（山東省農(nóng)業(yè)廣播電視學(xué)校蓬萊市分校，山東蓬萊 265600）

近年來世界各國關(guān)于超強毒IBDV的報道越來越多，本病在經(jīng)濟上的重要性主要表現(xiàn)在三方面：一方面是對感染雞場造成毀滅性的打擊，由于易感日齡增大，使該病的預(yù)防增加了難度；另一方面，則是由于免疫器官尤其是中樞免疫器官的嚴重損傷，會引起感染雞更為嚴重的免疫抑制，不但使感染雞對其他病毒病和細菌病的易感性升高，而且對各種疫苗的免疫應(yīng)答降低，甚至失?。坏谌窃械纳唐芬呙缬袝r不能完全預(yù)防超強毒IBDV的發(fā)生和流行，給該病的防治帶來困難。

本研究從蓬萊市傳染性法氏囊炎防治的實際出發(fā)，主要研究同一日齡肉雞注射不同劑量雞傳染性法氏囊病基因工程亞單位疫苗（rVP2）后，抗體滴度的變化、自然發(fā)病情況以及法氏囊指數(shù)變化，確定可以對傳染性法氏囊病提供切實保護的最佳疫苗注射劑量，為達到對肉雞傳染性法氏囊的有效控制提供理論基礎(chǔ)和依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗用疫苗

雞傳染性法氏囊病基因工程亞單位疫苗（rVP2），由青島易邦生物工程有限公司提供。

1.2 試驗雞

AA白羽肉雞18000只，購自山東民和牧業(yè)有限責(zé)任公司。

1.3 實驗設(shè)計

將AA白羽肉雞18000只雞隨機分為三組，每組6000只，第一組第7d于頸部皮下注射雞傳染性法氏囊病基因工程亞單位疫苗0.3ml，第二組第7d于頸部皮下注射雞傳染性法氏囊病基因工程亞單位疫苗0.4ml，第三組第7d于頸部皮下注射雞傳染性法氏囊病基因工程亞單位疫苗0.5ml，三組肉雞均在同一條件下進行飼養(yǎng)。

1.4 試驗雞法氏囊指數(shù)及IBD抗體水平檢測

在接種疫苗后第7d、14d、21d、28d于三組中隨機抽取10只雞用托盤天平（感量為1g）稱重，剖檢取出法氏囊用電子天平（感量為0.1mg）稱重。

按以下公式計算法氏囊指數(shù)：法氏囊指數(shù)（mg/g）=法氏囊鮮重（mg）/ 體重（g）。

各組試驗雞剖殺前心臟采血，離心取血清，用IBD ELISA抗體檢測試劑盒檢測抗體，IBD ELISA抗體檢測試劑盒，購自哈爾濱獸醫(yī)研究所。

1.5 各組死亡雞只法氏囊變化

對各組死亡的雞進行解剖，法氏囊出現(xiàn)腫脹、呈黃色或有膠凍樣滲出物，或有出血，判定該雞只出現(xiàn)傳染性法氏囊典型眼觀病變，判定該雞只未受免疫保護；死亡雞只無傳染性法氏囊典型病變，判定該雞只受免疫保護。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗各組不同天數(shù)累計死亡雞只法氏囊變化情況統(tǒng)計表（單位：只）

第一組 第二組 第三組14d 法氏囊有變化 0 0 0 21d 法氏囊有變化 0 0 0 28d 法氏囊有變化 6 5 7 35d 法氏囊有變化 17 16 18

2.2 試驗各組雞只不同日齡法氏囊指數(shù)變化情況

日齡 第一組 第二組 第三組14 5.292±0.732 5.356±0.1925 5.282±1.264 21 6.350±0.9832 6.293±0.713 6.078±1.013 28 6.213±0.952 6.192±0.9407 5.992±1.515 35 5.764±0.782 5.812±0.725 5.735±0.987

2.3 試驗各組雞只IBD抗體水平變化情況

日齡 第一組 第二組 第三組14 685.32±31.315 701.25±58.952 698.45±71.346 21 812.35±52.128 825.96±26.342 822.82±32.489 28 1684.32±65.345 1732.95±35.648 1712.15±21.515 35 987.65±42.782 1025.46±35.725 996.25±56.987

3 結(jié)果與分析

（1）三組試驗雞只血清抗體水平在接種后14日齡逐漸升高，至28日齡左右達到高峰，可以對傳染性法氏囊炎在25—35日齡的高發(fā)期對接種雞只提供良好的保護，通過分析統(tǒng)計，三個劑量接種組之間抗體差異不顯著（P＞0.05），但以接種0.4毫升的一組抗體水平較好，但都與弱毒疫苗的抗體水平有一定差距，這與其他滅活疫苗應(yīng)用中出現(xiàn)相同的結(jié)果，這可能與滅活疫苗持續(xù)緩慢釋放有關(guān)。

（2）三個實驗組中均有雞只出現(xiàn)法氏囊腫脹、膠凍樣水腫等傳染性法氏囊炎癥狀，但是數(shù)量都很少，這可能與接種過程中出現(xiàn)打飛針、漏免或者個別雞只接種劑量過低有關(guān)。

（3）接種基因工程亞單位疫苗以后法氏囊指數(shù)下降幅度較小，這可能與基因工程亞單位疫苗不破壞法氏囊正常組織結(jié)構(gòu)，不引起法氏囊萎縮，不引起免疫抑制有關(guān)。

4 結(jié)論

通過對試驗結(jié)果的統(tǒng)計分析表明，雞傳染性法氏囊病基因工程亞單位疫苗（rVP2）免疫劑量在0.3ml及以上，即可誘導(dǎo)雞只產(chǎn)生顯著的血清抗體水平及抵抗野毒攻擊的免疫力，同時不會引起機體的免疫抑制。雞傳染性法氏囊病基因工程亞單位疫苗（rVP2）疫苗的出現(xiàn)為傳染性法氏囊炎病的控制提供了另外一條解決途徑。