（湖北省醫(yī)藥工業(yè)研究院有限公司 湖北 武漢 430061）

梁璐 王敏 趙一朗 吳國生 凌颯(通訊作者)

右蘭索拉唑?yàn)橘|(zhì)子泵抑制劑，即H+-K+-ATP酶抑制劑，多為苯并咪唑類衍生物，具有抗炎、抗氧化、抗凋亡及抗癌等多重藥理作用，主要用于糜爛性食管炎急性期及維持期的治療，以及非糜爛性胃食管反流疾病燒心癥狀的控制[1]。右蘭索拉唑是蘭索拉唑的右旋對映體，平均滯留時間更長、消除速率遠(yuǎn)小于消旋體[2]。右蘭索拉唑在合成過程中使用了6種有機(jī)溶劑，這些溶劑會對人體健康和環(huán)境造成危害，因此有機(jī)溶劑的殘留量控制對保證藥品質(zhì)量和用藥安全具有十分重要的意義。目前尚未見右蘭索拉唑有機(jī)溶劑殘留檢測方法的報道。本研究利用頂空氣相色譜法，建立了同時測定右蘭索拉唑中6種殘留溶劑的新方法，為右蘭索拉唑的質(zhì)量控制提供參考。

1.儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 7890A氣相色譜儀；Agilent 7694E型自動頂空進(jìn)樣器；Metler AL204型電子天平（Metler Toledo公司）。

1.2 試藥

右蘭索拉唑（湖北省醫(yī)藥工業(yè)研究院有限公司，批號：20171220、20171221、20171222、20180109、20180110、20180111）；甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯、DMF均為分析純。

2.方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent CB624毛細(xì)管色譜柱（30m×250μm，涂層厚1.4μm）；柱溫：40℃（保持5分鐘），以10℃/min 升至160℃（保持5min）；進(jìn)樣口溫度：200℃，分流比：5∶1；檢測器溫度：250℃；載氣：氮?dú)?，流?.5ml/min；頂空平衡溫度：100℃（平衡時間 15min）；定量環(huán)溫度：110℃；傳輸線溫度：120℃。

2.2 溶液配制

樣品溶液的配制：精密稱取右蘭索拉唑0.3g，置10ml頂空瓶中，加入3mlN，N-二甲基甲酰胺（DMF），溶解。

對照品溶液的配制：精密稱取甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯適量加DMF稀釋制成每1ml中含289μg甲醇、503μg丙酮、65μg二氯甲烷、486μg乙酸乙酯、377μg環(huán)己烷、98μg甲苯的溶液。

2.3 專屬性試驗(yàn)

取2.2項(xiàng)下對照品和樣品溶液分別進(jìn)樣，各組分之間分離度均大于1.5，溶劑及樣品對檢測樣品中殘留溶劑均無干擾，色譜圖見圖1。

圖1 GC色譜圖

2.4 定量限與檢測限試驗(yàn)

取對照品溶液逐級稀釋，分別進(jìn)樣，檢測限以信噪比為3左右計算，定量限以信噪比為10左右計算。甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯檢出限分別為：1.30、0.91、0.70、1.60、0.24、1.00μg·ml-1；定量限分別為 4.34、3.02、2.34、5.35、0.79、3.33μg·ml-1。

2.5 線性和范圍

精密稱取579mg甲醇、989mg丙酮、132mg二氯甲烷、984mg乙酸乙酯、770mg環(huán)己烷、207mg甲苯加DMF稀釋至100ml，作為線性儲備溶液；分別量取線性儲備溶液2.5，4，5，6，7.5，10ml，置100ml量瓶，用DMF稀釋至刻度，即分別為50%、80%、100%、120%、150%、200%線性溶液，取3ml置頂空瓶，分別進(jìn)樣，以濃度為橫坐標(biāo)，響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，求得線性回歸方程，結(jié)果見表1。

表1 線性結(jié)果表

2.6 精密度試驗(yàn)

分別取2.2項(xiàng)下對照品溶液80%、100%、120%作為低、中、高精密度溶液，分別進(jìn)樣3次，計算各不同濃度下RSD，甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯分別為4.57%、4.39%、4.14%、4.83%、4.05%、4.95%。

2.7 回收率

稱取右蘭索拉唑樣品0.3g，分別加入2.2項(xiàng)下對照溶液80%、100%、120%各3ml，分別進(jìn)樣，結(jié)果得甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯的平均回收率分別為104.27%、103.34%、102.88%、102.12%、93.50%、100.27%。

2.8 耐用性

取2.2項(xiàng)下對照品溶液3ml，置于10ml頂空進(jìn)樣瓶中，進(jìn)樣，并分別改變頂空時間±5min，頂空溫度±5℃，初始柱溫±5℃，載氣流速±0.2ml/min，考察方法耐用性。頂空時間改變對峰面積無影響，頂空溫度升高峰面積增大，但對檢測結(jié)果無明顯影響；改變初始柱溫以及流速，峰面積無影響，出峰時間會提前或延后，但各組分間分離度仍滿足要求，對檢測結(jié)果無影響。

2.9 樣品檢測

分別取6批右蘭索拉唑樣品0.3g，按2.2項(xiàng)下配制，分別進(jìn)樣，6批樣品中甲醇、丙酮、二氯甲烷、甲苯均未檢出，乙酸乙酯0.034%～0.045%，環(huán)己烷0.032%～0.062%。

3.討論

3.1 進(jìn)樣方式的選擇

頂空進(jìn)樣可減小樣品干擾，增大方法靈敏度，故選用頂空方式進(jìn)樣。

3.2 溶劑的選擇

樣品濃度100mg/ml較高，應(yīng)選擇對右蘭索拉唑溶解性好的溶劑。DMSO毒性較小且比較穩(wěn)定，但實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)樣品用DMSO溶解后在GC色譜條件下會發(fā)生降解產(chǎn)生未知峰，故采用偏堿性稀釋劑DMF試驗(yàn)，樣品易溶，且在GC條件下樣品穩(wěn)定，不會產(chǎn)生降解雜質(zhì)。

3.3 頂空條件的選擇

耐用性試驗(yàn)頂空10min、15min與20min對照品溶液峰面積無變化，表明頂空15min后，頂空進(jìn)樣瓶中已達(dá)到氣液平衡，不需要增加頂空時間，以實(shí)現(xiàn)快速高效分析。

3.4 結(jié)論

方法專屬性、靈敏度及線性均良好，精密度、準(zhǔn)確度、耐用性均滿足要求，本方法可應(yīng)用于測定右蘭索拉唑中有甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)己烷、甲苯的殘留量。

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