（吉林省蛟河市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林蛟河 132500）

口蹄疫并在豬、牛、羊養(yǎng)殖過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)，是一種具有急性、接觸性、熱性的傳染病，病發(fā)后會(huì)為養(yǎng)殖人員造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。所以近些年，我國(guó)相關(guān)研究人員也致力于免疫疫苗的研制，但通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，選擇陰性生物進(jìn)行疫苗在病毒抗體中的水平，準(zhǔn)確性更高，為此，文章選擇了不同類(lèi)型陰性動(dòng)物的血清進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，分析出通過(guò)液相阻斷ELISA法能夠使血清在病毒抗體中的水平顯著得到提升。

1 實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)方法分析

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

本次實(shí)驗(yàn)針對(duì)某免疫地區(qū)的豬、牛、羊進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，其中共選擇了豬血清92份、牛血清156份、羊血清47份，實(shí)驗(yàn)中使用到的血清都來(lái)自于免疫口蹄疫地區(qū)的已免疫動(dòng)物。另外還要準(zhǔn)備20份已免疫的Asia-Ⅰ型牛血清和20份已免疫的O型牛血清，免疫前要對(duì)所有血清進(jìn)行液相阻斷檢測(cè)，其中發(fā)現(xiàn)兩種血清類(lèi)型的抗體水平均低于6.30%。通過(guò)感染的方式，讓其中血清類(lèi)型為Asia-Ⅰ型的六頭豬和六頭羊以及四頭血清類(lèi)型為O型的牛感染口蹄疫病，這些生物感染之前也需要做液相阻斷檢測(cè)，并記錄檢測(cè)性質(zhì)[1]。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

本次試樣主要是為了檢測(cè)血清抗體水平，所以必須使用液相阻斷檢測(cè)方法，并將檢測(cè)的40分血清樣品與NSP 3ABC-ELISA（口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC抗體）進(jìn)行對(duì)比驗(yàn)證。

選擇20頭牛進(jìn)行口蹄疫O型液與Asia-Ⅰ型液注射。在注射后的21d進(jìn)行液相阻斷方法檢測(cè)，檢測(cè)其血清的抗體水平[2]。

選擇六頭豬和六頭羊用已受口蹄疫病毒侵害的Asia-Ⅰ型血清進(jìn)行攻毒，在攻毒一周后，使用液相阻斷方法進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)其體內(nèi)的血清抗體水平；并選擇四頭牛，用已受口蹄疫病毒侵害的O型血清進(jìn)行攻毒，在攻毒一個(gè)月后用液相阻斷方法進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)其體內(nèi)的血清抗體水平。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與討論

2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

本次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中用液相阻斷方法檢測(cè)了295份健康豬、牛、羊生物的血清，其中僅有15份血清不屬于陰性范圍，對(duì)剩余的280份血清進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，牛羊生物的ELISA抗體水平均在16以下，豬的ELISA抗體水平在4以下，同時(shí)也表明該檢測(cè)方法主要適用陰性動(dòng)物檢測(cè)[3]。經(jīng)過(guò)與NSP3ABC-ELISA對(duì)比驗(yàn)證的40份血清檢測(cè)結(jié)果與液相阻斷方法一致。

其中接種口蹄疫免疫疫苗21d后，牛的血清抗體水平監(jiān)測(cè)結(jié)果為表所示。從表中可以看出接種疫苗牛體內(nèi)血清抗體水平要高于未接種疫苗的陰性動(dòng)物體內(nèi)的血清抗體水平。

通過(guò)液相阻斷檢測(cè)方法選擇的六頭陰性豬和六頭陰性羊在進(jìn)行Asia-Ⅰ型血清攻毒一周后，血清的抗體水平如表2所示；用液相阻斷檢測(cè)方法選擇的四頭牛進(jìn)行O型血清攻毒一個(gè)月后，血清的抗體水平如表2所示。

2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果談?wù)?/h3>

通過(guò)檢驗(yàn)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，40頭接種口蹄疫疫苗的牛在接種后21天進(jìn)行血清抗體水平檢測(cè)，結(jié)果普遍都有了升高，抗體滴度均≥128；而且通過(guò)使用不同類(lèi)型血清對(duì)隱性豬、羊進(jìn)行攻毒一周后，再進(jìn)行血清抗體水平檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，其抗體滴度也有了明顯的提升，這就說(shuō)明本次檢測(cè)方法以及使用的原理對(duì)于陰性口蹄疫動(dòng)物的抗體檢測(cè)準(zhǔn)確性較高。

表1 接種免疫疫苗后，O型和Asia-Ⅰ型牛血清抗體水平檢測(cè)表

表2 Asia-Ⅰ型血清攻毒的豬、羊及O型血清攻毒的牛的血清抗體水平監(jiān)測(cè)表

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，通過(guò)檢測(cè)可以觀(guān)察出，疫苗注射以及攻毒都能驗(yàn)證液相阻斷ELISA對(duì)于檢測(cè)口蹄疫病毒抗體水平有著較高的準(zhǔn)確性，而且檢測(cè)周期短，可以廣泛地應(yīng)用到實(shí)踐中，及時(shí)發(fā)現(xiàn)口蹄疫情，及時(shí)進(jìn)行疫情控制，從而降低損失。