蘇哲君 王 鵬 霍 峰 馬 莉

(承德醫(yī)學院附屬醫(yī)院口腔科，河北 承德 067000)

慢性牙周炎(CP)是口腔微生物與宿主之間相互作用失衡引發(fā)的慢性炎癥，導致牙周軟組織和硬組織的破壞〔1〕，是成年人失牙的主要原因。糖尿病(DM)患者患CP的風險較無DM者高3倍〔2〕。Ding等〔3〕研究發(fā)現(xiàn)，DM與促使牙周組織損害有關的炎癥細胞因子、導致組織破壞有關的分子水平有一定聯(lián)系。其中白細胞介素(IL)-6和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-8受到廣泛關注。已有研究證實IL-6和MMP-8參與牙周病變，且還與牙周組織的破壞相關〔4〕，但對于老年CP伴2型糖尿病(T2DM)患者全唾液內(nèi)IL-6、MMP-8與血糖控制水平是否有關報道很少。本文探討CP伴T2DM患者全唾液IL-6和MMP-8水平及臨床意義。

1 對象和方法

1.1研究對象 選取2014年7月至2015年3月承德醫(yī)學院附屬醫(yī)院就診CP伴T2DM患者48例，單純CP患者20例。2組符合以下入選條件：年齡≥60歲，口內(nèi)至少余留16顆天然牙，至少缺失一顆天然牙，近6個月未進行過牙周治療；近3個月未使用過抗生素及免疫抑制劑；不吸煙；無口腔黏膜病變或明確的唾液腺病變者。納入標準：符合1999年WHO糖尿病診斷標準被診斷為T2DM，且至少6個月以上；無其他全身系統(tǒng)性疾?。豢诜堤撬幬锘蜃⑸湟葝u素治療，近期病情無變化；按《牙周病學》診斷標準診斷為CP；根據(jù)2013IDF發(fā)布的《老年2型糖尿病管理全球指南》〔5〕，以糖化血紅蛋白(HbA1c)為指標，HbA1c<8%為血糖控制良好，HbA1c≥8%為血糖控制不理想。CP伴T2DM組男20例，女28 例；年齡60～73〔平均(65.8±3.3)〕歲。對照組男7例，女13例；年齡60～73〔平均(64.9±4.2)〕歲。兩組性別和年齡比較差異均無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)，具有可比性。

1.2研究方法

1.2.1非刺激性全唾液樣本收集 采集時間為清晨08：00～10：00，采集前1 h勿大量飲水及進食。收集前清水漱口，在非刺激的情況下收集10 min流出的全唾液，將唾液置入1.5 ml的Ep管，高速冷凍離心機在4℃、13 000 r/min下離心15 min(離心半徑為5.5 cm)，提取上清液，-80℃保存，待測。

1.2.2全唾液中MMP-8及IL-6的測定 室溫復融全唾液上清液，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測標本中IL-6、MMP-8水平，IL-6試劑盒購自Abclonal公司，MMP-8超敏試劑盒購自MuLTISCIENCES聯(lián)科生物公司。檢測過程嚴格按照說明書的步驟進行。

1.3統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行χ2及t檢驗，相關性采用Spearman相關分析。

2 結(jié) 果

2.1各組IL-6、MMP-8水平比較 CP伴T2DM組全唾液IL-6、MMP-8水平較單純CP組顯著增高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。CP伴T2DM組HbA1c≥8% 者(28例)全唾液IL-6、MMP-8水平顯著高于HbA1c< 8%者(20例)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2相關性分析 CP伴T2DM組HbA1c與全唾液IL-6、MMP-8水平均正相關(r=0.55，0.732，均P=0.00)。

表1 各組全唾液IL-6、MMP-8水平比較

與單純CP組比較：1)P<0.05；與HbA1c<8%組比較：2)P<0.05

3 討 論

DM是一種常見的以高血糖為特征的慢性代謝性疾病。DM本身并不引起CP，但可影響牙周組織對細菌的反應性〔6〕，高血糖狀態(tài)可造成牙周局部微環(huán)境的改變。和非DM患者相比，DM患者的CP患病率及嚴重程度增加〔7〕。HbA1c一直作為評價DM患者血糖控制的金標準，可以反映近2～3個月血糖平均水平。糖代謝控制越差，HbA1c越高。

唾液是一種維持口腔健康的重要生理性體液，齦溝液溢出牙齦后進入口腔中與唾液混合在一起稱全唾液，是宿主口腔免疫防御系統(tǒng)的重要組成部分。近年來，隨著非刺激性的唾液收集方法及唾液檢測方法的發(fā)展，使人們對唾液生物標記物的關注日益增加。唾液中宿主牙周組織炎癥反應和軟、硬組織破壞相關標記物可以反映牙周病的發(fā)生和進展〔1〕。唾液相對齦溝液臨床易獲取，對患者無傷害，適合大樣本量的取樣。IL-6是CP時炎癥局部產(chǎn)生的重要細胞因子，來源廣泛，具有多種生物學活性，參與牙周組織的破壞，其表達量與CP的炎癥程度呈正相關〔8〕；MMP-8是一種重要的膠原水解酶，在牙周結(jié)締組織和骨組織的破壞過程中起重要作用〔9，10〕。Ebersole等〔11〕發(fā)現(xiàn)CP與牙周健康者唾液中MMP-8、IL-6 和腫瘤壞死因子-α有差異。

