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        不穩(wěn)定型心絞痛患者血管緊張素基因多態(tài)性與同型半胱氨酸的相關(guān)性研究

        2018-07-07 11:13:04邵靜張華敏
        中國社區(qū)醫(yī)師 2018年11期
        關(guān)鍵詞:不穩(wěn)定性心絞痛

        邵靜 張華敏

        摘要 目的:分析與探討冠心病不穩(wěn)定型心絞痛(UA)患者血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)基因多態(tài)性與血清同型半胱氨酸(HCY)水平之間的關(guān)系。方法:收治老年病科住院患者96例作為試驗(yàn)組,對照組為同期健康志愿者96例。對比兩組間血清HCY水平與基因I/D多態(tài)性。并根據(jù)PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果分Ⅱ型純合子、ID型雜合子、DD型純合子3組。結(jié)果:試驗(yàn)組ACE基因的DD基因型頻率高于對照組;相比于對照組患者,試驗(yàn)組的血清HCY水平明顯上升;Logistic回歸顯示,冠心病風(fēng)險(xiǎn)增加和血清HCY水平的上升存在直接相關(guān)性。結(jié)論:ACE基因I/D多態(tài)性中DD及ID基因型是CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,隨DD基因型頻率的增加,冠心病風(fēng)險(xiǎn)加大;CHD患者血清HCY水平較正常人明顯升高,其中UA患者升高更加顯著。提示血清HCY水平與ACE位點(diǎn)的基因型均共同與冠心病,尤其是不穩(wěn)定型心絞痛有良好的相關(guān)性。

        關(guān)鍵詞 ACE基因多態(tài)性;不穩(wěn)定性心絞痛;血清HCY水平

        UA屬于冠心病中急性冠脈綜合征的常見類型。ACE(I/D)基因多態(tài)性最先被證實(shí)與心肌梗死的發(fā)生有關(guān);缺失型純合子罹患CHD的危險(xiǎn)性明顯增加,并在參與HCY代謝過程起關(guān)鍵作用。有研究顯示,提高血清HCY水平會對血小板所介導(dǎo)平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生具有刺激性作用,由此就會對血管內(nèi)皮細(xì)胞造成損傷,進(jìn)而引發(fā)動脈粥樣硬化。本研究分析與探討ACE基因多態(tài)性與UA及血清HCY水平之間的關(guān)系,以期為預(yù)測CHD的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)、危險(xiǎn)分層和ACE基因多態(tài)性的推廣提供重要依據(jù)。

        資料與方法

        收治老年病科住院患者96例作為試驗(yàn)組,對照組為同期健康志愿者96例。試驗(yàn)組男58例,女38例;年齡60~71歲,平均(64.8±5.22)歲;病程4.7~ 8.2年,平均(6.42±2.05)年;體重指數(shù)(BMI)(28.15±4.87)kg/m2;收縮壓(125.58±15.09)mmHg,舒張壓(73.56±10.21)mmHg。對照組男59例,女37例;年齡40~ 61歲,平均(50.5±10.05)歲;BMI(23.73±2.28)kg/m2;收縮壓(110.65±13.56)mmHg,舒張壓(70.58±7.74)mmHg。

        診斷標(biāo)準(zhǔn):本研究患者通過冠脈造影、冠脈CTA以及平板運(yùn)動結(jié)果證實(shí)CHD。具體參考標(biāo)準(zhǔn)為《非ST段抬高心肌梗死與不穩(wěn)定性心絞痛診療指南》。

