魏曉惠　謝穎穎　楊玉玲　何春雷

摘要[目的]鑒別不同季節(jié)蒙頂甘露茶。[方法]使用國標法對雅安地區(qū)春、夏、秋三季采用相同工藝制成的61組蒙頂甘露荼樣進行測定，計算其茶多酚與茶氨酸的比值，并分析不同季節(jié)茶樣該比值的差異。[結果]夏秋茶的茶多酚/茶氨酸集中在15以上，而春荼的茶多酚/茶氨酸在15以下。[結論]茶多酚/茶氨酸可以作為區(qū)分春茶和夏秋荼的良好指標，當茶多酚與茶氨酸的比值小于15時為春季產蒙頂甘露茶，比值大于15時為夏秋季產蒙頂甘露茶。

關鍵詞 蒙頂甘露茶；春茶；夏秋茶；茶多酚；茶氨酸

中圖分類號 TS272.5 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2018）11-0155-02

茶氨酸是茶葉中特有的氨基酸，屬酰胺類化合物，是茶葉的重要活性成分之一，占茶葉干物質總重的1%～2%，占茶葉中游離氨基酸總量的40%～70%，其含量與茶葉品質呈正相關，是賦予茶葉鮮甘滋味的重要物質基礎。茶多酚是茶葉中多酚類物質的總稱，其作為茶葉中的主要抗氧化物質，占茶葉干重的18%～36%，是茶葉中呈現苦澀口感的主要滋味物質。碳氮代謝是茶樹物質代謝的主要方式之一，氮代謝以氨基酸變化為標志，碳代謝以茶多酚變化為標志。隨著季節(jié)的不同，茶氨酸在茶樹體內遷移運動，冬季茶樹休眠，茶氨酸主要貯存在根部，春天茶芽萌發(fā)，茶樹新梢中的茶氨酸增加，并保持在較高水平，隨著夏、秋季節(jié)漸進，茶樹新梢中的茶氨酸逐漸降低，在8月底降至最低。茶葉中的多酚類物質隨著季節(jié)不同而變化，夏季新梢中的多酚類物質最高，秋梢次之，春梢最少。該研究以雅安地區(qū)春季和夏秋季產的蒙頂甘露茶為試驗材料，采用高效液相色譜法測定其茶氨酸含量，采用分光光度法測定其茶多酚含量，探討不同季節(jié)茶樣的茶多酚與茶氨酸比值，以期為區(qū)分春季和夏秋季制作的蒙頂甘露茶提供理論依據。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1試材。在雅安市雨城區(qū)、名山區(qū)、天全縣、寶興縣、石棉縣、滎經縣、蘆山縣采集樣品61組，均為1芽1葉，采樣日期為2017年2月25日-8月22日，季節(jié)跨越春夏秋三季。制作工序均為殺青、揉捻、造型、干燥等。

1.1.2儀器。電熱恒溫干燥箱，上海躍進醫(yī)療器械廠；UV762紫外可見分光光度計，上海精密科學儀器有限公司；U3000高效液相色譜儀，含二極管陣列檢測器，賽默飛世爾科技公司；SG3300HPT超聲波清洗器，上海冠特超聲波儀器有限公司；BT125D電子天平，德國賽多利斯股份公司；HH—S數顯恒溫水浴鍋，金壇市正基儀器有限公司；FZ102微型植物實驗粉碎機，天津市泰斯特儀器有限公司；GN-RO-20型純水機，北京雙峰純水設備廠。

1.1.3試劑。乙腈、甲醇均為色譜純；福林酚試劑、沒食子酸、碳酸鈉、鄰苯二甲醛、乙硫醇、硼酸、氫氧化鈉、乙酸銨均為分析純；0.45μm無機濾膜；C₁₈固相萃取柱；水為超純水。L一茶氨酸標準品純度I>99%，使用時稱取0.05g茶氨酸（精確到0.0001g），用水溶解后移入50mL容量瓶中，稀釋至刻度，混勻，此溶液每毫升含1mg茶氨酸，有效期為1年。

