朱應(yīng)民， 苗春玉， 董杰麗， 徐文彬，楊志強(qiáng)，許海軍

(1.煙臺(tái)市畜牧獸醫(yī)工作站， 山東 煙臺(tái) 264001 ； 2.北京康牧獸醫(yī)藥械中心， 北京 海淀 100085)

傳染性囊病(IBD)是由傳染性囊病病毒(IBDV)引起的一種危害青年雞的烈性、高度傳染性疾病。Hirai等發(fā)現(xiàn)，IBDV感染能降低疫苗體液免疫反應(yīng)[1]。IBDV早期感染雛雞后不僅抑制疫苗的體液反應(yīng)，并使雞只對(duì)馬立克病，傳染性支氣管炎等更易感。免疫接種是控制IBD的主要方法。市場(chǎng)上可供選擇的IBDV疫苗有活疫苗、油佐劑滅活疫苗，基于生物技術(shù)進(jìn)步的IBD亞單位疫苗、表達(dá)多聚蛋白或者VP2片段的DNA疫苗以及表達(dá)IBDV免疫基因重組活病毒載體疫苗。目前，關(guān)于IBDV免疫基因重組載體疫苗對(duì)家禽腔上囊發(fā)育及生產(chǎn)效益的報(bào)道較少。本試驗(yàn)利用基因重組傳染性囊病疫苗，研究其對(duì)白羽肉雞的免疫功能和生產(chǎn)成績(jī)的影響，旨在為基因重組疫苗的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 所用疫苗為基因重組傳染性囊病疫苗，以火雞皰疹病毒(HVT)為載體、攜帶傳染性囊病病毒VP2 基因片段，購(gòu)自北京康牧獸醫(yī)藥械中心，商品名為立克法。

1.1 試驗(yàn)方法 試驗(yàn)選擇1日齡白羽肉雞，隨機(jī)分為2組。對(duì)照組白羽肉雞為田間免疫，14日齡飲水免疫IBD活疫苗；基因重組傳染性囊病疫苗組(試驗(yàn)組)白羽肉雞在孵化場(chǎng)于1日齡頸部皮下注射基因重組傳染性囊病疫苗。

1.2 指標(biāo)測(cè)定 在14、21、28、35日齡，在試驗(yàn)組和對(duì)照組隨機(jī)抓取8～10只雞，現(xiàn)場(chǎng)剖檢，并觀察腔上囊的發(fā)育情況。

計(jì)算肉雞出欄時(shí)的存活率、平均體重、料重比、歐洲生產(chǎn)指數(shù)和雞只利潤(rùn)。

分別在雞群1、14、21、35日齡進(jìn)行采血，用ELISA Plus試劑盒檢測(cè)雞群IBD VP2抗體水平。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 數(shù)據(jù)采用Excel 2007進(jìn)行整理與統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果

2.1 腔上囊發(fā)育情況 免疫基因重組傳染性囊病疫苗和常規(guī)IBD活疫苗后，觀察腔上囊發(fā)育的大小，由于基因重組傳染性囊病疫苗對(duì)腔上囊沒有損傷，腔上囊發(fā)育良好，確保雞只免疫功能的完整。如中插彩版圖1所示，14、21日齡2組雞的腔上囊大小、重量相似；28、35日齡試驗(yàn)組的腔上囊明顯大于IBD活苗免疫組；這充分說明21日齡后基因重組傳染性囊病疫苗免疫組雞只的腔上囊沒有任何損傷，其重量隨日齡增加而增加；但I(xiàn)BD常規(guī)活疫苗免疫組的腔上囊明顯受到損傷，其重量隨日齡增加反而降低。

2.2 生產(chǎn)成績(jī) 第一批試驗(yàn)生產(chǎn)成績(jī)?nèi)绫?所示：與對(duì)照組雞群相比，試驗(yàn)組雞群的存活率提高了1.68%；平均體重提高了0.08 kg；料重比降低了0.031；歐洲生產(chǎn)成績(jī)指數(shù)提高了11；每只雞多贏利0.686元。

表1 第1批肉雞出欄生產(chǎn)成績(jī)

第2批試驗(yàn)生產(chǎn)成績(jī)見表2，與對(duì)照組雞群相比，試驗(yàn)組雞群的存活率提高了1.94%；平均體重提高了0.034 kg；料重比降低了0.033；歐洲生產(chǎn)成績(jī)指數(shù)提高了17；每只雞多贏利0.77元。生產(chǎn)成績(jī)對(duì)比結(jié)果顯示，基因重組傳染性囊病疫苗免疫能明顯提高肉雞生產(chǎn)成績(jī)。

