馬國珍 ，舒 勁 ，王 煜 ，宋瑞平 ，張曉明 ，盧雨蓓 ，田 苗

1甘肅省中醫(yī)院，甘肅 蘭州 730050；2中國中醫(yī)科學院

功能性消化不良(Functional Dyspepsia，F(xiàn)D)病程遷延難愈，易反復，臨床療效不理想，對患者的生活工作帶來極大的痛苦，已然成為全球不斷研究的疾病之一。在一項全球性的調查中［1］，以上腹痛為主的FD患者占8%～50%左右，而以上消化癥狀為主的約占20%～50%。另一項系統(tǒng)研究表明［2-3］，功能性消化不良的總患病率在12%～15%左右；而亞洲FD患病率則在10%～23%之間，較之亞洲發(fā)達國家，我國功能性消化不良的患病率整體偏高。有學者研究發(fā)現(xiàn)［4］，F(xiàn)D患者在情感職能、精神健康等6個維度中的分數(shù)明顯降低，提示FD患者的心理及生理均受到不同程度的影響。由于現(xiàn)代醫(yī)學對FD發(fā)病機制的闡釋仍不明確，故目前仍以對癥支持治療為主，包括抑酸護胃，促胃動力，助消化及抗幽門螺桿菌等。多潘立酮是促胃動力的常用藥物，但由于該藥經肝臟、腎臟代謝，嚴重肝腎功能不全者不宜長期使用［5］，且會加重患有心臟疾病患者的心律失常，因此臨床應用受到限制。治療FD的大部分西藥存在停藥后病情反復的現(xiàn)象。隨著中醫(yī)藥對FD研究的深入，祖國醫(yī)學對防治FD所體現(xiàn)出的獨特優(yōu)勢，受到越來越多的重視。運脾顆粒為甘肅省中醫(yī)院院內制劑，筆者從胃腸激素的角度探討運脾顆粒的作用機理。

1 材料與方法

1.1 動物 健康SPF級SD雄性大鼠70只，日齡40天左右，平均體質量(180±20)g，均由甘肅中醫(yī)藥大學動物實驗中心提供，實驗動物質量合格證號：NO.62001000000299。

1.2 實驗藥品 運脾顆粒，主要由黨參、白術、茯苓等藥物組成(甘肅省中醫(yī)院制劑中心生產，規(guī)格6 g/袋，甘藥制字Z09001927)；多潘立酮片(西安楊森制藥有限公司，規(guī)格10 mg/片，國藥準字：0H9100103)；0.9%生理鹽水(四川科倫藥業(yè)股份有限公司生產，國藥準字：H51021157)。

1.3 試劑 胃動素(MTL)、胃泌素(GAS)、膽囊收縮素(CCK)Elisa試劑盒均由上海生工生物工程股份有限公司提供。

1.4 主要儀器 RT-6100酶聯(lián)免疫檢測儀(雷杜生命科學股份有限公司)，GS-671電子秤(大連海星生物有限公司)。

1.5 實驗方法

1.5.1 動物分組 SD雄性大鼠適應性喂養(yǎng)1周后，按隨機數(shù)字表法隨機分為正常對照組(空白組)15只，造模組55只，造模結束后2組各隨機抽取5只，以驗證造模是否成功。將造模成功的50只大鼠隨機分為模型組，運脾顆粒低、中、高劑量組及西藥對照組，每組10只。

1.5.2 造模方法 肝郁脾虛型FD大鼠模型的建立：采用適度夾尾刺激［6］+ 不規(guī)則喂養(yǎng)［7］+ 苦寒瀉下［8］的復合因素造模法制成FD大鼠模型。除正常對照組外，其余各組按“夾尾刺激法+不規(guī)則喂養(yǎng)”造模14天，結合“苦寒瀉下”造模7天：用長海綿鉗夾大鼠尾巴末端近1/3處，以令其尖叫掙扎但不破皮為度，使其發(fā)怒并和其他大鼠廝打(若有抓傷，予以碘伏消毒傷口，預防感染)，每次每組刺激30分鐘，2次/天，連續(xù)造模14天；將大鼠正常飲水，單日喂食，雙日禁食(記錄每次喂給的食量，記錄于造模前、造模后、治療后大鼠的體質量)，并于禁食日予以番瀉葉水煎劑灌胃，2次/天。14天后，造模結束。

