◎ 王東玉

（錫林郭勒職業(yè)學(xué)院，內(nèi)蒙古 錫林浩特 026000）

金黃色葡萄球菌（Staphyloccocus aurens）是一種重要病原菌，隸屬于葡萄球菌屬（Staphyloccocus），呈革蘭氏陽(yáng)性。金黃色葡萄球菌廣泛存在于自然界中，與人類生活相關(guān)的空氣、灰塵、水等自然界中均能檢測(cè)到金黃色葡萄球菌[1]。在世界各個(gè)國(guó)家中，由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒在細(xì)菌性食物中毒中均占較大比例，已成為世界性的公共衛(wèi)生問(wèn)題[2-3]。

根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.10-2010金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)中的方法，約需78 h方可出結(jié)果，此方法存在耗時(shí)長(zhǎng)、工作量大的缺陷，很難適應(yīng)現(xiàn)在快速檢驗(yàn)要求。目前，金黃色葡萄球菌檢測(cè)在日常微生物檢驗(yàn)工作中所占比重越來(lái)越大，所以選出一個(gè)簡(jiǎn)便、快捷并準(zhǔn)確的方法變得十分有必要。本文研究了HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑盒對(duì)金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)的作用，將結(jié)果進(jìn)行分析研究，旨在探求一種適應(yīng)食品微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)要求的快速準(zhǔn)確的方法，為提高今后金黃色葡萄球菌檢測(cè)效率提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要培養(yǎng)基與試劑

TSA平板（青島高科園海博生物技術(shù)有限公司），Baird-Parker平板（北京路橋技術(shù)股份有限公司），HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑盒（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司）。

1.1.2 試驗(yàn)菌株

金黃色葡萄球菌（CMCC26003），表皮葡萄球菌（CICC10294），糞腸球菌（ATCC29212），藤黃球菌（CMCC28001）。

1.1.3 儀器設(shè)備

分析天平，生物安全柜，生化培養(yǎng)箱，高壓滅菌鍋。

1.2 試驗(yàn)方法

將4株純化好的試驗(yàn)菌株分別劃線于Baird-Parker平板，培養(yǎng)48 h后待用。根據(jù)HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑盒說(shuō)明書(shū)，先滴一滴測(cè)試液于測(cè)試片上，然后挑取單個(gè)菌落混勻于測(cè)試液中，晃動(dòng)2 min左右，觀察凝集現(xiàn)象。根據(jù)上述方法，挑取60株金黃色葡萄球菌、20株表皮葡萄球菌、20株糞腸球菌、20株藤黃球菌分別進(jìn)行乳膠凝集試驗(yàn)，觀察凝集現(xiàn)象。

2 結(jié)果與分析

120株分離菌株在HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑上的試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。60株金黃色葡萄球菌在2 min內(nèi)均出現(xiàn)明顯凝集反應(yīng)；20株表皮葡萄球菌均未出現(xiàn)凝集反應(yīng)；20株藤黃球菌均未出現(xiàn)凝集反應(yīng)；20株糞腸球菌均出現(xiàn)凝集反應(yīng)，但凝集現(xiàn)象不明顯。

表1 120株分離菌株在葡萄球菌乳膠凝集試劑上的凝集結(jié)果表

通過(guò)試驗(yàn)結(jié)果分析可知，HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑在金黃色葡萄球菌檢測(cè)中靈敏度為100%，特異性為66.6%。

在試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，接種量的多少會(huì)影響凝集現(xiàn)象產(chǎn)生的快慢。接種量少，凝集產(chǎn)生慢且不明顯，接種量多，凝集產(chǎn)生快且明顯，但均不影響試驗(yàn)結(jié)果的判斷。

3 結(jié)論與討論

Baird-Parker法需在接種后48 h觀察平板，并挑取可疑菌落轉(zhuǎn)種到BHI肉湯中，再經(jīng)18～24 h培養(yǎng)后做血漿凝固酶試驗(yàn)進(jìn)行證實(shí)[4]。一般耗時(shí)約需78 h，操作步驟繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)、工作量大。而在Baird-Parker法接種平板48 h后，可利用HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑，通過(guò)有無(wú)凝集現(xiàn)象來(lái)快速初步判斷是否為金黃色葡萄球菌。由于HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑在金黃色葡萄球菌檢測(cè)中靈敏度高，但特異性不強(qiáng)，所以在出現(xiàn)凝集反應(yīng)后，需按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.10-2016進(jìn)行后續(xù)證實(shí)試驗(yàn)，如未出現(xiàn)凝集反應(yīng)，在保證菌落純度高的前提下，在應(yīng)急檢測(cè)中可不做后續(xù)證實(shí)試驗(yàn)。

在金黃色葡萄球菌檢測(cè)占日常微生物檢驗(yàn)工作比重越來(lái)越大的今日，HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑盒可作為一種簡(jiǎn)便、快捷的輔助手段，來(lái)實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室金黃色葡萄球菌快速檢測(cè)的要求，尤其在食物中毒等應(yīng)急檢測(cè)方面更顯其使用方便的優(yōu)越性，值得在微生物實(shí)驗(yàn)室日常檢測(cè)中推廣應(yīng)用。

[1]趙永勝.兩種不同培養(yǎng)基分離金黃色葡萄球菌的比較[J].河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2017（11）：834-835.

[2]李自然，施春雷，宋明輝，等.上海市食源性金黃色葡萄球菌分布狀況[J].食品科學(xué)，2013（1）：268-271.

[3]陳廣全，張惠媛，曾 靜.微生物檢驗(yàn)[M].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2010：351-352.

[4]梁景濤，謝 翊，林秋芬，等.3種食品中金黃色葡萄球菌檢測(cè)方法的比較研究[J].中國(guó)衛(wèi)生檢測(cè)雜志，2010（4）：790-791.