本文結(jié)果表明MMP-8、IL-6可能參與了牙周病變的有關過程，符合Ebersole等〔11〕的報道結(jié)果。究其原因，這可能是因為CP伴T2DM患者多形核白細胞單個核細胞可能存在“炎癥反應特征”，對某些微生物或其毒素的刺激可產(chǎn)生異常強烈的炎癥反應，釋放高質(zhì)量濃度的促炎細胞因子等炎性介質(zhì)。齦溝中促炎性細胞因子通過自分泌和旁分泌途徑刺激更多的IL-6產(chǎn)生〔12〕。MMP-8是牙周組織破壞的主要蛋白溶解酶，主要降解破壞牙周支持組織細胞外基質(zhì)(ECM)。炎癥條件下，牙周的細菌產(chǎn)物、細胞因子及生長因子作用于牙周和炎癥細胞，產(chǎn)生并釋放更多MMP-8，導致唾液中MMP-8水平提高。DM患者并發(fā)牙周病時，其唾液內(nèi)的IL-6、 MMP-8量不僅會受到牙周炎癥影響，而且會受到高血糖狀態(tài)的影響。DM患者的免疫應答顯示亢進反應，炎癥介質(zhì)顯示分泌過剩傾向。高血糖狀態(tài)可促進胰島細胞分泌IL-6〔13〕；高血糖狀態(tài)也可促進炎性細胞分泌MMP-8，最終增加IL-6、MMP-8的表達水平。糖代謝控制越差，炎性細胞越活躍。已有研究表明糖尿病患者的高血糖狀態(tài)可誘導人單核細胞產(chǎn)生促骨吸收的細胞因子IL-6，牙齦成纖維細胞產(chǎn)生基質(zhì)金屬蛋白酶〔14，15〕。

本研究顯示對老年CP伴T2DM患者失牙修復前，既要重視患者的口腔健康，定期實施牙周檢查及維護，強化菌斑控制，確保牙周組織健康，又要囑患者長期監(jiān)測和控制血糖，消除或減少DM對牙周病的影響。因此，對IL-6、MMP-8水平監(jiān)測有助于CP伴T2DM患者的治療，值得重視。

4 參考文獻

1王立剛，徐 彬，迪麗努爾·阿吉.糖尿病牙周炎模型大鼠的牙槽骨喪失〔J〕.中國組織工程研究，2015；19(5)：710-5.

2Mealey BL，Ocampo GL.Diabetes mellitus and periodontal disease〔J〕.Periodontol，2000；(44)：127-53.

3Ding C，Ji X，Chen X，etal.TNF-α gene promoter polymorphisms contribute to periodontitis susceptibility：evidence from 46 studies〔J〕.J Clin Periodontol，2014；41(8)：748-59.

4Ebersole JL，Nagarajan R，Akers D，etal.Targeted salivary biomarkers for discrimination of periodontal health and disease(s)〔J〕.Front Cell Infect Microbiol，2015；5：62.

5Association AD.Standards of medical care in diabetes-2013〔J〕.Diabetes Care，2013；36(Suppl 1)：S11-S66.

6孟煥新.臨床牙周病學〔M〕.北京：北京大學醫(yī)學出版社，2014：202.

7Chapple IL，Genco R.Diabetes and periodontal diseases：consensus report of the joint EFP/AAP Workshop on periodontitis and systemic diseases〔J〕.J Clin Periodontol，2013；40 (Suppl 14)：S106-12.

8王 磊.白細胞介素6與牙周炎的關系〔J〕.牙體牙髓牙周病學雜志，2003；13(1)：53-6.

9Sorsa T，Tjaderhane L，Konttinen YT，etal.Matrix metalloproteinases：contribution to pathogenesis，diagnosis and treatment of periodontal inflammation〔J〕.Ann Med，2006；38(5)：306.

10Rathnayake N，Akerman S，Klinge B，etal.Salivary biomarkers of oral health：a cross-sectional study〔J〕.J Clin Periodontol，2013；40(2)：140.

11Ebersole JL，Schuster JL，Stevens J，etal.Patterns of salivary analytes provide diagnostic capacity for distinguishing chronic adult periodontitis from health〔J〕.J Clin Immunol，2013；33(1)：271-9.

12吳瑩瑩，劉洪臣.TNF-α、IL-1β及IL-6與糖尿病及牙周炎之間的關系〔J〕.中華老年口腔醫(yī)學雜志；2011；9(2)：117-21.

13Esposito K，Nappo F，Marfella R，etal.Inflammatory cytokine concentrations area cutely increased by hyperglycemia in humans：role of oxidative stress〔J〕.Circulation，2002；106(16)：2067-72.

14Bastos MF,Tucci MA,De Siqueira A,etal.Diabetes may affect the expression of matrix metalloproteinases and their inhibitors more than smoking in chronic peridontitis〔J〕.J Periodontal Res,2017;52(2):292-9.

15Chiu HC,Fu HM,Yang TS,etal.Effect of high glucose, porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide and advanced glycation end-products on production of interleukin-6/-8 by gingivial fibroblasts〔J〕.J Periodontal Res,2017;52(2):268-76.