1.5.3 藥物制備及給藥 藥品均按照人與大鼠的等效劑量換算(參照人與動物之間按體表面積折算的等效劑量比值表)，換算系數(shù)為0.018。換算后運脾顆粒高、中、低劑量組將分別配置成0.216g/mL、0.108g/mL、0.054g/mL并均以 1mL/100g灌胃；西藥組將多潘立酮片研碎成粉末制成0.27 mg/mL的混懸液以1 mL/100g灌胃；空白組與模型組的大鼠每日用生理鹽水以1 mL/100 g灌胃，6組均每日2次，給藥14天。番瀉葉水煎劑［8］：以100 mL水含5 g番瀉葉的比例，將番瀉葉置于沸tents of CCK decreased,and the difference had statistical meaning(P＜0.05,P＜0.01);and the difference was statistically significant in the comparisons of the contents of MTL,GAS and CCK when moderate and high dose groups of spleen-activating granules were compared with western medicine group(P＜0.05),and the difference had no statistical meaning when low dose group was compared with western medicine group(P＞0.05).Conclusion:Spleen-activating granules could increase food intake and body weight of the rats of FD of liver-depression spleen-deficiency pattern,improve mental state,feces,coat colour of the models,which might be related to that it could up regulate the content of MTL and GAS of the model and down regulate the level of CCK in the serum,and it′s one of the mechanisms of spleen-activating granules in the prevention and treatment for FD.

Key words spleen-activating granules;functional dyspepsia;liver-depression spleen-deficiency;gastrointestinal hormone水中浸泡，按0.02 mL/g灌胃。

1.5.4 標本采集與處理 各組大鼠末次給藥后，禁食不禁水24h，次日上午注入5%碳末懸液0.01mL/g灌胃給藥。30 min后，用10%水合氯醛腹腔注射，以0.3 mL/100g麻醉。打開腹腔，腹主動脈采血，室溫靜置1～2 h后，3 000 r/min離心10 min，提取血清，分裝于離心管中，并逐一記錄，存放于-80℃冰箱中。ELISA法檢測大鼠血清中MTL、GAS及CCK的含量變化。

1.6 統(tǒng)計學方法 運用SPSS 21.0進行統(tǒng)計分析，計量資料以(±s)表示，先對資料進行正態(tài)性檢驗。符合正態(tài)分布的計量資料，多組間比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)，方差齊者用LSD法，不齊者用Dunnett′sT3法。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各組大鼠一般情況觀察 造模前，可見各組大鼠精神狀態(tài)良好，皮毛光澤，皮膚黏膜呈粉紅色，活動靈敏，糞便呈梭形，干稀適中。造模初期，造模組大鼠在夾尾刺激時反應強烈，怒叫，易激惹，造模過程中有排便現(xiàn)象。解除夾尾刺激后，大鼠出現(xiàn)相互撕咬或廝打現(xiàn)象，精神狀態(tài)極為不安。而在造模后期，造模各組大鼠出現(xiàn)對夾尾剌激的反應減弱，有撕咬、尖叫但程度有所減輕，解除夾尾刺激后，大鼠呈高警覺對峙狀態(tài)；并逐漸出現(xiàn)精神萎靡，瞇眼，活動減少，喜扎堆縮于角落，食量減少，毛發(fā)粗亂枯槁無華，足蹼、鼻尖、耳緣黏膜蒼白，糞便時干時稀，拉尾排便反應陽性。干預結束后，空白組大鼠精神狀態(tài)佳，毛色鮮亮，活躍靈敏，進食、體質量較之前均有所增加。各治療組大鼠均不同程度出現(xiàn)情緒平緩，毛發(fā)光澤有所改善，進食量增多，活動度增加，糞便逐漸成形，干稀適中。

