趙麗 張瑞雨 李文廷 趙勇

摘要 [目的]建立蘋果粉中五氯硝基苯能力驗證的氣相色譜-質譜（GC-MS）聯用檢測方法。[方法]通過采用不同的考核樣品前處理方法，選用不同的萃取溶劑和凈化方式，探索最有利于考核樣品檢測的前處理方法。[結果]在0.01～0.05 μg/mL濃度范圍內，該方法線性關系良好，在0.01～0.05 μg/mL加標范圍內其回收率為98.90%～110.00%。[結論]采用該方法進行五氯硝基苯的能力驗證，能有效提高考核樣品檢測的準確度。

關鍵詞 果蔬粉；五氯硝基苯；能力驗證

中圖分類號 TS207.5+3 文獻標識碼

A 文章編號 0517-6611（2018）14-0179-03

Study on the Ability to Verify the Quintozene in Apple Powder

ZHAO Li，ZHANG Ruiyu，LI Wenting et al （Kunming Municipal Center for Disease Control and Prevention，Kunming，Yunnan 650228）

Abstract [Objective]A multiresidue analytical ability was developed for determination of quintozene in apple by gas chromatomatographymass spectrometry （GCMS）.[Method]By using different pretreatment methods， different extraction solvents and purification methods were selected to explore the most favorable pretreatment method for sample inspection.[Result]In the concentration range of 0.01-0.05 μg/mL， this method had good linearity，in the 0.01-0.05 μg/mL standard within the scope of the recovery rate was 98.90%-110.00%.[Conclusion]Employing the method to verify quintozene can effectively improve the detection accuracy of test samples.

Key words Fruit and vegetable powder；Quintozene；Proficiency testing

隨著國家對食品安全關注度的提高，食品安全風險監(jiān)測已成為每年度檢測工作的重要內容，而農藥殘留檢測仍是食品安全風險監(jiān)測的重要項目。近2年來果蔬中的五氯硝基苯（PCNB） 仍是農殘檢測的重要項目。五氯硝基苯屬含氯有機氮保護性殺菌劑，化學性質穩(wěn)定，不易揮發(fā)、氧化和分解，也不易受陽光和酸堿的影響，主要用于土壤和種子處理，在土壤中殘效期長，使蔬菜、水果、中藥材和飼料中時有殘留[1-3]。

目前檢測五氯硝基苯的方法有氣相色譜法[4]、氣相色譜-質譜聯用法（GC- MS）[5] 、高效液相色譜法[6]。前處理方法通常為運用正己烷 （或石油醚）-丙酮多次提取，濃硫酸磺化法凈化[7]，或采用硅鎂吸附劑預處理小柱[8]、固相萃取或中空纖維膜液相微萃取技術[9]，雖然都取得了較好的效果，但由于反復提取的試劑較多，需經較長時間旋轉蒸發(fā)，預處理柱也需經活化和淋洗，固相萃取及微萃取成本較高，在檢測大批次樣品時仍顯不足。近年 QuEChERS前處理技術因其操作簡單，成本低廉，有機試劑用量少，檢測時間短，被廣泛應用于大批次農藥殘留檢測中[10 -11]。2016 年，朱惠芳等[3]在農殘分析中采用QuEChERS為樣品前處理方法。該方法是運用一些高效的提取和凈化試劑，通過簡單的離心或柱分離，將農藥成分與樣品基質分離并通過此方法對樣品進行提取和凈化，但針對蘋果粉中農藥殘留能力驗證來說，以上方法仍不能有效提高樣品檢測的準確度[12]。因此針對基質相對簡單的能力驗證樣品來說，以上方法都存在一定的提取損耗。筆者在以上研究的基礎上進一步優(yōu)化了蘋果粉中農藥殘留能力驗證樣品檢測的相關方法，以尋找到最有效、最有利于能力驗證的方法，從而提高能力驗證的準確度。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

果汁中五氯硝基苯內標質控樣品（CFAPA-QC062B-12，大連中食國實檢測技術有限公司）；五氯硝基苯（GSB05-1845-2016，批號201705）、順式-環(huán)氧七氯（SB05-291-2015，批號201701）標準溶液100 mg/L，農業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所研制；乙腈、正己烷，色譜純。

Agilent 7890B-7000C氣相色譜-質譜聯用儀（美國Agilent公司）；KQ-500DE型超聲儀（昆山市超聲儀器有限公司）；VORTEX SHAKER型渦旋儀（Qilinbeier公司）。

1.2 色譜條件

DB-35S毛細管色譜柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）。色譜柱溫度：初始溫度130 ℃，保持1 min，10 ℃/min速率升至195 ℃，保持10 min；離子源溫度230 ℃；進樣口溫度260 ℃；傳輸線溫度280 ℃。載氣高純氦氣（純度99.999%）1.2 mL/min；進樣量1.0 μL；定量方法：峰面積內標法。

