張鋒鋒 陳翔 牛艷 王曉菁

摘要[目的]建立高效液相色譜方法快速測定馬鈴薯莖葉、塊莖及其土壤中霜脲氰殘留量的方法。[方法]樣品經乙腈提取，NH2固相萃取小柱凈化后，以乙腈-水為流動相，使用C18色譜柱，通過Waters 2695高效液相色譜-紫外檢測器，在254 nm檢測波長下對霜脲氰進行分析檢測，面積外標法定量。[結果]在0.1、0.5、2.0 mg/kg 3個不同添加濃度水平下，馬鈴薯莖葉中平均回收率為78.0%～1044%，相對標準偏差為2.7%～3.4%；馬鈴薯塊莖中平均回收率為82.9%～94.7%，相對標準偏差為1.1%～2.3%；土壤中平均回收率為81.6%～91.8%，相對標準偏差為3.3%～5.4%。霜脲氰在濃度為0.05～2.00 mg/L時線性關系良好（r=0.999 8），最小檢出量為0.06 ng，在馬鈴薯莖葉、塊莖和土壤中的最低檢測濃度均為10 μg/kg。[結論]該方法簡便、快捷、成本低、精密度好、準確率高，適用于馬鈴薯及其土壤中霜脲氰的大批量分析檢測，是一種較為實用的檢測方法。

關鍵詞馬鈴薯；土壤；霜脲氰；高效液相色譜

中圖分類號S481+.8文獻標識碼A文章編號0517-6611（2018）05-0193-03

Abstract[Objective] A rapid determination method was established for the residue of cymoxanil in potato stem leaf， tuber and soil by HPLC. [Method] The samples were extracted with acetonitrile and purified by NH2 solidphase extraction column. Analysis and determination were conducted by Waters 2695 HPLC with C18 column and UV detector at 254 nm， and CH3CNH2O was utilized as the mobile phase. The residues were quantified by area of external standard method. [Result] When the concentration levels were added at different levels of 0.1， 05 and 2.0 mg/kg， the average recoveries of residues were 78.0%-104.4% with RSD of 2.7%-3.4% in potato stem leaves， and 829%-94.7% with RSD of 1.1%-2.3% in potato tubers， and 81.6%-91.8% with RSD of 3.3%-5.4% in soil. The linear relationship was obtained in the concentration that range from 0.05 to 2.00 mg/L for cymoxanil （r=0.999 8）. The minimum detectable amount of cymoxanil was 0.06 ng. The minimum detectable concentrations of cymoxanil was 10 μg/kg in potato stem leaf， tuber and soil. [Conclusion] This method has advantages of simple， rapid， low cost， good precision and high accuracy， which is a practical detection method for the large batch analysis of cymoxanil in potato and soil.

Key wordsPotato；Soil；Cymoxanil；High performance liquid chromatography

霜脲氰（Cymoxanil），化學名稱為1-（2-氰基-2-甲氧基亞胺基）-3-乙基脲，分子式為C7H10N4O3，是一種具有內吸作用的脲類高效殺菌劑，常與其他保護性殺菌劑混用以提高殘留活性，對番茄、黃瓜、葡萄等作物的霜霉病和馬鈴薯晚疫病有明顯的防治效果[1-4]。目前，霜脲氰單殘留分析檢測方法多以液相色譜法為主[5-9]，但大多前處理復雜，樣品凈化條件要求苛刻。筆者采用高效液相色譜法，通過簡化樣品提取、凈化及上機條件，建立了馬鈴薯莖葉、塊莖及其土壤中霜脲氰快速分析方法，旨在為馬鈴薯及其土壤中霜脲氰的大批量分析檢測提供參考。

1材料與方法

1.1材料

Waters 2695高效液相色譜儀及2487紫外吸收檢測器（美國Waters公司）；電子天平（PL202-L和XS205各1臺，瑞士METTLER TOLEDO公司）；恒溫振蕩器（CHA-S，常州國華電器有限公司）；低速臺式離心機（TDL-40，上海安亭科學儀器廠）；旋轉蒸發(fā)器（R-215，瑞士BUCHI公司）；氮吹儀（N-EVAP-12，美國Organomation公司）；純水機（美國 Millipore公司）；NH2固相萃取小柱（500 mg/6mL，美國Agilent公司）。

