◎ 康 立

（品測（上海）檢測科技有限公司，上海 201108）

“金銀花”一詞最早的文獻(xiàn)記錄出現(xiàn)在我國《本草綱目》一書中，其別名有密二花、雙苞花、金藤花、鷺鷥花和忍冬花，屬于忍冬科忍冬屬植物[1]。在我國，從氣候寒冷的東北地區(qū)到炎熱的華南地區(qū)，從最西部的青藏高原到最東部的山東半島，都有人工種植和自然生長的金銀花[2]。在東亞的日本、韓國、朝鮮、俄羅斯等國境內(nèi)也有野生的金銀花存在。金銀花屬多年生半常綠灌木，其葉片、果實(shí)、花蕾等組成部分作為中藥材應(yīng)用廣泛，特別是花蕾的功效最為顯著?！吨腥A藥典》記載，金銀花具有抗菌抗病毒、消炎、清熱解毒、保護(hù)肝臟、止血涼血、提高人體免疫力、抗動(dòng)脈粥樣硬化、中樞興奮等作用，在醫(yī)學(xué)上主要用于治療風(fēng)熱感冒、細(xì)菌性感染、急性腸胃炎、高血脂癥等40多種疾病[3]。金銀花中的主要功效物質(zhì)是綠原酸，其提取、純化、工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)和具體的開發(fā)用途已引起了國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，綠原酸具有較廣泛的抗菌作用、興奮神經(jīng)和清除人體內(nèi)自由基的作用[4]。金銀花中的有機(jī)酸、黃酮類物質(zhì)、揮發(fā)油成分以及三萜類成分等也被證實(shí)具有良好的保健和醫(yī)療用途。金銀花的莖中主要功效成分為皂甙、木樨草黃素和有機(jī)酸等物質(zhì)，葉片中主要功效成分為揮發(fā)油、皂甙、黃酮等物質(zhì)，果實(shí)中還含有還原糖等物質(zhì)。從開發(fā)利用現(xiàn)狀來看，金銀花除用作傳統(tǒng)中藥的主要配方以外，還在食品工業(yè)、化妝品行業(yè)、飲料行業(yè)等方面被廣泛的應(yīng)用。目前，已有學(xué)者將金銀花同茶葉、銀杏葉、甘草、綠豆等原料混合共同研制新型保健飲料[5]。本文以金銀花工藝茶加工中的殺青溫度、殺青時(shí)間、干燥時(shí)間為影響因素，通過三因素三水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，研究不同處理?xiàng)l件對(duì)金銀花工藝茶中綠原酸含量影響，以期找出不同處理?xiàng)l件下金銀花工藝茶中綠原酸含量的變化規(guī)律。

1 材料與方法

1.1 主要材料

金銀花：采自四川省南江縣，收集三青、二白、大白、銀花和金花5個(gè)采收時(shí)期的金銀花樣品，經(jīng)過干燥后保存在真空干燥器中待用。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

高效液相色譜儀（HPLC）、蒸汽殺青機(jī)、分篩機(jī)、造型機(jī)、物料粉碎機(jī)、干燥機(jī)和真空干燥器。

1.3 實(shí)驗(yàn)試劑

甲醇、乙醇（分析純）、乙腈（色譜純），綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 綠原酸的提取流程

金銀花→粉碎→熱回流浸提→抽濾→濃縮→沉淀離心→真空冷凍干燥→粉末狀提取物。

1.4.2 高效液相色譜法測定綠原酸含量

（1）色譜柱條件。色譜柱：Kromasil C18柱，250 mm×4.6 mm，5 μm；流動(dòng)相：CH3CN-0.3% H3PO4水溶液（體積比例為10∶90）；流速：1.0 mL/min；檢測波長：327 nm，靈敏度：1.0AUFS，進(jìn)樣量：20 μL[6]。

（2）對(duì)照品溶液的制備。精密稱取綠原酸對(duì)照品12.8 mg于100 mL容量瓶中，50%甲醇溶解并定容，作為對(duì)照品溶液。用時(shí)適當(dāng)稀釋。

（3）供試液的制備。稱取金銀花粉末狀提取物17 mg，精密稱定，置于25 mL 容量瓶中，加20 mL 50%甲醇超聲30 min，放冷后定容，搖勻。微孔濾膜過濾后，采用HPLC測定。

（4）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。精密量取綠原酸對(duì)照品溶液適量，分別置于10 mL容量瓶中，加50%甲醇稀釋到刻度，制成不同濃度的溶液，并測定其峰面積。以綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，以與其相應(yīng)峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為Y=24 963 900X-54 563，r=0.999 9。

