

1.2 方法

1.2.1 文獻(xiàn)質(zhì)量評價 應(yīng)用紐卡斯?fàn)?渥太華文獻(xiàn)質(zhì)量評價量表進(jìn)行文獻(xiàn)質(zhì)量評價[10]。納入質(zhì)量評分≥6分的文獻(xiàn)。

1.2.2 文獻(xiàn)資料提取 由2位研究者分析并獲取納入文獻(xiàn)的原始數(shù)據(jù)，再比較雙方所獲取的數(shù)據(jù)。若雙方意見不一，重新找出原文討論，必要時請第三方仲裁。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用RevMan 5.3統(tǒng)計軟件。對納入文獻(xiàn)進(jìn)行異質(zhì)性檢驗，若無異質(zhì)性（I2＜50%或P＞0.05），則采用固定效應(yīng)模型分析；若有異質(zhì)性（I2＞50%或P＜0.05），則采用隨機效應(yīng)模型分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)特征及質(zhì)量評價 28篇關(guān)于MMP-2與食管癌臨床特征關(guān)系的病例對照研究[5-8，11-34]，包括1 870例食管癌組織、1 044例正常對照組織。文獻(xiàn)特征及質(zhì)量評價結(jié)果，見表1。

2.2 Meta分析結(jié)果

2.2.1 食管癌組織與正常對照組織MMP-2表達(dá)比較有27篇文獻(xiàn)涉及食管癌組織與正常對照組織MMP-2表達(dá)，結(jié)果顯示MMP-2在食管癌組織中的表達(dá)明顯高于正常對照組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（OR=10.90，95%CI：7.23～16.44，P＜0.05），見圖 1。

2.2.2 MMP-2與臨床特征的關(guān)系 涉及MMP-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床TNM分期、腫瘤浸潤深度、分化程度、腫瘤直徑的文獻(xiàn)分別有28、13、14、12、7篇。結(jié)果顯示有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的食管癌患者M(jìn)MP-2表達(dá)明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（OR=4.38，95%CI：3.42～5.60，P＜0.05），見圖 2；與 MMP-2 表達(dá)陰性患者比較，MMP-2表達(dá)陽性的食管癌患者臨床TNM分期較晚，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （OR=2.59，95%CI：1.46～4.58，P＜0.05），見圖3；在腫瘤浸潤深度方面，MMP-2表達(dá)陽性者腫瘤易侵及外膜（OR=5.00，95%CI：3.66～6.83，P＜0.05），見圖4；在腫瘤直徑方面，MMP-2表達(dá)陽性的食管癌患者較MMP-2表達(dá)陰性患者大（OR=1.70，95%CI：1.16～2.49，P＜0.05），見圖 5。關(guān)于 MMP-2 與腫瘤分化程度的關(guān)系，結(jié)果顯示組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（OR=1.51，95%CI：0.77～2.97，P ＞0.05），見圖 6；剔除曹婧、王曉旭的研究后，各研究結(jié)果間無統(tǒng)計學(xué)異質(zhì)性（I2=25%，P=0.22），故采用固定效應(yīng)模型分析，結(jié)果顯示組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（OR=1.64，95%CI：1.15～2.33，P＜0.05），但該結(jié)果不可靠。

2.2.3 MMP-2與3年生存期的關(guān)系 有2篇文獻(xiàn)涉及MMP-2與食管癌患者3年生存期的關(guān)系，結(jié)果顯示MMP-2表達(dá)陽性的食管癌患者3年生存期短于MMP-2表達(dá)陰性患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（HR=1.46，95%CI：1.16～1.84，P＜0.05），見圖 7。