1.2方法

1.2.1茶氨酸含量測定。按照GB/T23193-2008的方法進行測定。茶葉樣品經磨碎混勻后，準確稱取0.5g（精確到0.0001g），加水100mL，在80℃振搖恒溫水浴鍋中浸提45min，冷卻后將浸提液離心、過濾，上清液過C₁₈固相萃取柱進行凈化，再經0.45μm的微孔濾膜過濾到棕色自動進樣瓶中，衍生化后進行高效液相色譜儀分析。色譜條件：流動相為V（20mmoL/L乙酸銨溶液）：V（20mmolfL乙酸銨溶液：甲醇：乙腈=1：2：2）=1：1，色譜柱為C₁₈色譜柱Acclaim^TM120（5μm，250mm×4.6mm）。檢測波長為338nm，柱溫為40℃，流速為1.0mL/min，進樣量為10μL。

1.2.2茶多酚含量的測定。按照GB/T8313-2008的方法進行測定。稱取0.2g（精確至0.0001g）茶樣于10mL離心管中，加入70℃中預熱過的70%甲醇溶液5mL，攪拌均勻后立即移入70℃水浴中，浸提10min，冷卻至室溫后轉入離心機在3500r/min轉速下離心10min，將上清液移入10mL容量瓶中，殘渣再用70%甲醇溶液浸提2次。合并提取液定容至10mL容量瓶中，搖勻，過0.45μm濾膜；移取上述母液1.0mL于100mL容量瓶中，定容至刻度后搖勻作為測試液；用移液管分別移取沒食子酸工作液、水、測試液各1.0mL于刻度試管中，加5.0mL福林酚，搖勻，反應3～8min，加A4.0mL7.5%碳酸鈉，定容至刻度，搖勻，室溫放置60min，用10mm比色皿在765mm波長下測定吸光度A。按GB/T8304-2013測定茶樣干物質質量分數。

2結果與分析

由表1可知，雅安地區(qū)61個蒙頂甘露茶樣的茶多酚含量為17.6%～25.4%，茶氨酸的含量為0.67%～2.91%，茶多酚與茶氨酸的比值為6.80～36.77。茶葉樣品包括春茶和夏秋茶，其中春茶的茶多酚/茶氨酸為6.80～14.33；夏秋茶的茶多酚/茶氨酸為15.48～36.77?？梢姡那锊璧牟瓒喾?茶氨酸集中在15以上，而春茶的茶多酚/茶氨酸在15以下。

將61組數據分成春季和夏秋季2組，采用t檢驗驗證這2組數據是否有顯著差異。由于夏秋季數據只有20組，屬于小樣本，首先用F檢驗確定2組樣本所來自的總體方差是否相等，如果相等，采用f檢驗，如果不相等采用近似t檢驗。F檢驗結果顯示，由于1>F>F0.975，固有F0.025>F>F0.975，因此可以推斷δ₁²=δ₂²，即這2組樣本平均數應該采用t檢驗。t檢驗結果說明2組數據差異極顯著，顯著性達到0.01的顯著性水平。

3結論與討論

該研究結果表明，用茶多酚/茶氨酸來區(qū)分春茶和夏秋茶有統(tǒng)計學意義。春季隨著茶芽的萌發(fā)，茶樹新梢中的茶氨酸含量升高，并保持在較高水平，但春季茶樹的碳代謝較弱，合成的多酚類物質相對較少，導致茶多酚/茶氨酸較低；隨著夏、秋季節(jié)的漸進，氣溫升高及光照的增強使茶樹的碳代謝增強，合成的多酚類物質較多，而夏秋季茶樹新梢中的茶氨酸含量逐漸降低，到8月底茶氨酸含量降至最低，為0.67%，導致茶多酚/茶氨酸升高。因此，可以將茶多酚與茶氨酸的比值作為區(qū)分春茶和夏秋茶的良好指標，可將茶多酚/茶氨酸的臨界值設定為15。當茶葉中茶多酚/茶氨酸的比值大于15時則可初步判斷為夏秋季產的蒙頂甘露茶，比值小于15時可初步判斷為春季產蒙頂甘露茶。