        納入標(biāo)準(zhǔn):與以上診斷標(biāo)準(zhǔn)相符合,研究對象簽署知情同意書,自愿參與研究。

        排除標(biāo)準(zhǔn):存在心肌病、先天性心臟病、肝腎疾病、心臟瓣膜病、免疫性疾病、惡性腫瘤、妊娠或哺乳期等。

        方法:①HCY測定:由病房護(hù)士于清晨抽取兩組人員靜脈血5 mL檢測HCY水平,采用SynchronCX7全自動生化分析儀檢測,應(yīng)注意在采集血液樣本之后及時(shí)進(jìn)行血漿分離,將其制作成無蛋白濾液,同時(shí)在測定前用巰基試劑確保二硫鍵打開。因?yàn)镠CY以多種形式存在于血漿內(nèi)部,必須對結(jié)合型、還原型以及氧化型3種HCY組分進(jìn)行檢測,由河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行具體操作。②ACE(I/D)多態(tài)性檢測:同時(shí)抽取兩組外周靜脈血2 mL,應(yīng)用DNA提取試劑盒將患者DNA提取出來,選擇PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)ACE基因的進(jìn)一步擴(kuò)增。操作具體反應(yīng)條件為5 min 95℃的預(yù)變性,循環(huán)數(shù)30個,各循環(huán)變性時(shí)間45 s,反映結(jié)束前進(jìn)行10 min的延伸,通過瓊脂糖凝膠實(shí)施電泳檢測。目的基因片段經(jīng)PCR擴(kuò)增后有存在287 bp的DNA片斷則為插入(I)型,即I等位基因,缺失287 bp的DNA片斷則為缺失(D)型,即D等位基因。PCR產(chǎn)物電泳后條帶長度490 kb,表示存在插入序列,為Ⅱ型;目的條帶長度190 kb,表示存在缺失序列,即DD型純合子;若條帶長度同時(shí)具有190 kb又有490 kb則表示同時(shí)存在插入、缺失序列,即ID雜合子。③冠狀動脈斑塊硬化程度評定:采用德國西門子64排螺旋CT(SOMATOMDefinition)對冠狀動脈斑塊進(jìn)行檢測,靜息心率> 70次/min患者,檢查前30 min口服50~100 mg倍他樂克,將其心率控制在<70次/mm。完成掃描后,由工作站(MMWP9594)分析?;谠紮M斷位圖像,通過相關(guān)后處理軟件實(shí)施圖像重建,其中包括最大密度投影、曲面重組、容積再現(xiàn)以及多平面重組,多角度重建患者病變部位,對患者管腔中斑塊特性進(jìn)行分析。所有圖像由兩名有經(jīng)驗(yàn)的放射科醫(yī)師進(jìn)行分析。根據(jù)CT值(14±26)HU、(91±21)HU、(419±194)HU將粥樣斑塊區(qū)分為軟斑塊、中等密度斑塊和鈣化斑塊。

        統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS 20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)算CHD組及對照組Ⅱ、ID和DD 3種基因型的頻數(shù),應(yīng)用X2檢驗(yàn)對兩組間基因型及等位基因的頻率進(jìn)行比較;兩組間年齡、體重指數(shù)、血清HCY水平等均數(shù)比較用t檢驗(yàn);采用Logistic回歸模型逐步分析CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素;P< 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        結(jié)果

        兩組患者ACE(I/D)多態(tài)性基因型及等位基因頻率比較:兩組間等位基因頻率分布和患者ACE基因型間的數(shù)據(jù)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=7.059,P=0.008)。此外,UA患者的D等位基因頻率、DD基因型明顯比健康人群高。見表1。

        試驗(yàn)組與對照組血清HCY水平比較:與對照組患者相比,冠心病組患者血清HCY水平比較高,兩組數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且以UA組HCY水平增高較明顯。見表2。

        利用Logistic回歸分析顯示,冠心病風(fēng)險(xiǎn)增加和血清HCY水平上升具有直接相關(guān)性,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表3。

        討論

        UA發(fā)病機(jī)制在于斑塊本身具有易損性,斑塊破裂出血引發(fā)人體內(nèi)血小板局部的黏附聚集,進(jìn)而形成誘發(fā)性腔內(nèi)堵塞性血栓,造成心肌嚴(yán)重供血不足。近些年,UA的發(fā)病率逐漸升高,發(fā)病年齡漸趨年輕化。其發(fā)病因素大致分為環(huán)境、遺傳兩方面。在探索UA遺傳因素方面,關(guān)鍵在于遺傳影響脂代謝機(jī)制。20世紀(jì)70年代后,很多研究發(fā)現(xiàn),HCY水平升高和AS相關(guān)性極大,其發(fā)病機(jī)制可能為引起血管內(nèi)皮損傷,斑塊堆積,促進(jìn)血管收縮及血栓形成。血清HCY水平越高,則冠脈病變越重。另一方面,腎素一血管緊張素系統(tǒng)在心血管疾病的病理生理機(jī)制中發(fā)揮重要的作用,ACE基因DD型可能為CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。目前發(fā)現(xiàn)ACE基因?qū)π难艿挠绊懽饔冒▽?dǎo)致血管內(nèi)皮增生及血管收縮、導(dǎo)致血管內(nèi)緩激肽水平降解,從而不能發(fā)揮擴(kuò)血管作用。

        本研究也對以上觀點(diǎn)進(jìn)行了證實(shí),因此冠心病的發(fā)生和血清HCY、ACE基因DD基因多態(tài)性的相關(guān)性極為密切,測定以上兩項(xiàng)指標(biāo)便于及時(shí)預(yù)防CHD和病癥的危險(xiǎn)分層,將血清HCY水平與ACE基因DD型基因多態(tài)性作為早期篩查CHD時(shí)的輔助指標(biāo),其臨床應(yīng)用前景非常廣闊。但是時(shí)間倉促,本研究尚缺乏完善性,為進(jìn)一步明確血清HCY水平和ACE基因型多態(tài)性為冠心病發(fā)病的一個獨(dú)立危險(xiǎn)因素,必須深入研究,擴(kuò)大樣本數(shù)量以降低實(shí)驗(yàn)偏倚率,從而獲取更多有價(jià)值的信息,此為我們接下來的重點(diǎn)研究方向。

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