魯艷平 胡敬寶 鄭娟麗 楊從意 陳慧基

乙型肝炎在我國(guó)病發(fā)率逐漸呈大幅上升趨勢(shì), 主要因病毒肝炎群的雙螺旋環(huán)狀封閉DNA病毒引發(fā)的, 作為人們死亡最常見(jiàn)的一種原因, 該病以病程較長(zhǎng)、治愈率低且易復(fù)發(fā)性為特征, 治療不當(dāng)或不及時(shí)易致肝硬化, 病發(fā)人群較廣,對(duì)患者生活及身心健康造成較嚴(yán)重威脅。西醫(yī)學(xué)上乙型肝炎其發(fā)病機(jī)制主因乙型肝炎病毒在體內(nèi)進(jìn)行持續(xù)復(fù)制, 抗原不斷表達(dá)與釋放, 引發(fā)肝內(nèi)炎癥因子頻繁活動(dòng)。但存在藥用后并發(fā)癥及耐藥性缺陷, 限制其應(yīng)用范圍［1,2］。尋找治療效果好、低不良作用的治療方法是關(guān)鍵。在傳統(tǒng)中醫(yī)中無(wú)乙型肝炎的相關(guān)記載, 經(jīng)辨證歸屬“黃疸”、“脅痛”等范疇。乙型肝炎病基本病機(jī)初期聚結(jié)在經(jīng)絡(luò), 久病傷絡(luò)入血, 病邪滯留,氣血失調(diào), 臟腑受損相互間產(chǎn)生影響。肝體失養(yǎng), 失疏泄,肝氣瘀結(jié), 脾失健運(yùn), 氣化乏源, 濕毒痰瘀阻, 則應(yīng)以消腫散結(jié)、化瘀解毒、健脾理氣為治療基本原則［3］。中醫(yī)療法主以中醫(yī)基本理論為原則進(jìn)行治療, 療效較為確切, 毒副作用較少。目前對(duì)乙型肝炎機(jī)制進(jìn)行研究表明其發(fā)病可能與T 淋巴免疫性細(xì)胞具有相關(guān)性。因此, 相關(guān)研究者對(duì)此病進(jìn)行深入研究［4］。本文清熱祛濕健脾方為中醫(yī)傳統(tǒng)經(jīng)典方劑, 本文通過(guò)對(duì)患者治療后的對(duì)HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者免疫情況進(jìn)行分析, 探究清熱祛濕健脾方聯(lián)合恩替卡韋分散片對(duì)患者肝功能、病毒復(fù)制及免疫性因子水平的變化進(jìn)行測(cè)定。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2016年1月～2017年10月篩選出HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者90例, 經(jīng)臨床診斷及病理顯示均符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組, 各45例。治療組中男29例, 女16例；年齡25～59歲, 平均年齡(38.5±6.9) 歲；對(duì)照組中男26例, 女19例, 年齡23～56歲,平均年齡(36.1±7.0)歲。所有患者均符合該病診斷標(biāo)準(zhǔn)并經(jīng)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。兩組患者一般資料比較, 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 對(duì)照組患者采用西醫(yī)常規(guī)治療方法積極對(duì)癥治療, 采用口服恩替卡韋分散片(正大天晴藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司, 國(guó)藥準(zhǔn)字 H20100019, 規(guī)格：0.5 mg)0.5 mg/d。治療組患者在對(duì)照組基礎(chǔ)上聯(lián)用中藥方劑清熱祛濕健脾方劑進(jìn)行治療。方子組成包括：黨參、丹參各30 g, 黃芪、茵陳、板藍(lán)根各20 g, 茯苓、白術(shù)、連翹、白芍各15 g, 蒲公英12 g, 陳皮、紅花、甘草、赤芍各10 g, 蒼術(shù)8 g, 1劑/d, 進(jìn)行水煎煮到180 ml并分早、晚2次服用。所有患者治療周期為24周。

在治療前后空腹抽取患者的外周靜脈血2 ml并立即加入肝素抗凝處理, 采用流式細(xì)胞儀對(duì)T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+CD25+Treg表達(dá)頻率檢測(cè)。采用雙抗夾心ELISA法檢測(cè)其血清TGF-β、IL-10水平。測(cè)定免疫細(xì)胞水平觀(guān)察并比較其變化, 記錄其起效時(shí)間以及復(fù)發(fā)情況。采用Realtime PCR法檢測(cè)血清HBV-DNA, 使用Roche-Cobas Ampliprep48系統(tǒng), 由上海羅氏診斷有限公司提供試劑。采用Olympus AU 2700自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清ALT、AST、γ-GT。篩選者在檢時(shí)需要清晨空腹抽取外周靜脈血進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 觀(guān)察指標(biāo) 兩組患者均經(jīng)檢測(cè)乙型肝炎標(biāo)志物血清中IL-10、TGF-β、T細(xì)胞亞群相關(guān)指標(biāo)水平及肝功指標(biāo)血清ALT、AST、γ-GT相關(guān)指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后免疫細(xì)胞水平變化比較 兩組治療后免疫細(xì)胞CD4+CD25+T/CD4+T水平明顯低于治療前, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。治療組患者治療后免疫細(xì)胞CD4+CD25+T/CD4+T水平低于對(duì)照組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.748, P＜0.05)。見(jiàn)表 1。