1.3 農藥標準儲備液的配制 準確吸取每種標準溶液1.00 mL于10 mL的容量瓶內，用正己烷定容至刻度，即配成濃度為10.0 μg/mL的儲備液。以標準儲備液為基礎分別配制濃度為0.01、0.02、0.03、0.04、0.05 μg/mL的標準溶液。

1.4 考核樣品的前處理

該試驗中考核樣品為蘋果粉，蘋果粉樣品的前處理均采用如下3種方法。

1.4.1 方法一。稱取蘋果粉考核樣0.5 g（精確至0.000 1 g），加入5.0 mL純水和300 μL濃度為1.0 μg/mL的內標溶液，浸泡20 min，準確加入5.0 mL乙腈溶液，超聲10 min，加入3～5 g氯化鈉和5 g無水硫酸鈉，渦旋混勻，離心3 min，將上清液完全轉移至雞心瓶中，于30 ℃水浴中減壓蒸餾濃縮至凈干，加入正己烷溶液進行定容，定容后進行GC-MS檢測分析。

1.4.2 方法二。稱取蘋果粉考核樣0.5 g（精確至0.000 1 g），加入5.0 mL純水和300 μL濃度為1.0 μg/mL的內標溶液，浸泡20 min，準確加入5.0 mL乙腈溶液，超聲10 min，加入3～5 g氯化鈉，渦旋混勻，離心3 min，加入5 g 無水硫酸鈉，取上清液直接進行GC-MS分析測定。

1.4.3 方法三。稱取蘋果粉考核樣0.5 g（精確至0.000 1 g），加入5.0 mL純水和300 μL濃度為1.0 μg/mL 的內標溶液，浸泡20 min，準確加入5.0 mL正己烷溶液，超聲10 min，離心3 min，加入5 g 無水硫酸鈉，取上清液直接進行GC-MS分析測定。

1.5 內控樣品果汁的前處理 準確稱取果汁內控樣2.0 g（精確至0.000 1 g），加入300 μL濃度為1.0 μg/mL的內標溶液，浸泡20 min，按照考核樣品前處理方法后續(xù)步驟進行處理，待GC-MS檢測分析。

1.6 研究方法 分別考察3種前處理方法對考核樣品和內控樣品檢測準確度的影響，并探究最有利于提高樣品檢測準確度的前處理方法，以提高檢測的準確度。

2 結果與分析

2.1 線性關系與檢出限 試驗結果表明，在所選標準濃度0.01、0.02、0.03、0.04、0.05 μg/mL范圍內，線性關系良好。五氯硝基苯線性方程為y=0.531 88x-0.037 20，相關系數r為0.999 5。該方法的檢出限為五氯硝基苯0.002 mg/kg。樣品色譜圖及質譜圖見圖1、2。

2.2 樣品前處理方法對回收率的影響

分別稱取考核樣品 和已知樣品，采用3種前處理方法進行處理，考察檢測的精密度和加標回收率，經測定，采用方法一處理的考核樣及內控樣品，其回收率為50.31%～62.35%；采用方法二處理的考核樣及內控樣品，其回收率為83.23%～90.56%，并且乙腈對色素的提取能力較強，所以提取液經凈化處理后，待測樣液的顏色相對較深，對質譜和色譜柱的污染相對較大；采用方法三處理的考核樣及內控樣品，其回收率為98.90%～110.00%，且提取液經凈化后，待測樣液顏色相對較淺。

由表1可知，采用方法三進行前處理所得到的樣品檢測結果與指定值更吻合，結果更準確。

由表2可知，無論對于考核樣品還是內控樣品，經過方法三處理后其加標回收率均比另外2種方法更高，所以采用方法三進行前處理更有利于果蔬中五氯硝基苯的檢測。

2.3 超聲及渦旋條件的選擇

該試驗在加入提取試劑后分別采用渦旋10 min、超聲10 min、超聲10 min+渦旋5 min的方式對樣品進行處理，試驗結果表明，單獨采用超聲和渦旋提取的效果遠沒有采用超聲再渦旋的提取效果好。因此，提取時宜先進行超聲提取10 min，再進行渦旋5 min，這樣更有利于目標物進入提取試劑中，其提取效果比較見圖3。

3 結論

在果蔬五氯硝基苯殘留檢測過程中，采用正己烷直接提取，并采用超聲后渦旋處理方式能在最大程度上提高樣品檢測的準確度。因此，樣品前處理過程越簡單越能有效提高提取效率，同時讓試劑與樣品充分接觸的處理方式能有效提高

提取效果，從而提高檢測的準確度。

參考文獻

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