（5）供試液中綠原酸含量測定。取不同處理?xiàng)l件下的綠原酸提取溶液，以上述高效液相色譜法測定其峰面積，代入回歸方程，得出供試液中綠原酸的濃度，再換算成供試液中綠原酸的質(zhì)量。

（6）金銀花中綠原酸含量測定。金銀花中綠原酸含量（%）=供試液中綠原酸的質(zhì)量（mg）/原金銀花的質(zhì)量（mg）。

1.5 金銀花工藝茶制作流程

金銀花工藝茶制作流程如圖1所示。

圖1 金銀花工藝茶制作流程圖

（1）殺青。將金銀花薄攤放于蒸汽殺青機(jī)的鏈板中，控制金銀花通過蒸汽殺青熱備的時(shí)間，取出后放至室溫。

（2）造型。將殺青后的金銀花充分混合均勻后，放入造型機(jī)中造型，期間每鍋分別均勻噴灑蔗糖溶液100 mL和香精的溶液100 mL，時(shí)間約為15 min，取出后放至室溫。

（3）干燥。在晴好天氣選擇曬干的方式，將其松散地薄攤在竹席上曝曬。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同采收期金銀花綠原酸含量測定

測定不同采收期金銀花綠原酸含量，3次重復(fù)試驗(yàn)取平均值，結(jié)果見表1。由表1可知，采收期為大白的金銀花中綠原酸含量最高，為2.16%。因此，金銀花的最佳的采收期為大白時(shí)期。

表1 不同采收期金銀花綠原酸含量表

2.2 金銀花工藝茶正交試驗(yàn)

以采收期為大白的金銀花70 g為基礎(chǔ)，做殺青時(shí)間、殺青溫度、干燥時(shí)間的三因子三水平正交實(shí)驗(yàn)，并測定不同處理?xiàng)l件下的金銀花工藝茶綠原酸含量，測定試驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。正交試驗(yàn)配方參數(shù)見表2，結(jié)果見表3。

表2 正交試驗(yàn)因素水平表

表3 L9(34)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析表

通過對(duì)金銀花工藝茶正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行等差分析可知，影響金銀花工藝茶中綠原酸含量的3個(gè)因素的順序依次為殺青溫度＞干燥時(shí)間＞殺青時(shí)間。綜合不同處理下金銀花工藝茶中綠原酸含量的最終結(jié)果，可以得出獲得較高的綠原酸含量的金銀花工藝茶影響因素組合為A1B2C2，即殺青溫度90 ℃、干燥時(shí)間6 h、殺青時(shí)間15 min。在此影響因素組合條件下，金銀花工藝茶中綠原酸含量為1.83%。

3 結(jié)果與討論

（1）通過測定不同采收期金銀花綠原酸的含量，得出采收期為大白期的金銀花中綠原酸含量最高，為2.16%。金銀花的最佳的采收期應(yīng)為大白時(shí)期。

（2）通過對(duì)金銀花工藝茶正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行等差分析可知，影響金銀花工藝茶中綠原酸含量的3個(gè)因素的其順序依次為殺青溫度＞干燥時(shí)間＞殺青時(shí)間。

（3）根據(jù)金銀花工藝茶正交試驗(yàn)的最終結(jié)果，可以得出獲得較高的綠原酸含量的金銀花工藝茶影響因素組合為A1B2C2，即殺青溫度90 ℃、干燥時(shí)間6 h、殺青時(shí)間15 min。

（4）研究發(fā)現(xiàn)，金銀花在加工形成金銀花工藝茶的過程中，其綠原酸含量有明顯的下降，至于過程導(dǎo)致綠原酸含量下降的機(jī)理，有待深層次進(jìn)行研究。

[1]李 聃.金銀花的研究進(jìn)展[J].科技信息，2012（24）：77-78.

[2]葛菁華，曾令祥，朱國勝.貴州省金銀花種植產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀及存在的問題研究——以黔南州為例[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012（11）：6826-6828.

[3]鄭雪峰，李振玉.中藥金銀花藥用成分及藥理作用分析[J].中西醫(yī)結(jié)合心血管病電子雜志，2016（30）：55-56.

[4]胡 櫻，程明川，杭太俊，等.綠原酸和雙黃連粉針劑中的成分綠原酸在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)比較[J].中國新藥與臨床雜志，2009（4）：45-48.

[5]蔣燕山，李加興，陳雙平.金銀花飲料生產(chǎn)工藝研究[J].食品與機(jī)械，2004（2）：25-26.

[6]左 霞，劉春霞，楊金霞，等.HPLC法測定不同來源不同采收期忍冬藤和金銀花中綠原酸含量[J].中國藥師，2015（4）：682-684.