（湖北省醫(yī)藥工業(yè)研究院有限公司 湖北 武漢 430061）

梁璐 王敏 趙一朗 吳國生 凌颯(通訊作者)

右蘭索拉唑為質子泵抑制劑，即H+-K+-ATP酶抑制劑，多為苯并咪唑類衍生物，具有抗炎、抗氧化、抗凋亡及抗癌等多重藥理作用，主要用于糜爛性食管炎急性期及維持期的治療，以及非糜爛性胃食管反流疾病燒心癥狀的控制[1]。右蘭索拉唑是蘭索拉唑的右旋對映體，平均滯留時間更長、消除速率遠小于消旋體[2]。右蘭索拉唑在合成過程中使用了6種有機溶劑，這些溶劑會對人體健康和環(huán)境造成危害，因此有機溶劑的殘留量控制對保證藥品質量和用藥安全具有十分重要的意義。目前尚未見右蘭索拉唑有機溶劑殘留檢測方法的報道。本研究利用頂空氣相色譜法，建立了同時測定右蘭索拉唑中6種殘留溶劑的新方法，為右蘭索拉唑的質量控制提供參考。

1.儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 7890A氣相色譜儀；Agilent 7694E型自動頂空進樣器；Metler AL204型電子天平（Metler Toledo公司）。

1.2 試藥

右蘭索拉唑（湖北省醫(yī)藥工業(yè)研究院有限公司，批號：20171220、20171221、20171222、20180109、20180110、20180111）；甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯、DMF均為分析純。

2.方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent CB624毛細管色譜柱（30m×250μm，涂層厚1.4μm）；柱溫：40℃（保持5分鐘），以10℃/min 升至160℃（保持5min）；進樣口溫度：200℃，分流比：5∶1；檢測器溫度：250℃；載氣：氮氣，流速1.5ml/min；頂空平衡溫度：100℃（平衡時間 15min）；定量環(huán)溫度：110℃；傳輸線溫度：120℃。

2.2 溶液配制

樣品溶液的配制：精密稱取右蘭索拉唑0.3g，置10ml頂空瓶中，加入3mlN，N-二甲基甲酰胺（DMF），溶解。

對照品溶液的配制：精密稱取甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯適量加DMF稀釋制成每1ml中含289μg甲醇、503μg丙酮、65μg二氯甲烷、486μg乙酸乙酯、377μg環(huán)己烷、98μg甲苯的溶液。

2.3 專屬性試驗

取2.2項下對照品和樣品溶液分別進樣，各組分之間分離度均大于1.5，溶劑及樣品對檢測樣品中殘留溶劑均無干擾，色譜圖見圖1。

圖1 GC色譜圖

2.4 定量限與檢測限試驗

取對照品溶液逐級稀釋，分別進樣，檢測限以信噪比為3左右計算，定量限以信噪比為10左右計算。甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯檢出限分別為：1.30、0.91、0.70、1.60、0.24、1.00μg·ml-1；定量限分別為 4.34、3.02、2.34、5.35、0.79、3.33μg·ml-1。

2.5 線性和范圍

精密稱取579mg甲醇、989mg丙酮、132mg二氯甲烷、984mg乙酸乙酯、770mg環(huán)己烷、207mg甲苯加DMF稀釋至100ml，作為線性儲備溶液；分別量取線性儲備溶液2.5，4，5，6，7.5，10ml，置100ml量瓶，用DMF稀釋至刻度，即分別為50%、80%、100%、120%、150%、200%線性溶液，取3ml置頂空瓶，分別進樣，以濃度為橫坐標，響應值為縱坐標，求得線性回歸方程，結果見表1。

表1 線性結果表

2.6 精密度試驗

分別取2.2項下對照品溶液80%、100%、120%作為低、中、高精密度溶液，分別進樣3次，計算各不同濃度下RSD，甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯分別為4.57%、4.39%、4.14%、4.83%、4.05%、4.95%。

2.7 回收率

稱取右蘭索拉唑樣品0.3g，分別加入2.2項下對照溶液80%、100%、120%各3ml，分別進樣，結果得甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯的平均回收率分別為104.27%、103.34%、102.88%、102.12%、93.50%、100.27%。

2.8 耐用性

取2.2項下對照品溶液3ml，置于10ml頂空進樣瓶中，進樣，并分別改變頂空時間±5min，頂空溫度±5℃，初始柱溫±5℃，載氣流速±0.2ml/min，考察方法耐用性。頂空時間改變對峰面積無影響，頂空溫度升高峰面積增大，但對檢測結果無明顯影響；改變初始柱溫以及流速，峰面積無影響，出峰時間會提前或延后，但各組分間分離度仍滿足要求，對檢測結果無影響。

2.9 樣品檢測

分別取6批右蘭索拉唑樣品0.3g，按2.2項下配制，分別進樣，6批樣品中甲醇、丙酮、二氯甲烷、甲苯均未檢出，乙酸乙酯0.034%～0.045%，環(huán)己烷0.032%～0.062%。

3.討論

3.1 進樣方式的選擇

頂空進樣可減小樣品干擾，增大方法靈敏度，故選用頂空方式進樣。

3.2 溶劑的選擇

樣品濃度100mg/ml較高，應選擇對右蘭索拉唑溶解性好的溶劑。DMSO毒性較小且比較穩(wěn)定，但實驗過程中發(fā)現樣品用DMSO溶解后在GC色譜條件下會發(fā)生降解產生未知峰，故采用偏堿性稀釋劑DMF試驗，樣品易溶，且在GC條件下樣品穩(wěn)定，不會產生降解雜質。

3.3 頂空條件的選擇

耐用性試驗頂空10min、15min與20min對照品溶液峰面積無變化，表明頂空15min后，頂空進樣瓶中已達到氣液平衡，不需要增加頂空時間，以實現快速高效分析。

3.4 結論

方法專屬性、靈敏度及線性均良好，精密度、準確度、耐用性均滿足要求，本方法可應用于測定右蘭索拉唑中有甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯的殘留量。

[1]邢愛敏.用于胃食管反流癥狀的藥物右蘭索拉唑[J].藥學進展，2010,34（8）：377-378.

[2]房超，包泳初,陳慶華.右旋蘭索拉唑雙相控緩釋劑的藥動學研究及其臨床療效[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2011,32（7）：429-430.

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[4]任英，劉延鳳.頂空氣相色譜法測定吡非尼酮中有機溶劑殘留量[J].藥學研究,2013,32（5）：271-272.

[5]H Katsuki, H Yagi, K Arimori; Determination of R(+)-and S(-)-Lansoprazole using chiral stationary-phase liquid chromatography and their enantioselective pharmacokinetics in humans[J]. Pharmaceutical Research, 1996, 13 (4)： 611-5.

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