3 討論

食管癌病死率較高，與早期診治困難、局部轉(zhuǎn)移及浸潤的關(guān)系密切。因此，探討食管癌的發(fā)病機制、尋找確診早期食管癌的指標(biāo)以及食管癌靶向治療的新靶點是食管癌研究的熱點。細(xì)胞外基質(zhì)、基底膜是惡性腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的重要屏障，主要由Ⅳ型膠原纖維構(gòu)成[4]。MMP是一類鋅離子依賴的蛋白水解酶，在細(xì)胞外基質(zhì)降解過程中不可缺少。正常狀態(tài)下的機體組織MMP表達(dá)極少，但當(dāng)人體處于多種生理或病理過程中則表達(dá)增多，如炎癥、胚胎發(fā)生、血管形成、腫瘤發(fā)生與發(fā)展等[35]。MMP-2是MMP家族的重要一員，MMP-2酶原經(jīng)水解后激活，降解細(xì)胞間基質(zhì)成分及Ⅳ型膠原[4]。在腫瘤侵襲及轉(zhuǎn)移過程中，腫瘤細(xì)胞與基底膜纖連蛋白、層粘連蛋白結(jié)合，分泌MMP-2或誘導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)中細(xì)胞分泌MMP-2，以降解基底膜及細(xì)胞外基質(zhì)的有效成分，突破基底屏障，使腫瘤細(xì)胞向周圍組織、淋巴管和小血管浸潤，促進(jìn)腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移。此外，MMP-2與血管內(nèi)皮生長因子相互協(xié)同降解血管基底膜，促進(jìn)新血管的形成，為腫瘤的生長提供營養(yǎng)[35-36]。因此，MMP-2被認(rèn)為在多種惡性腫瘤的發(fā)展過程中發(fā)揮作用，是腫瘤細(xì)胞向周圍侵襲的生化基礎(chǔ)[35]。研究表明MMP-2表達(dá)是食管癌發(fā)生浸潤及轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素，但其與食管癌組織病理特征的關(guān)系尚不統(tǒng)一。Ao等[6]研究表明MMP-2在食管癌組織中高表達(dá)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤深度、腫瘤直徑、臨床TNM分期密切相關(guān)，與性別、年齡、腫瘤分化程度無關(guān)。Guo等[31]研究表明MMP-2在食管癌組織中高表達(dá)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤深度、腫瘤分化程度相關(guān)，與性別、年齡、腫瘤直徑無關(guān)。吳清泉等[12]研究表明不同食管鱗癌分化程度、浸潤深度、臨床TNM分期以及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，MMP-2表達(dá)陽性率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義?？娢膹姷萚9]研究認(rèn)為MMP-2與食管癌分化程度、腫瘤直徑、臨床TNM分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等有關(guān)。本文Meta分析結(jié)果表明：（1）與正常對照組織相比，食管癌組織中MMP-2過表達(dá)，是食管癌發(fā)生的危險因素；（2）MMP-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床TNM分期、腫瘤浸潤深度、腫瘤直徑、3年生存期均相關(guān)，而與分化程度的關(guān)系尚不確定；（3）其中1篇文獻(xiàn)的研究人群是印度患者，發(fā)現(xiàn)剔除該文獻(xiàn)后的統(tǒng)計結(jié)果與未剔除的結(jié)果一致。

表1 文獻(xiàn)特征及質(zhì)量評價結(jié)果

圖1 食管癌組織與正常對照組織MMP-2表達(dá)比較

圖2 MMP-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

圖3 MMP-2與臨床TNM分期的關(guān)系

圖4 MMP-2與腫瘤浸潤深度的關(guān)系

圖5 MMP-2表達(dá)與腫瘤直徑的關(guān)系

圖6 MMP-2與分化程度的關(guān)系

圖7 MMP-2與3年生存期的關(guān)系

綜上所述，本項Meta分析表明食管癌組織中MMP-2表達(dá)明顯高于正常食管組織，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤浸潤深度、臨床TNM分期、腫瘤直徑、3年生存期等有關(guān)，而與分化程度的關(guān)系尚不確定。提示MMP-2在食管癌的發(fā)生、發(fā)展過程中可能起著重要作用。本研究存在一定的局限性：（1）目前國內(nèi)關(guān)于MMP-2表達(dá)的檢測方法不一，研究結(jié)論可能存在一定的選擇偏倚；（2）納入文獻(xiàn)的病例均為亞洲人群，可能會影響整個系統(tǒng)分析的抽樣代表性，造成抽樣偏倚和分布偏倚；（3）納入文獻(xiàn)為英文或中文，未納入其他語種的文獻(xiàn)，會產(chǎn)生發(fā)表偏倚和語言偏倚；（4）關(guān)于MMP-2與3年生存期關(guān)系的文獻(xiàn)有2篇，總樣本量較少，可能對結(jié)果的可靠性產(chǎn)生影響。