費(fèi)黎明

（長(zhǎng)沙生殖醫(yī)學(xué)醫(yī)院 湖南長(zhǎng)沙 410000）

1 前言

女性不孕的因素較為復(fù)雜，除客觀原因外，還與人體內(nèi)的免疫系統(tǒng)有關(guān)，5種血清免疫性不孕抗體分別為：人絨毛膜促性腺激素、抗精子抗體、抗卵巢抗體、抗子宮內(nèi)膜抗體及抗心磷脂抗體[1]。對(duì)這5種血清免疫不孕抗體進(jìn)行檢測(cè)，可以分析導(dǎo)致女性不孕的主要免疫因素，為后續(xù)治療提供依據(jù)。本文對(duì)此開展研究，以期為相關(guān)人員提供參考。

2 資料與方法

2.1 一般資料

本文選取2020年1月—2022年1月本院收治的確診不孕癥的女性患者共100例，分為原發(fā)組和繼發(fā)組，每組各50例。繼發(fā)組患者的疾病類型為：多囊卵巢綜合癥10例、高泌乳素血癥10例、卵巢功能障礙5例、習(xí)慣性流產(chǎn)17例、月經(jīng)不調(diào)8例。選取同期在我院進(jìn)行正常體檢的人員50名，設(shè)為對(duì)照組。年齡范圍為21～34歲，平均年齡為（27.51±3.01）歲，基礎(chǔ)數(shù)據(jù)無明顯差異，具有可對(duì)比，P＞0.05。

納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡≥18歲；認(rèn)知功能正常；未患傳染性、惡性腫瘤、血液系統(tǒng)及代謝系統(tǒng)性疾病；患者及其家屬同意參與本次研究，且簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：不愿參與研究；采血后需手術(shù)；存在習(xí)慣性流產(chǎn)者；凝血障礙。本次研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

2.2 標(biāo)本采集

3組研究對(duì)象在空腹?fàn)顟B(tài)下，采集2 ml肘靜脈血；常溫條件下靜置，分離血清；存放于-20℃的冰箱中備用。所有研究對(duì)象都要進(jìn)行子宮輸卵管造影術(shù)（HSG）[2]。

2.3 儀器和試劑

不孕微陣列芯片（西安聯(lián)爾科技公司）；LE-01-B型生物微矩陣分析儀（西安聯(lián)爾科技公司）；抗核抗體IgG檢測(cè)試劑盒（杭州歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)有限公司）；顯微鏡（Leica公司）。

2.4 檢測(cè)步驟

應(yīng)用蛋白微陣列芯片聯(lián)合檢測(cè)5種自身免疫抗體，操作過程嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行，待血液充分反映后，須在15 min內(nèi)將芯片置于儀器內(nèi)進(jìn)行掃描。核抗體的檢測(cè)步驟要按照抗核抗體IgG檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行，在顯微鏡下仔細(xì)觀察[3]。

2.5 觀察指標(biāo)

觀察3組檢測(cè)結(jié)果的陽性率；觀察3組檢測(cè)結(jié)果的敏感度、特異度及準(zhǔn)確度等診斷效能；觀察3組檢測(cè)結(jié)果的一致率；本次研究以HSG檢查為不孕癥檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用Dataload 5.4.10軟件錄入數(shù)據(jù)；應(yīng)用Graph PadPrism 8.0軟件比對(duì)數(shù)據(jù)；計(jì)量資料行t檢驗(yàn)；計(jì)量數(shù)據(jù)以卡方作為計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)；P＜0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3組檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，詳見表1。3組方法診斷效能，詳見表2。3組檢測(cè)一致率為45.33%，詳見表3。

表1 3組檢測(cè)結(jié)果對(duì)比[n（%）]

表2 3組方法診斷效能（n，%）

表3 3種方法檢測(cè)一致性

4 討論

4.1 HCGAb

HCG是由胎盤合成用分泌的一種糖蛋白，可以促進(jìn)卵巢形成妊娠黃體。HCHAb是人體內(nèi)以HCG為靶向的一種抗原體，能夠直接中和HCG黃體的應(yīng)用，使產(chǎn)生HCG的滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌不夠，引發(fā)內(nèi)分泌激素出現(xiàn)變化，導(dǎo)致卵巢排卵發(fā)生異常，對(duì)女性的各項(xiàng)激素產(chǎn)生一定的影響，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)?dǎo)致女性不孕。

