◎ 朱建恩

（廣東產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，廣東 佛山 528300）

我國(guó)是一個(gè)農(nóng)業(yè)大國(guó)，隨著人們生活水平的不斷提升，食品安全問題逐漸成為普遍關(guān)注的話題。近年來，我國(guó)人口持續(xù)增長(zhǎng)，農(nóng)業(yè)種植面積也得到擴(kuò)張，隨之而來的便是果蔬質(zhì)量問題。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，農(nóng)藥是必不可少的化學(xué)藥品，其使用程度的增加，嚴(yán)重危害了蔬菜質(zhì)量、糧食產(chǎn)量。農(nóng)藥的過度使用，導(dǎo)致其在蔬菜中形成殘留，繼而引發(fā)中毒的現(xiàn)象，這是當(dāng)前非常嚴(yán)重的問題，必須應(yīng)用農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)加以解決。

1 農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)概述

1.1 應(yīng)用原理

當(dāng)前農(nóng)藥殘留最為嚴(yán)重的是蔬果殘留，比較常見的農(nóng)藥有有機(jī)磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯農(nóng)藥等。其中，有機(jī)磷農(nóng)藥若在種植中使用不規(guī)范或者頻率過高，會(huì)影響蔬果質(zhì)量，因此農(nóng)藥殘留檢測(cè)的重點(diǎn)便是有機(jī)磷、氨基甲酸酯這兩類農(nóng)藥。

一般檢測(cè)時(shí)比較常用方法包括酶抑制法、免疫分析法、生物傳感器法、酶抑制分光光度法。酶抑制通過是通過有機(jī)磷與氨基甲酸酯農(nóng)藥本身所帶有的可特異性，抑制昆蟲中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的乙酰膽堿酯酶活性，使其無法正常傳導(dǎo)，最終中毒而死。一般實(shí)驗(yàn)過程中，通過堿酯酶、有機(jī)磷（氨基甲酸酯農(nóng)藥）之間的反應(yīng)抑制酶活性，使用膽堿酯酶將靛酚乙酸酯進(jìn)行水解，使其在催化作用下成為乙酸、靛酚，從而對(duì)樣品內(nèi)是否有農(nóng)藥殘留進(jìn)行判斷[1]。

1.2 檢測(cè)設(shè)備

常用的農(nóng)藥殘留速測(cè)儀以多通道光路設(shè)備為主，該設(shè)備可以同時(shí)檢測(cè)若干個(gè)樣品，且操作簡(jiǎn)單、成本低，檢測(cè)完畢之后可以直接顯示出檢測(cè)結(jié)果，并且具備數(shù)據(jù)接口。此外，農(nóng)藥殘留檢測(cè)實(shí)驗(yàn)過程中，比較常用的設(shè)備也包括安鑫寶WT-51A、歐達(dá)科儀PR-202、CNY-817C等。試劑以酶為主，如乙酰膽堿酯酶（AChE），底物則多使用硫代乙酰膽堿、碘化代丁酰膽堿、碘化硫代乙酰膽堿。顯色劑主要是二硫代二硝基苯甲酸、2,6-二氯靛酚。經(jīng)過一段反應(yīng)時(shí)間之后通過分光光度法，按照吸光值的變化，計(jì)算ChE抑制率，根據(jù)最終計(jì)算結(jié)果判斷有機(jī)磷氨基甲酸酯農(nóng)藥的殘留量[2]。抑制率如果≥50%，且呈陽性，則可以判定其超標(biāo)。如果檢驗(yàn)時(shí)使用比色法，也就是分光光度法，其檢出限時(shí)間以3 min為準(zhǔn)。

2 農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)流程

蔬菜中一旦有農(nóng)藥殘留，必然會(huì)影響人們的身體健康，必須使用可行的檢測(cè)技術(shù)展開農(nóng)藥殘留檢測(cè)，檢驗(yàn)蔬菜是否符合食品安全標(biāo)準(zhǔn)，從根本上解決食品安全問題?，F(xiàn)如今，農(nóng)藥檢測(cè)所使用的方法主要有生物測(cè)定法、化學(xué)分析法、生物與化學(xué)相融合的綜合檢測(cè)法，這3種方法可以更加準(zhǔn)確且全面地檢測(cè)、分析蔬菜中農(nóng)藥殘留。所選擇的檢測(cè)技術(shù)不同，操作方式也不盡相同。為了快速、準(zhǔn)確的完成蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)，檢測(cè)人員必須選擇最合適的快速檢測(cè)技術(shù)。同時(shí)，實(shí)際選擇過程中，必須要對(duì)蔬菜特性進(jìn)行考慮[3]。蔬菜的儲(chǔ)存時(shí)間較短，檢測(cè)期間務(wù)必要提高效率，在有限的時(shí)間內(nèi)快速、高效地完成檢測(cè)。所以，此次分析中主要圍繞酶法快速檢測(cè)技術(shù)展開分析。實(shí)際檢測(cè)時(shí)，農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)流程分為采樣、提取液、選擇實(shí)驗(yàn)試劑、明確靜置時(shí)間、確定檢測(cè)時(shí)間這幾個(gè)步驟。