甲醇、乙腈、二氯甲烷為色譜純（美國Fisher公司）；氯化鈉（分析純，天津市光復科技發(fā)展有限公司）經140 ℃烘烤6 h后，置于干燥器中保存；霜脲氰標準品（0.1 g，純度995%，德國Dr.Ehrenstorfer公司）；試驗用水為18.2 MΩ·cm的高純水。

1.2方法

1.2.1標準溶液的配制。

稱取0.010 05 g霜脲氰標準品，用10 mL甲醇配制成1 000 mg/L標準溶液母液，量取1.0 mL標準溶液母液于100 mL容量瓶中，用甲醇定容，配制成10 mg/L 標準儲備液，置于-20 ℃冰箱中保存待用。

1.2.2樣品前處理。

1.2.2.1提取。

稱取10.00 g土壤或勻漿好的馬鈴薯莖葉或塊莖樣品，置于50 mL離心管中，加入20 mL乙腈，振蕩提取30 min后加入3 g氯化鈉，振搖2 min，以4 000 r/min離心5 min。吸取10.0 mL離心后的提取液于250 mL濃縮瓶中，濃縮至近干，加入二氯甲烷+甲醇（95+5）約3 mL，待凈化。

1.2.2.2凈化。

用約 4mL二氯甲烷+甲醇（95+5）預淋NH2固相萃取小柱，當溶劑液面到達柱吸附層表面時，立即將上述提取所得溶液轉移至NH2固相萃取小柱中，用7.5 mL二氯甲烷+甲醇（95+5）將濃縮瓶中的殘余物分3次洗入NH2固相萃取小柱，收集洗脫液于10 mL刻度試管中，氮氣吹干后用甲醇定容至5.00 mL，過0.22 μm有機濾膜于進樣小瓶中，待測。

1.2.3儀器色譜條件。

色譜柱：CAPCELL PAK C18柱（250 mm×3 mm，5 μm）；流動相：乙腈-水（體積比30∶70）；流速：0.7 mL/min；進樣體積：10.0 μL；檢測波長：254 nm；柱溫：40 ℃。

1.2.4方法的線性關系考察。用霜脲氰標準儲備液配制005、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00 mg/L 6個不同系列濃度的標樣，在“1.2.3”條件下進樣測定，以保留時間定性、峰面積定量，以霜脲氰標樣的峰面積為縱坐標（Y），質量濃度（mg/L）為橫坐標（X）進行線性回歸。

1.2.5添加回收率試驗。在馬鈴薯莖葉、塊莖及土壤試樣中分別添加0.1、0.5、2.0 mg/kg的霜脲氰，并設空白對照，分別重復5次，按“1.2.2”樣品前處理方法和“1.2.3”儀器色譜條件進行提取檢測，計算方法的回收率及變異系數(shù)。

2結果與分析

2.1方法的線性關系和靈敏度

以霜脲氰標樣的質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線（圖1），得到線性回歸方程為：Y=31 514X-16.723（r=0.999 8）。色譜見圖2。

靈敏度以3倍信噪比（S/N）所對應的標樣濃度來確定，霜脲氰的最低檢出濃度為6.0 μg/L，最低檢出量為0.06 ng。

2.2方法的準確度和精密度

由表1可知，霜脲氰在馬鈴薯莖葉中平均回收率為78.0%～104.4%，相對標準偏差為2.7%～3.4%；在馬鈴薯塊莖中平均回收率為82.9%～947%，相對標準偏差為1.1%～2.3%；在土壤中平均回收率為81.6%～91.8%，相對標準偏差為3.3%～5.4%，表明該方法的準確度較高，精密度良好，符合農藥殘留試驗準則所規(guī)定的農殘分析的要求[10]。霜脲氰在馬鈴薯莖葉、塊莖和土壤中的最低檢測濃度均為10 μg/kg，HPLC圖譜見圖3。

3結論

建立了馬鈴薯與土壤中霜脲氰殘留量的快速前處理方

法和液相色譜分析條件，該方法的準確度、精密度和靈敏度均較高，符合農藥殘留分析的要求。該法操作簡便快速，準確靈敏，有機溶劑消耗量相對較低，適合大批量樣品的快速處理，是一種較為實用的檢測方法。

參考文獻

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