表2 第2批肉雞出欄生產(chǎn)成績(jī)

2.3 抗體水平 抗體水平檢測(cè)結(jié)果見圖2，結(jié)果表明，試驗(yàn)組雞群免疫后產(chǎn)生抗體較早，為雞群提供更早更好的保護(hù)。試驗(yàn)組和對(duì)照組雞群的IBD VP2 抗體滴度在21日齡左右均降到最低，但最低值不同。試驗(yàn)組的抗體滴度在4 000以上，而對(duì)照組只有2 000左右，試驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組。這說明21日齡前基因重組傳染性囊病疫苗就能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體，從而快速?gòu)浹a(bǔ)了母源抗體的衰退，而常規(guī)IBD活苗免疫組則尚未產(chǎn)生抗體，所以母源抗體繼續(xù)下降。

圖2 IBD ELISA Plus VP2抗體滴度

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)所用基因重組傳染性囊病疫苗是以火雞皰疹病毒(HVT)為載體、攜帶傳染性囊病病毒VP2 基因的載體疫苗。皰疹病毒具有實(shí)現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)基因投遞，建立無癥狀的潛伏感染，攜帶多個(gè)或較大基因等優(yōu)點(diǎn)[2]。VP2基因隨著載體疫苗病毒株的復(fù)制而表達(dá)并產(chǎn)生免疫保護(hù)力，可抵抗傳染性囊病病毒，包括經(jīng)典毒株、變異毒株和超強(qiáng)毒株[3]。該疫苗具有預(yù)防馬立克病和傳染性囊病的雙重作用。同時(shí)，由于基因重組傳染性囊病疫苗中沒有傳染性囊病活病毒也就不可能損傷腔上囊，而載體HVT本身也不會(huì)傷害腔上囊，這樣就保持了雞腔上囊的功能完整。該疫苗在白羽肉雞上的田間試驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證了其安全性，在孵化場(chǎng)對(duì)1日齡雛雞頸部皮下接種后，評(píng)估雞群腔上囊的外觀、大小，表明基因重組傳染性囊病疫苗對(duì)腔上囊沒有傷害。

傳染性囊病主要侵害3～6周齡的雞只，發(fā)病突然、病程短、死亡率高。但是，近年來蛋雞和10周齡以上的雛雞也時(shí)有發(fā)生，一年四季均可發(fā)病[4]。1972年Allan等[5]發(fā)現(xiàn)，早期感染傳染性囊病病毒(IBDV)可導(dǎo)致免疫抑制。雛雞感染IBDV后，腔上囊、脾臟的漿細(xì)胞明顯減少，脾臟B細(xì)胞抗體生成功能降低，體液免疫功能和細(xì)胞免疫功能顯著減弱[6]。馬立克病病毒可侵襲腔上囊、胸腺及脾臟等免疫器官，從而造成嚴(yán)重的免疫抑制[7]。本研究發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組提高了白羽肉雞的存活率和歐洲生產(chǎn)成績(jī)指數(shù)，給企業(yè)帶來更高的效益。這可能是因?yàn)榛蛑亟M傳染性囊病疫苗的使用能夠使雞群建立起強(qiáng)壯的免疫系統(tǒng)，提高機(jī)體對(duì)其他疫苗的免疫應(yīng)答，降低呼吸道等疾病的發(fā)生，從而使飼料的能量主要用于生長(zhǎng)而非抵抗疾病。

以HVT為載體的基因重組傳染性囊病疫苗接種后可以在雞體內(nèi)系統(tǒng)性復(fù)制，長(zhǎng)時(shí)間刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，同時(shí)不受母源抗體干擾，胚內(nèi)或1日齡即可注射免疫反應(yīng)產(chǎn)生時(shí)間早[8]。在3～5周齡傳染性囊病田間病毒感染最關(guān)鍵的時(shí)期基因重組傳染性囊病疫苗可避免免疫空白期的發(fā)生，而常規(guī)活毒疫苗則在17～24日齡時(shí)存在免疫空白期[9]。本研究結(jié)果亦表明相較于常規(guī)疫苗，重組傳染性囊病疫苗在白羽肉雞21日齡前便能誘導(dǎo)抗體的產(chǎn)生，有效地抵抗了IBDV的早期感染，為雞群提供更強(qiáng)的保護(hù)。

綜上所述，在白羽肉雞中使用基因重組傳染性囊病疫苗可提高雞群免疫性能和生產(chǎn)成績(jī)。為重組疫苗在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用提供了試驗(yàn)數(shù)據(jù)。