孫泉云，夏爐明，鞠厚斌，楊德全，朱九超

（上海市動物疫病預(yù)防控制中心，上海 長寧 201103）

豬細小病毒（Porcine parvovirus,PPV）是引起豬繁殖障礙的重要病原之一，妊娠母豬感染PPV后發(fā)生流產(chǎn)，并產(chǎn)出死胎、木乃伊胎及病弱仔豬。本病主要通過消化道和呼吸道途徑傳播（口鼻接觸），也可以通過生殖道傳播（配種、人工授精等），并可經(jīng)母豬胎盤垂直傳播給胎兒。自1966年發(fā)現(xiàn)第一例豬細小病毒病病例以來，該病廣泛存在于世界各地并在大多數(shù)規(guī)模豬場呈散發(fā)或地方性流行，嚴重影響著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。為了解上海地區(qū)規(guī)模豬場和生豬屠宰場豬群的細小病毒感染情況，我們于2015—2017年進行了針對性的PPV檢測。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品 來自 2015—2017年上海市 12個規(guī)模豬場1 259份種豬扁桃體樣品，以及3個生豬屠宰場1 879份上市肉豬的頜下淋巴結(jié)、扁桃體樣品。

1.1.2 試劑來源 豬細小病毒（PPV）熒光 PCR 檢測試劑盒購自廣州維伯鑫生物有限公司，核酸抽提試劑購自德國MN公司。

1.2 試驗方法

將待檢組織樣品剪碎、研磨，PBS勻漿，5 400 r/min離心5 min，取上清液進行核酸提取，按試劑盒說明書進行熒光PCR試驗。

2 試驗結(jié)果

病原學(xué)檢測結(jié)果顯示，2015—2017年規(guī)模豬場1 259份種豬扁桃體樣品中檢出PPV陽性110份，陽性率 8.74%，陽性率范圍 2.97%～19.27%，以 2017年檢出率為最高；2015—2017年生豬屠宰場1 879份上市肉豬頜下淋巴結(jié)、扁桃體樣品中檢出PPV陽性671份，陽性率35.71%，陽性率范圍21.11%～61.71%，以2017年檢出率為最高，具體結(jié)果見表1、表2。

表1 規(guī)模豬場樣品PPV檢測結(jié)果匯總

表2 屠宰場樣品PPV檢測結(jié)果匯總

3 小結(jié)與討論

（1）豬細小病毒主要感染初產(chǎn)母豬，引起流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等繁殖障礙，但母豬本身無明顯臨診癥狀，因而本病常被豬場所忽視。經(jīng)對上海規(guī)模豬場種豬和生豬屠宰場上市肉豬的PPV檢測發(fā)現(xiàn)，存在較高的陽性率，說明感染帶毒的普遍性，值得關(guān)注和警惕。孫泉云等[1]采用PCR和RT-PCR技術(shù)，對上海及其周邊地區(qū)的30個豬場和人工授精站的生產(chǎn)公豬精液樣品355份進行了豬細小病毒（PPV）的檢測，結(jié)果檢出75份PPV陽性，陽性率為21.1%。國外也有相似的報道，Attila等[2]為了證實新鑒定的豬細小病毒在匈牙利的發(fā)生與流行情況，從匈牙利不同類型的豬場采集糞便、血清、器官組織、流產(chǎn)胎兒和精液等樣品，采用PCR試驗進行豬細小病毒病的病原學(xué)檢測，結(jié)果表明匈牙利存在多型豬細小病毒，其中PPV1陽性率為0.5%，PPV2陽性率為 6.4%，PPV3 陽性率為 9.7%，PPV4 陽性率為 6.4%。

（2）細小病毒可通過嚙齒類動物機械性傳播，蚊子是否可作為傳播媒介尚未確認，但已經(jīng)證實PPV在不同年齡段豬群中可循環(huán)傳播，導(dǎo)致帶毒率較高，雖然未進行基因測序，但因為目前豬場普遍使用PPV滅活疫苗免疫，不存在疫苗散毒問題，因此豬群感染的應(yīng)是流行毒株。吳海超等[3]也發(fā)現(xiàn)了不同年齡段豬群的PPV感染問題，從一早、中期生產(chǎn)狀況差的肥育豬場收集豬血清214份，采用PCR檢測豬PPV，選取1份陽性血清接種豬睪丸細胞（ST）進行PPV分離、部分生物學(xué)特性研究。結(jié)果表明在15、16、17、18、22 周齡豬血清中均檢測到 PPV，檢測陽性率分別為10%、40%、20%、15.4%、9%，而從 2～14及24周齡的豬血清中沒有檢測到PPV。從血清中分離的PPV在ST細胞上傳到第5代能夠出現(xiàn)較穩(wěn)定的細胞病變（CPE），病毒血凝效價為28，說明PPV在采樣豬場的保育后期和肥育前、中期豬血清中具有較高的陽性率。

（3）豬細小病毒病的預(yù)防以免疫接種為主要手段，建議1～3胎母豬實施一年兩次跟胎免疫滅活疫苗，確保生產(chǎn)母豬在一個生產(chǎn)周期內(nèi)維持堅挺的抗體水平，抵抗野毒侵襲。

（4）根據(jù)多年的采樣經(jīng)驗和不同組織器官的病毒檢出率，種豬活體采樣選擇扁桃體，生豬屠宰場豬組織樣品優(yōu)先選擇扁桃體和頜下淋巴結(jié)，適宜于檢測PPV，說明上述樣品是PPV侵入、寄居和復(fù)制的場所。

[1]孫泉云，周錦萍，張維誼，等.種公豬精液中與繁殖障礙有關(guān)的 6 種病毒的檢測[J].動物醫(yī)學(xué)進展，2007，28（11）：30-33.

[2]Attila Csagola,Marta Lorincz,Daniel Cadar,et al.Detection,prevalence and analysis of emerging porcine parvovirus infections[J].Archives of Virology,2012,157(6)：1003-1010.

[3]吳海超，胡呈才，劉崇靈，等.育肥豬血清中豬細小病毒16WS株的分離與鑒定 [J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2014，40（5）：525-529.