2.1 取樣

所選擇的葉類蔬菜主要選取葉尖部分，果菜選取果皮，使用剪刀將其剪為1 cm左右的試樣，重量以2 g為最佳。針對(duì)汁液內(nèi)包含酶破壞性、深色物質(zhì)褪色元素的果蔬（如辣椒、蘿卜、番茄）以及可以使最終結(jié)果呈現(xiàn)假陽性的蔬菜（如芹菜），取樣時(shí)需要將整株浸泡于器皿中，或者采用淋噴的方式。

2.2 提取液

使用提取液來提取樣品內(nèi)農(nóng)藥溶解，提取時(shí)間以2～10 min為最佳。

2.3 選擇試劑

蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)中比較常用的快速檢測(cè)試劑有提取液、酶底物以及顯色劑。一般所采用的試劑均是從儀器的生產(chǎn)廠家直接選購(gòu)、配送[4]。

2.4 明確靜置時(shí)間

靜置時(shí)間是摻入酶與顯色劑之后到摻入底物中的時(shí)間。實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，靜置時(shí)間如果維持在6～12 min，最終獲得的檢測(cè)結(jié)果并不明顯差異。

2.5 確定檢測(cè)時(shí)間

檢測(cè)時(shí)間是比色皿放置于比色池中，將蓋板蓋在上方，按下啟動(dòng)鍵直到顯示最終檢測(cè)結(jié)果的這一段時(shí)間，一般設(shè)置為3 min。

3 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)實(shí)踐

3.1 應(yīng)用范圍與類型

使用酶法進(jìn)行蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)，其適用范圍包括葉菜類、果菜類、瓜菜類等，這些種類的蔬菜中含有有機(jī)磷類以及氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留，有機(jī)磷類農(nóng)藥主要包括倍硫磷、氧化樂果和辛硫磷，而氨基甲酸酯類農(nóng)藥則包括殘殺威、克百威、速滅威以及滅多威。

3.2 檢測(cè)設(shè)備和樣品的處理

檢測(cè)設(shè)備包括GDYN-110SB型農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)儀、天平、振蕩器、魄力器皿、檢測(cè)酶、移液槍、緩沖液、底物與顯示器等。當(dāng)完成設(shè)備的準(zhǔn)備工作之后，必須處理實(shí)驗(yàn)所需樣品，將準(zhǔn)備好的蔬菜樣品稱取1 g放置于燒杯內(nèi)，并且在燒杯中注入5 mL緩沖液，以濕震蕩法持續(xù)60～120 s，將提取液倒出之后靜置3～5 min即可。

3.3 培養(yǎng)樣品溶液

在干試管內(nèi)放入容量為2.5 mL的樣品提取液，選擇相對(duì)應(yīng)的對(duì)照液，分別在樣品提取液和對(duì)照液中注入0.1 mL的酶液與顯色劑，將試管搖晃均勻之后，放置在溫度為37 ℃的恒溫箱內(nèi)15 min，隨后在試管內(nèi)注入容量為0.1 mL的底物，隨后觀察顯色是否出現(xiàn)反應(yīng)，放置到快速檢測(cè)儀器內(nèi)，根據(jù)儀器操作要求完成蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)工作。

3.4 檢測(cè)結(jié)果

最終所得出的結(jié)果判斷可以通過抑制率進(jìn)行判斷：

公式中，Δ0代表對(duì)照液反應(yīng)3 min之后，吸光度所呈現(xiàn)的變化值，Δt是3 min之后樣品所呈現(xiàn)的吸光度變化值。

對(duì)最終檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，以抑制率為最終結(jié)果，設(shè)置50%為界限。若蔬菜樣品計(jì)算后的抑制率＜50%，證明蔬菜農(nóng)藥殘留率滿足食品安全要求，即蔬菜樣品安全；若≥50%且多次試驗(yàn)之后結(jié)果依然不變，則證明蔬菜樣品農(nóng)藥殘留超標(biāo)，即蔬菜本身不安全。為了深入展開殘留超標(biāo)樣品，建議試驗(yàn)氣相色譜儀以及高效液相儀這兩個(gè)設(shè)備展開詳細(xì)檢測(cè)，如此便可以得知蔬菜內(nèi)農(nóng)藥殘留含量。

通過上述分析可知，使用酶法可以快速且高效地完成蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)，試驗(yàn)所消耗的時(shí)間小于20 min，且經(jīng)過驗(yàn)證最終試驗(yàn)準(zhǔn)確性較高，可以保證檢測(cè)后蔬菜安全性。

4 結(jié)語

蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)是保證蔬菜食品安全以及人體健康的重要舉措，應(yīng)用可行的蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)，有利于解決市場(chǎng)上蔬菜農(nóng)藥殘留問題，并且推動(dòng)我國(guó)農(nóng)業(yè)發(fā)展。