張欣媛

酶聯(lián)免疫吸附檢驗(yàn)的基本概述

酶聯(lián)免疫吸附檢驗(yàn)是當(dāng)前比較常見的一種固相酶免疫測定技術(shù)，在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中，主要試劑為采用酶標(biāo)記的抗原和抗體，通過利用復(fù)合物中酶的催化作用，經(jīng)由底物的呈色反應(yīng)從而有效定性和定量分析被檢測物。現(xiàn)階段在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)當(dāng)中主要使用的檢驗(yàn)方法包括雙抗體和雙抗原夾心法測抗體、抗原，以及間接法和競爭法測抗體抗原等等。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在食品檢測中的應(yīng)用分析

食品過敏源?，F(xiàn)階段酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)經(jīng)常被用于食品過敏源的檢測。譬如說早在本世紀(jì)初，國外便有研究學(xué)者通過使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的方式對魚類過敏源進(jìn)行檢測，其通過在試驗(yàn)當(dāng)中將捕獲劑用兔的抗鱈魚小清蛋白的抗體的多克隆產(chǎn)物作為替代，直接利用該多克隆產(chǎn)物中的一種生物共軛物質(zhì)作為檢測劑。根據(jù)相關(guān)研究結(jié)果顯示，在使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的方式下，成功檢測出了大量不同種類的魚類，且回收率最高時(shí)能夠達(dá)到將近140%，最低回收率也達(dá)到了68%，檢測限為食物中魚小清蛋白含量為0.01mg/kg，也就是說每千克食物中的魚肉含量在5mg，其對于食品中魚蛋白含量的控制提供了重要參考幫助。而在部分歐盟國家當(dāng)中，也通過采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的方式對芥末這一致敏食物進(jìn)行檢驗(yàn)。有研究人員通過對含有不同含量芥末粉的小香腸進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測，發(fā)現(xiàn)香腸中芥末的平均回收率達(dá)到了（95.3±10.7）%，而在將其對市面上銷售的30種小香腸進(jìn)行檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)在標(biāo)注了含有芥末的15種小香腸中，成功檢測出有4種產(chǎn)品不含芥末。而在未標(biāo)注含有芥末的15種小香腸中，也成功檢測出有2種產(chǎn)品含有芥末，可見該試驗(yàn)對于檢測食品中的過敏源，保障消費(fèi)者健康意義重大。

有毒物質(zhì)。及時(shí)、精準(zhǔn)地檢測出食品中的有毒有害物質(zhì)，同樣是保障食品質(zhì)量安全的重要途徑之一。在這一過程中，通過使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)也可以起到一定的幫助作用。國外已有學(xué)者通過對同一種本土產(chǎn)玉米制品中的玉米烯酮，分別采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)以及均相酶免疫測定兩種方法進(jìn)行檢測。根據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，在使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對本土產(chǎn)含有玉米烯酮的玉米制品樣品進(jìn)行檢測的過程中，其檢測限為每千克玉米制品樣品中含有5.5μg的玉米烯酮，而采用均相酶免疫測定法下，其檢測限為每千克玉米制品樣品中含有7.1μg的玉米烯酮。而后其通過擴(kuò)大檢驗(yàn)樣本數(shù)量，對40種含有玉米烯酮的樣品分別使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)以及均相酶免疫測定，結(jié)果證明兩者的相關(guān)性R2為0.9258，但使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的檢測限更低，由此證明酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)不僅能夠有效檢測食品中的有毒物質(zhì)，同時(shí)相比于均相酶免疫測定，在檢測限以及精準(zhǔn)度方面還具有明顯優(yōu)勢。

農(nóng)藥殘留。食品中農(nóng)藥殘留、超標(biāo)也是導(dǎo)致出現(xiàn)食品安全問題的一大重要原因。而目前根據(jù)相關(guān)實(shí)證研究，已經(jīng)證明酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對于檢驗(yàn)食品中的農(nóng)藥殘留具有積極作用。國內(nèi)學(xué)者通過研發(fā)一種能夠?qū)埩舻募纵镣M(jìn)行有效分析的酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，通過隨機(jī)選擇水、土壤以及其他多種不同種類的食品，發(fā)現(xiàn)均可以在短時(shí)間內(nèi)成功對樣品中的甲萘威進(jìn)行有效檢測，其最低檢測限達(dá)到了每千克樣品中含有0.4mg甲萘威。另外，國外也有部分學(xué)者通過將免疫原選定為新霉胺，在與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的方法進(jìn)行有效結(jié)合下，對牛奶中的慶大霉素、新霉素等進(jìn)行檢驗(yàn)，同樣也獲得了良好的檢驗(yàn)成效。

微生物檢測。根據(jù)王民、曹德康（2013）的對于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的研究可知，其在嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求，預(yù)先對蛋白胨緩沖液進(jìn)行濃度和預(yù)處理之后，將酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中的夾心法運(yùn)用其中，用以對被測食物中的傷寒沙門氏菌進(jìn)行有效檢測。通過根據(jù)其給出的檢測結(jié)果可知，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法下，能夠獲得102CFU/ml的檢測限，也就是說在每毫升被測液態(tài)食物當(dāng)中，含有102CFU的傷寒沙門氏菌。

通過對酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在食品檢測中的應(yīng)用現(xiàn)狀進(jìn)行分析，可以其對于檢測食品中的過敏源、有毒有害物質(zhì)、農(nóng)藥殘留等均具有一定的幫助作用。并且該種方式所表現(xiàn)出的高效、精準(zhǔn)、靈敏等特性，也使其能夠有效運(yùn)用在其他檢測領(lǐng)域上。相信隨著我國檢測技術(shù)水平的進(jìn)一步發(fā)展，酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)也將得到持續(xù)優(yōu)化改進(jìn)，其檢測范圍、精準(zhǔn)度和穩(wěn)定性等還將得到進(jìn)一步提高。