2.2 兩組患者治療前后TGF-β、IL-10水平比較 兩組治療后IL-10、TGF-β水平均低于治療前, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；兩組治療后IL-10、TGF-β水平比較, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

2.3 兩組患者治療前后肝功指標(biāo)變化比較 治療前, 兩組患者ALT、AST、γ-GT比較, 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；治療后, 觀(guān)察組患者ALT、AST、γ-GT優(yōu)于對(duì)照組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表3。

表 1 兩組患者治療前后免疫細(xì)胞水平變化比較( , %)

表 1 兩組患者治療前后免疫細(xì)胞水平變化比較( , %)

注：與對(duì)照組比較, aP＜0.05

組別 例數(shù) 治療前CD4+CD25+T/CD4+T 治療后CD4+CD25+T/CD4+T對(duì)照組 45 7.92±2.01 5.01±1.79治療組 45 7.95±2.13 4.04±1.55a

表2 兩組患者治療前后TGF-β、IL-10水平比較( , pg/ml)

表2 兩組患者治療前后TGF-β、IL-10水平比較( , pg/ml)

注：與對(duì)照組比較, aP＜0.05

組別 例數(shù) IL-10 TGF-β治療前 治療后 治療前 治療后對(duì)照組 45 87.5±10.1 57.3±10.3 158.9±57.3 103.2±55.6治療組 45 86.5±9.7 78.2±12.1a 153.4±50.8 138.2±52.5a

表3 兩組患者治療前后肝功指標(biāo)變化比較( , U/L)

表3 兩組患者治療前后肝功指標(biāo)變化比較( , U/L)

注：與對(duì)照組比較, aP＜0.05

組別 例數(shù) ALT AST γ-GT治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后對(duì)照組 45 114.6±15.1 97.3±16.3 89.2±16.6 83.2±15.6 77.4±14.2 67.2±13.6治療組 45 113.2±13.5 51.2±14.1a 94.2±15.6 68.2±13.4a 78.0±10.0 38.2±10.4a

3 討論

有報(bào)道稱(chēng)乙型肝炎病是一種細(xì)胞介導(dǎo)的免疫性?。?,6］。其病因主要為遺傳因素、免疫功能、炎癥感染、代謝紊亂及分泌障礙等, 其病因較復(fù)雜, 目前有關(guān)研究顯示其與發(fā)病及免疫功能異?？赡苡嘘P(guān), 如T淋巴免疫性細(xì)胞因子及炎性遞質(zhì)均與發(fā)病過(guò)程相關(guān), 外周血 T 淋巴細(xì)胞中含CD4 +、CD25 +,隨乙型肝炎嚴(yán)重度差異, 細(xì)胞水平變化, 因此與 T 淋巴細(xì)胞作用部位作為研究的關(guān)鍵靶點(diǎn)部位為目前研究熱點(diǎn)［7-10］。恩替卡韋分散片適應(yīng)證為本品適用于病毒復(fù)制活躍, 血清ALT持續(xù)升高或肝臟組織學(xué)顯示有活動(dòng)性病變的慢性成人乙型肝炎的治療, 但存在一系列并發(fā)癥。根據(jù)中醫(yī)理論, 其中醫(yī)藥在其領(lǐng)域顯示出巨大的優(yōu)勢(shì)。因此, 本文經(jīng)清熱祛濕健脾方聯(lián)合恩替卡韋分散片應(yīng)用治療, 對(duì)其效果進(jìn)行研究。

本研究結(jié)果顯示, 中藥方劑在臨床治療乙型肝炎病血清細(xì)胞免疫水平升高, 對(duì)慢性乙型肝炎病毒患者血液中T細(xì)胞亞群血中的CD4+CD25+Treg/CD4+T細(xì)胞比例在乙型肝炎攜帶患者中大幅下降；經(jīng)檢測(cè)細(xì)胞因子水平后與對(duì)照組相比,慢性乙型肝炎病毒患者IL-10水平降低, 進(jìn)一步表明患者T細(xì)胞亞群、IL-10水平變化與乙型肝炎病存在聯(lián)系, 可減輕對(duì)身體的損害, 明顯改善患者主要臨床癥狀。治療后治療組肝功指標(biāo)得到明顯改善, 對(duì)較對(duì)照組有效抑制病毒, 表明本中藥方清熱祛濕健脾方聯(lián)合恩替卡韋分散片調(diào)節(jié)患者的T淋巴細(xì)胞亞群的異常水平途徑提高機(jī)體免疫功能。在臨床上為制定評(píng)價(jià)效果指標(biāo)提供一定實(shí)驗(yàn)依據(jù), 有效把握患者治療時(shí)機(jī), 降低患者死亡率, 在臨床治療中具有一定臨床指導(dǎo)價(jià)值。

綜上所述, 清熱祛濕健脾方可明顯提高HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎免疫能力, 有效改善免疫細(xì)胞水平, 改善肝功能、抑制病毒, 在臨床治療中可應(yīng)用。