2.2 各組大鼠進食量、體質量變化 造模前各組大鼠食量、體質量無差異，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；造模后與空白組比較，模型組、運脾顆粒各劑量組及西藥組大鼠進食量、體質量均有不同程度的減少，且差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；干預后與模型組比較，運脾顆粒各劑量組及西藥組大鼠進食量、體質量均有增加，且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；而運脾顆粒各劑量組與西藥組相比，進食量與體質量差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表1-2。

2.3 各組大鼠血清MTL的含量變化 與空白組比較，模型組大鼠血清MTL、GAS濃度有所下降，血清CCK濃度升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；與模型組比較，運脾顆粒各劑量組及西藥組大鼠血清MTL、GAS濃度均升高，血清CCK濃度降低，且差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；且運脾顆粒中、高劑量組大鼠血清MTL、GAS、CCK濃度變化與西藥組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，而運脾顆粒低劑量組大鼠血清MTL、GAS、CCK濃度變化與西藥組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表3。

表1 各組大鼠食量變化比較(±s)

表1 各組大鼠食量變化比較(±s)

注：△表示與空白組比較，P＜0.01；★表示與模型組比較，P＜0.01；※表示與西藥組比較，P＞0.05

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表2 各組大鼠體質量變化比較(±s)

表2 各組大鼠體質量變化比較(±s)

注：△表示與空白組比較，P＜0.01；★表示與模型組比較，P＜0.01；※表示與西藥組比較，P＞0.05

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表3 各組大鼠血清MTL的含量變化比較(±s)

表3 各組大鼠血清MTL的含量變化比較(±s)

注：△表示與空白組比較，P＜0.01；與模型組比較，P＜0.05，☆表示P＜0.01；與西藥組比較，※表示P＞0.05，▲表示P＜0.05

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3 討論

功能性消化不良不僅受神經系統(tǒng)的調節(jié)，體液調節(jié)也發(fā)揮著至關重要的作用，其中包括胃腸激素的分泌調節(jié)。胃腸激素作為胃腸道與腦進行信號傳遞的重要化學物質，這些信號可在腦干迷走復合體發(fā)揮功用，從而影響迷走神經信號的傳出，最終參與胃腸運動、攝食以及食欲的調控［9］。有學者［10］運用RT-PCR或免疫組化的方法，發(fā)現(xiàn)FD患者胃黏膜中嗜鉻細胞數(shù)目增多，同時伴有5-羥色胺含量升高，因此認為胃的高敏感性、消化道動力異常可能與此相關?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的胃腸激素約40多種，被廣泛研究的有膽囊收縮素、胃動素、血管活性腸肽、胃泌素和生長抑素等，對胃腸道動力有重要調節(jié)作用。相關研究顯示［11］，不同的胃腸激素對胃腸動力有不同的作用，因此深入探究FD及消化道運動與胃腸激素的相關性，以期從FD可能發(fā)生的病因病機出發(fā)，為FD的診治提供新的思路。

MTL主要生理作用是對消化間期移行復合運動(MMC)Ⅲ相收縮運動［12］有重要調控，加速胃腸蠕動，促進胃排空，并能參與食欲與情志。Sanger等人發(fā)現(xiàn)［13］，F(xiàn)D 患者存在胃排空延緩，MMCⅢ期收縮能力減弱是由于MTL分泌水平的下降所致，且FD患者血漿MTL含量較正常人明顯減少。Cuomo等人通過實驗證實［14］，MTL可加強人體胃體近端收縮，進而緩解進餐后引起的飽脹不適等。大量的研究證實，給予中藥或西藥干預后，MTL水平上調，如王忠亮［15］運用復方嗜酸乳桿菌片聯(lián)合莫沙必利干預FD患者，以觀察胃排空及MTL含量的變化。結果顯示，干預8周后，患者血清MTL含量較治療前明顯上升，且胃排空總有效率優(yōu)于治療前。

