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        丁香枝枯病病原菌的分離和測(cè)定

        2018-05-14 12:19:35楊小萌
        山西農(nóng)經(jīng) 2018年7期
        關(guān)鍵詞:測(cè)定

        楊小萌

        摘 要:我們對(duì)山西農(nóng)業(yè)大學(xué)校園內(nèi)的丁香進(jìn)行了抽樣調(diào)查。通過(guò)調(diào)查,發(fā)現(xiàn)丁香花的枝枯病病菌一般在枝梢上進(jìn)行侵染且發(fā)病率為30%?;疾〔糠峙c健康部分分界明顯,其上散生黑色小粒點(diǎn)。用剪刀將發(fā)生病害與健康部分的交界處剪取一小段。此類(lèi)病原菌在病部越冬,降雨的年份易發(fā)病。

        關(guān)鍵詞:丁香;抗病性;分離;測(cè)定

        文章編號(hào):1004-7026(2018)07-0073-02 中國(guó)圖書(shū)分類(lèi)號(hào):S435 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

        丁香學(xué)名Syringa oblate Lindl.木樨科丁香屬,落葉灌木或小喬木,高達(dá)5m,枝條粗壯無(wú)毛。葉廣卵型,通常寬大于長(zhǎng),寬5~10cm;先端銳尖,基部心型或截形,全緣。圓錐花序長(zhǎng)6~15cm;花冠白色或紫色,先端4裂,開(kāi)展;雄蕊生于花筒中部或中上部。蒴果長(zhǎng)圓形,頂端尖,平滑。花期4~5月,果期9月[1]。

        丁香的枝葉茂密,花美麗而芬芳,花期較早,是我國(guó)北方地區(qū)園林中最常用的花木之一。廣泛栽植與庭園、機(jī)關(guān)、居民區(qū)等處,常叢植于建筑物前、散置于園路兩旁或草坪之中景觀(guān)效果甚好[2]。

        丁香的抗病性較強(qiáng),常見(jiàn)的丁香病有花瓣斑病[3]、白粉病[4]、炭疽病[5]和枝枯病。我們對(duì)山西農(nóng)業(yè)大學(xué)校園內(nèi)的丁香枝枯病進(jìn)行了調(diào)查,病菌侵染后丁香形成枯枝,枯死段有黑褐色微突起小點(diǎn),感病枝與健康枝之間形成明顯的分界線(xiàn),感染部位以上全部枯死[6]。

        1 材料與方法

        1.1 樣品處理

        采集好標(biāo)本以后,制作PDA培養(yǎng)基[9]。 取七個(gè)無(wú)菌培養(yǎng)皿,分別標(biāo)上號(hào):酒精—水-升汞-無(wú)菌水1-無(wú)菌水2-無(wú)菌水3-做容器,并放入相應(yīng)的溶液。依次放入滅過(guò)菌的超凈工作臺(tái)中。

        (1)從采集的枝條標(biāo)本上將病害部分切下2mm的小段4節(jié)。

        (2)將病害部分和健康部分交界處切下2mm的8節(jié)。

        全程滅菌操作三次之后放入容器中。取三個(gè)培養(yǎng)皿,然后將標(biāo)本成對(duì)角線(xiàn)接種到平面培養(yǎng)基上,如圖1所示。完后將培養(yǎng)皿倒置。用特種鉛筆在培養(yǎng)皿背面做標(biāo)記DX-1。

        將病害部分和健康部分交界處切下的8小段用同樣的方法接種到另兩個(gè)培養(yǎng)基上 DX-2、DX-3。

        將DX-1、DX-2、DX-3置入生化培養(yǎng)箱中,蓋上報(bào)紙遮光,進(jìn)行培養(yǎng)菌落觀(guān)察,3d后長(zhǎng)出呈灰綠色絨毛狀菌落。一個(gè)星期后,三個(gè)培養(yǎng)基中的菌絲覆蓋了整個(gè)培養(yǎng)基,以下就要對(duì)其進(jìn)行純化,讓每一個(gè)培養(yǎng)基上只生長(zhǎng)一種菌落。通過(guò)培養(yǎng)對(duì)比,選取具有代表性的DX-2并將其純化。

        生長(zhǎng)量的測(cè)定。每天下午4點(diǎn)對(duì)每個(gè)培養(yǎng)皿中菌落的生長(zhǎng)量進(jìn)行測(cè)量以測(cè)定該種真菌的生長(zhǎng)速度。經(jīng)過(guò)測(cè)量計(jì)算,菌落每天的平均直徑從而可以看出菌落和生長(zhǎng)速度。如菌落生長(zhǎng)直徑圖表。