4.2 AsAb

由于男性生殖器官存在血睪屏障，能夠?qū)⒕拥目乖w和機(jī)體免疫系統(tǒng)隔離，故機(jī)體在正常情況下不會(huì)出現(xiàn)AsAb，當(dāng)機(jī)體受到感染或出現(xiàn)外傷時(shí)，身體的免疫系統(tǒng)會(huì)出現(xiàn)紊亂，免疫活性細(xì)胞接觸精子會(huì)刺激到女方的免疫體系，產(chǎn)生自身或同種AsAb，會(huì)阻止精子透過子宮頸黏液、精液，使得精子不停地顫動(dòng)、凝聚或出現(xiàn)制動(dòng)反應(yīng)，是引發(fā)女性不孕的主要原因。

4.3 AOAb

AOAb是在卵巢顆粒細(xì)胞和卵母細(xì)胞及黃體細(xì)胞內(nèi)的自身抗體，會(huì)導(dǎo)致女性卵巢免疫出現(xiàn)損傷，使成熟之前的卵泡出現(xiàn)閉鎖或出現(xiàn)卵子退化，嚴(yán)重時(shí)會(huì)阻止胚細(xì)胞分裂，妨礙卵母細(xì)胞的發(fā)育，直接影響到女性的正常排卵，導(dǎo)致女性不孕。本文的研究結(jié)果顯示，在5種血清免疫性不孕抗體中，AOAb的陽性率最高，可知其為引發(fā)女性不孕的主要因素。

4.4 EMAb

EMAb是以子宮內(nèi)膜為靶向細(xì)胞可以引發(fā)一系列免疫病理反應(yīng)的抗體，會(huì)使內(nèi)膜和基底膜細(xì)胞的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，導(dǎo)致子宮內(nèi)膜出現(xiàn)增生或發(fā)育不良等情況，使子宮內(nèi)膜分泌功能出現(xiàn)紊亂，影響卵子著床，導(dǎo)致不孕。

4.5 ACA

ACA是目前已明確會(huì)直接引發(fā)血液高凝狀態(tài)的唯一一種自身抗體，可以通過與各種磷脂及蛋白質(zhì)融合，干擾各種依賴磷脂的凝血及抗凝因子，引發(fā)免疫反應(yīng)，導(dǎo)致血小板發(fā)生損傷，選擇性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞和血小板上的磷脂，抑制花生四烯酸的釋放，促進(jìn)前列腺素的比例發(fā)生變化，導(dǎo)致磷脂的活性降低[4]。同時(shí)也會(huì)直接影響到纖維蛋白溶酶原激活劑釋放和蛋白融化，作用于滋養(yǎng)層表面的磷脂依賴抗原，影響到其分化和融合，使合體滋養(yǎng)層細(xì)胞的形成時(shí)間不夠，造成子宮對(duì)胚胎的接收能力減弱，維持妊娠的胎盤激素水平失調(diào)，出現(xiàn)血小板凝聚，導(dǎo)致胎兒的氧氣和營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)不夠，最終引發(fā)流產(chǎn)。ACA還能夠利用一些途徑損害受孕能力，如與卵巢組織中的磷脂成分融合成復(fù)合物，干擾卵子的正常排出，結(jié)合精子的磷脂成分，導(dǎo)致精子無法與卵子結(jié)合；與子宮內(nèi)膜磷脂成分結(jié)合為復(fù)合物，干擾受精卵的著床；阻止滋養(yǎng)細(xì)胞繁殖分化和受精卵的正常發(fā)育。

本文研究結(jié)果顯示，原發(fā)組和繼發(fā)組的自身抗體陽性率與對(duì)照組相比，差異顯著，P<0.05，而原發(fā)組自身抗體陽性率與繼發(fā)組相比，差異明顯，P<0.05。由此可見，無論是原發(fā)組還是繼發(fā)組，與對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，原發(fā)組和繼發(fā)組的患者體內(nèi)均可能存在某種損傷或自身抗體異常，引發(fā)較強(qiáng)的免疫影響，刺激到機(jī)體自身的抗體。

綜上所述，臨床血清免疫性不孕抗體是直接引發(fā)女性不孕的重要免疫因素，臨床檢測(cè)對(duì)免疫性不孕的診斷和后續(xù)的治療均具有重要的指導(dǎo)意義，5種自身免疫抗體的聯(lián)合檢測(cè)可以顯著提升檢驗(yàn)的靈敏度和準(zhǔn)確度，值得推廣。