GAS生理功能主要是分泌胃酸、胃蛋白酶，以助消化，且使胃竇及幽門括約肌收縮；同時GAS具有營養(yǎng)作用，可通過增加黏膜血流，保證胃腸黏膜生長［16］。Breukink 等［17］研究發(fā)現(xiàn) GAS 含量的波動在一定程度上影響著胃腸平滑肌的運動情況。也有學者［18］觀察FD患者精神狀態(tài)與胃竇黏膜GAS表達的相關性，通過焦慮自評量表(SAS)、抑郁自評量表(SDS)來評估30例FD患者的精神狀況，結果發(fā)現(xiàn)GAS的表達與SAS、SDS評分呈負相關，所以FD患者常伴焦慮抑郁可能與GAS表達水平下降有關。

CCK又名縮膽囊素，是一種由33個氨基酸構成的多肽，由小腸黏膜的I細胞分泌，主要生理功能是促進膽囊收縮，延緩胃排空，刺激胰腺及胃酸分泌，增加結腸動力，是機體飽脹感的調節(jié)激素之一。大量研究發(fā)現(xiàn)［19-20］，胃排空的延緩而引起的胃腸道不適反應與CCK高水平的表達有關，且高表達的CCK持續(xù)刺激腸道收縮，使結腸黏膜機械感受器的敏感性增強，是導致腹痛的機制之一。在CCK-1拮抗劑干預后FD患者的飽脹不適、惡心等臨床癥狀得到減輕，也從側面證實CCK能夠抑制胃排空，另有研究指出CCK作為影響FD患者餐后飽脹不適綜合征的重要胃腸激素［21］。

運脾顆粒由全國名中醫(yī)王自立教授的運脾湯變化而來，王自立教授在總結前人經驗的基礎上，結合自己多年的臨床體會，認為脾虛失運，氣機升降失常是病機關鍵所在。針對脾虛失運證，提出“脾以運為健，以運為補”理論，臨證確立“健脾先運脾，運脾必調氣”之治法，立運脾湯一方補運同舉，補中寓運，運中有補，補不礙滯，運不傷正，已成為診治脾胃病的基本思路與治則。其基本藥物組成：黨參、白術、茯苓、仙鶴草、枳殼、佛手、石菖蒲、炒麥芽等。方中黨參益氣健脾；白術補脾益胃，燥濕和中；仙鶴草補脾腎之虛，亦有強壯之效；茯苓健脾滲濕。4藥合而為君，有四君子湯之義。佛手疏肝理氣和胃，以防木郁克土，卻無耗氣傷津之弊；枳殼善理氣寬中，行氣消脹，與佛手合用增強運脾調氣之效；炒麥芽健脾消食、行氣消脹；石菖蒲芳香醒脾，化濕和胃。諸藥合用，寓補氣以助運，調氣以健運，兼以肝脾共調，使脾運復健，升降如常，諸病自除［22-23］。

現(xiàn)代藥理也證實［24-29］：黨參、白術、枳殼、佛手可促進小鼠胃排空，加強腸蠕動，提高消化能力，增加體質量；炒麥芽促進胃酸、胃蛋白酶分泌，有助消化的作用；石菖蒲也可促進大鼠膽汁分泌；仙鶴草具有抗炎、抗疲勞作用；茯苓可調節(jié)腸道菌群；此外，佛手、石菖蒲對焦慮、抑郁等精神情緒障礙有良好的改善作用。

本實驗結果顯示：運脾顆粒通過對肝郁脾虛型FD大鼠胃腸激素多靶點、多層次的調控，使得FD大鼠的進食量及體質量增加，運脾顆粒通過調節(jié)胃腸激素，促進了胃排空及腸推進功能，使得FD胃腸動力得到改善，最終達到治療FD的目的。

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