張 志，張 艷，劉海隆，曹宗喜

（1.海南省?？谑袆?dòng)物防疫檢疫站，海南 ?？?570208；2.海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，海口 571100）

豬傳染性胸膜肺炎（porcie contagious pleuropneum,PCP）是目前危害我國養(yǎng)豬業(yè)的常見主要細(xì)菌病之一，是由胸膜肺炎放線桿菌（Actinobacillus pleuropneumoniae,APP）引起的以急性出血性纖維素性胸膜肺炎和慢性纖維素性壞死性胸膜肺炎為病理特征的一種嚴(yán)重呼吸道傳染病[1-3]，給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失。筆者經(jīng)血清學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，海南省規(guī)模豬場豬傳染性胸膜肺炎的抗體陽性率達(dá)到33.90%（436/1 286）[4]。因此，需要引起養(yǎng)豬業(yè)者的高度重視。

近年來，由于臨床抗生素的不合理應(yīng)用，細(xì)菌耐藥性的出現(xiàn)，導(dǎo)致豬傳染性胸膜肺炎的防治變得越發(fā)困難[5-6]，而免疫預(yù)防再度引起人們關(guān)注，成為目前防控豬傳染性胸膜肺炎的主要措施之一。合理的免疫程序是決定免疫質(zhì)量的關(guān)鍵因素之一，本課題組于2015年6月在海南儋州海平達(dá)種豬場研究了不同免疫程序?qū)ψ胸i接種豬傳染性胸膜肺炎疫苗免疫效果的影響，旨在為海南省規(guī)模豬場制定科學(xué)合理的豬傳染性胸膜肺炎免疫程序提供依據(jù)。

1 材料方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

選取經(jīng)ApxⅣELISA試劑盒檢測為陰性的160頭25日齡健康杜長大三元雜種仔豬作為試驗(yàn)動(dòng)物，儋州海平達(dá)種豬配套系有限公司提供。

1.2 疫苗

豬傳染性胸膜肺炎三價(jià)滅活疫苗（1、2、7型），批號(hào)1502002，中牧實(shí)業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。

1.3 主要試劑

豬胸膜肺炎放線桿菌ApxⅣ-ELISA抗體檢測試劑盒，購自武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司，批號(hào)為150404。

1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.4.1 試驗(yàn)分組 160頭健康仔豬隨機(jī)分為8組，分別為A組、B組、C組、D組、E組、F組、G組、對(duì)照組，每組20頭。所有試驗(yàn)豬分別于35日齡和180日齡稱重，并計(jì)算增重。

1.4.2 試驗(yàn)仔豬免疫 疫苗組仔豬分別按照免疫接種表和疫苗廠商提供的免疫途徑和劑量進(jìn)行免疫接種，對(duì)照組母豬不接種疫苗。具體免疫接種時(shí)間見表1。

表1 免疫接種計(jì)劃 d

1.4.3 試驗(yàn)豬采血及抗體檢測 試驗(yàn)豬分別于75日齡、150日齡通過前腔靜脈采血并分離血清。按照ELISA抗體檢測試劑盒的說明書進(jìn)行檢測，在450 nm測量和記錄試驗(yàn)組和對(duì)照組樣品的吸光值。檢測結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)為：S/p＜0.3 為陰性，S/P≥0.4 為陽性，0.3≤S/p＜0.4 為可疑。

1.5 結(jié)果統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 試驗(yàn)豬傳染性胸膜肺炎感染情況

經(jīng)檢測，在整個(gè)試驗(yàn)期間A組PCP的感染率為5%，B組PCP的感染率為10%，C組PCP的感染率為15%，D組PCP的感染率為10%，E組PCP的感染率為10%，F(xiàn)組和G組未發(fā)現(xiàn)PCP感染豬，對(duì)照組PCP的感染率為20%（表2）。

表2 試驗(yàn)豬PCP感染的情況

2.2 試驗(yàn)豬增重情況

從表3可以看出，B組豬增重最多，為113.20 kg，其次是 G 組 112.15 kg，A 組 111.85 kg，D 組 108.80 kg，C組107.90 kg，E組、F組豬增重最少，低于對(duì)照組（106.05 kg），分別為 105.35 kg 和 102.18 kg。

表3 試驗(yàn)豬增重情況

3 討論

合理的免疫程序是預(yù)防豬傳染性胸膜肺炎的有效途徑，因此，本課題研究了不同免疫程序?qū)ψ胸i接種豬傳染性胸膜肺炎疫苗后免疫效果的影響。此外，有研究表明，ApxⅣ-ELISA可有效區(qū)分APP滅活疫苗或亞單位疫苗免疫豬與自然感染豬，并能與其他豬呼吸道疾病病原如豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌等進(jìn)行鑒別診斷[7]，故本研究采用ApxⅣ-ELISA抗體檢測試劑盒檢測整個(gè)試驗(yàn)階段試驗(yàn)豬傳染性胸膜肺炎的感染情況。

試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，30日齡首免、60日齡二免（G組）的豬傳染性胸膜肺炎免疫程序的免疫效果最好，整個(gè)試驗(yàn)階段未發(fā)現(xiàn)傳染性胸膜肺炎感染豬，且該組豬的增重情況也較好，為112.15 kg；其次是35日齡首免、65日齡二免（A組）的免疫程序，整個(gè)試驗(yàn)階段試驗(yàn)豬傳染性胸膜肺炎感染率為5%，該組豬的增重為111.85 kg。而采用42日齡首免、72日齡二免（C組）的仔豬免疫效果最差。雖然采用35日齡首免、60日齡二免（F組）的豬傳染性胸膜肺炎免疫程序的試驗(yàn)仔豬也未發(fā)現(xiàn)傳染性胸膜肺炎感染，但其體重增重不理想，為102.18 kg；由于不能排除該免疫程序是否會(huì)引起豬增重減少，所以不建議該免疫程序作為規(guī)模豬場豬傳染性胸膜肺炎免疫程序。

此外，豬傳染性胸膜肺炎的防控還需要注重豬群的飼養(yǎng)和管理、疫苗的質(zhì)量和操作等，只有這樣才能有效減少豬場傳染性胸膜肺炎的發(fā)生，減少養(yǎng)豬損失。

[1]Tobiasa T J,Klinkenberga D,Boumaa A,et al.A Cohort study on Actinobacillus pl-europneumoniae colonisation in sucking piglets[J].Prev Vet Med,2014,114(3-4)：223-230.

[2]張東超，楊寧寧，林靜，等.豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J].中國畜牧獸醫(yī)，2016，43（6）：1604-1609.

[3]鄒麗，周雪，徐登峰.豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌鑒定與耐藥性試驗(yàn)[J].中國獸醫(yī)雜志，2014，50（2）：41-42.

[4]張艷，劉海隆，林哲敏，等.海南省規(guī)模豬場豬傳染性胸膜肺炎的血清學(xué)調(diào)查[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2016，37（1）：129-132.

[5]Maka L,Macki W E,Sci ezynska H,et al.Resistance to sulfonamides and dissemination of Sul genes among Salmonella spp.isolated from food in Poland[J].Foodborne Pat hog Dis,2015,12(5)：383-389.

[6]李海利，鄧祖麗穎，徐引弟，等.豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌磺胺類藥物耐藥基因的檢測[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，45（5）：135-139.

[7]李鳳梅，龍小曾，李崇，等.豬傳染性胸膜肺炎的ApxⅣ-ELISA 檢測方法[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2013，44（12）：2098-2101.