        1.2 病原菌的觀(guān)察與測(cè)量

        1.2.1 顯微標(biāo)本的制作。將白色菌落中灰黑色部分挑出一小塊放到載玻片上的colley試劑中,用解剖針撥勻。蓋上蓋玻片即準(zhǔn)備好了一個(gè)切片,標(biāo)為(1);同樣的方法,再做一個(gè)標(biāo)本,標(biāo)為(2)。然后在標(biāo)定了刻度的顯微鏡下觀(guān)察菌絲和孢子的性狀并測(cè)量孢子的大小。

        1.2.2 病原菌孢子的測(cè)量。經(jīng)過(guò)確定,052028號(hào)顯微鏡上,目鏡測(cè)微尺在10倍物鏡下刻度為6.5μm,40倍物鏡下刻度為1.6μm。經(jīng)過(guò)測(cè)量在40倍物鏡下測(cè)量的20個(gè)孢子的大小如下表:

        設(shè):X為每個(gè)孢子的長(zhǎng)度 Y為每個(gè)孢子的寬度

        病原菌孢子的長(zhǎng)與寬各自的平均值為:長(zhǎng)17.42μm 寬2.6μm

        病原菌菌絲的粗度的平均值為:4.20μm

        病原菌孢子的長(zhǎng)與寬各自的標(biāo)準(zhǔn)差:長(zhǎng)5.3μm 寬2.0μm

        病原菌菌絲的粗度的標(biāo)準(zhǔn)差:0.86μm

        病原菌孢子的長(zhǎng)與寬各自的標(biāo)準(zhǔn)誤:長(zhǎng)1.2μm 寬0.45μm

        病原菌菌絲的粗度的標(biāo)準(zhǔn)誤:0.26μm

        病原菌孢子的長(zhǎng)與寬各自的變異范圍:長(zhǎng)12.96~20μm 寬12.08~9.36μm

        病原菌菌絲的粗度的變異范圍:3.33μm~4.87μm

        孢子的大小為(12.96~20)μm×(12.08~9.36)μm

        2 菌種鑒定

        我們?cè)谳d玻片上觀(guān)察到的病原菌形態(tài)特征為:分生孢子梗淡欖褐色,分枝,頂端長(zhǎng)擴(kuò)大而具有多個(gè)孢子痕,形狀橢圓形、卵形,有橫隔膜,縱隔膜,孢子有喙或無(wú)喙[11]。根據(jù)《真菌鑒定手冊(cè)》記載,可以確定我們分離出來(lái)的病原菌屬細(xì)交鏈孢霉[Alternaria.tenuis Nees],隸屬半知菌亞門(mén),叢梗孢目,[Alternaria Nees ex Wallr]。此種菌就是引起枝枯病的病原菌[12]。

        結(jié)束語(yǔ)

        通過(guò)本次實(shí)驗(yàn),使我們對(duì)丁香枝枯病的病原菌有了初步了解。在生產(chǎn)實(shí)踐中,防治方法建議如下:

        (1)發(fā)現(xiàn)病枝及時(shí)剪除燒掉,防止傳播蔓延。

        (2)加強(qiáng)栽培管理,提高植株抗病能力,盡量避免各種機(jī)械創(chuàng)傷。剪口可用1%硫酸銅溶液消毒,再涂以1:1:160倍等量式波爾多液予以保護(hù)。

        (3)藥劑防治,休眠期選用波美3~5度石硫合劑噴灑,生長(zhǎng)期選用1:1:160倍等量式波爾多液、70%甲基托布津可濕性粉劑500~1000倍液等殺菌劑噴灑,并著重噴布枝干,預(yù)防病菌侵染。

        參考文獻(xiàn):

        [1]卓麗環(huán),陳龍清.園林樹(shù)木學(xué)[M].中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2003年11月.

        [2]金波.花卉資源原色圖譜[M].中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1999年9月.

        [3]徐志華.園林花卉病蟲(chóng)害圖監(jiān)[M].北京林業(yè)出版社,2006年1月.

        [4]張寶棣.園林花木病蟲(chóng)害診斷與防治[M].金盾出版社,2002年9月.

        [5]楊子琪,曹華國(guó).園林植物病蟲(chóng)害防治圖鑒[M].中國(guó)林業(yè)出版社,2002年1月.

        [6]岑炳沾,蘇星.景觀(guān)植物病蟲(chóng)害防治[M].廣東科技出版社,2003年1月.

        [7]顧鶴松.山西省地圖集[M].山西省測(cè)繪局,1995年.

        [8]郭書(shū)普.木本花卉病蟲(chóng)害防治原色圖鑒[M].安徽科技出版社,2003年6月.

        [9]項(xiàng)存悌.林病研究法[M].東北林業(yè)大學(xué)出版社,1991年.

        [10]普冠勤,毛建平.桑植枯菌核病病原菌的生物學(xué)特性研究[J].蠶業(yè)科學(xué),2002年28.

        [11]邵力平.真菌分類(lèi)學(xué)[M].中國(guó)林業(yè)出版社,1984年12月.

        [12]魏景超.真菌鑒定手冊(cè)[M].上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1979年9月.

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