程鏡霖
摘 要:農藥殘留快速檢測儀與氣相色譜法比較雖然只能做定性分析,但由于其操作簡單、成本較低、檢測速率遠遠高于氣相色譜法等優(yōu)點,而得到廣泛應用。同時此方法可對蔬菜和水果進行粗篩,從而保障人們食菜安全。本文主要介紹GDYN-106SD農藥殘毒快速檢測儀的原理及操作過程。
關鍵詞:農藥殘留;快速檢測
一、農藥快速檢測原理
如果蔬果中沒有農藥或者殘留量低,乙酰膽堿酶活性不被抑制[1]可與乙酰硫代膽堿水解成硫代膽堿和乙酸,其與二硫雙對硝基苯甲酸產生顯色反應,使溶液呈黃色。酶活性被抑制的程度即抑制率,就是通過顏色變化來體現(xiàn)的。我們檢測的就是這個黃色的變化,從而確定蔬果中農藥殘留情況。
二、農藥殘留快速檢測儀
采用吉大小天鵝GDYN-106SD農藥殘毒快速檢測儀,為測量波長在407~413nm之間的分光光度計,反應后的淺黃色溶液在410nm處有最大的吸收峰。
三、檢測試劑
使用上海瑞鑫農藥殘留試劑盒,生產批號2017-4-11,包含試劑如下:
提取液:pH為8的磷酸溶液,加入510ml蒸餾水。
酶液:膽堿酯酶,加入3.1ml提取液。
顯色劑:二硫雙對硝基苯甲酸,在棕色瓶中加入32ml提取液。
底物:乙酰硫代膽堿,加入3.1ml蒸餾水。
四、校準及空白測量
選擇校準菜單,按確認鍵。用移液器提取1.0ml提取液到比色瓶中,再用微量移液器取50ul酶液和50ul顯色劑到比色瓶中,蓋好瓶塞后搖勻,將比色瓶插入1號比色槽中放置3min,按↑鍵進行校準。按↓進行空白測量,當儀器顯示“請加試劑4”,取出校準后的比色瓶,加入50ul底物,蓋上瓶塞搖勻,將其放入1號比色槽內按確認鍵,倒計時3min,空白測量結束吸光度A1=0.042、A2=0.449,?A=0.407≧0.1。若?A<0.1說明酶活性不夠,需要配制新的酶液重新校準及空白測量。
五、實驗步驟
1、取樣:用取樣器分別扎取生菜、油麥菜和小白菜葉片1.0g于提取瓶中,將豆角、青茄子和蘋果切成1cm左右,稱取1.0g于提取瓶中。
2、浸提:在提取瓶中加入5ml提取液,超聲提取3min。
3、測量:分別取1ml提取液于6個連體比色瓶中,各加入50μl酶液與50μl顯色劑,37℃培養(yǎng)15min,取出比色瓶,各加入50μl底物進行測量,3min后顯示測量結果。一臺儀器每組可進行6個樣品檢測。
六、檢測結果的判定
1、初次檢測結果≦50%為合格樣品[2]。
2、檢測結果﹥50%的樣品,需要復檢2次以上,檢測結果﹥50%且重復率≧80%的樣品判定為不合格,重復率<80%判定為合格。
根據檢測結果判定,以上6個樣品的農藥殘留為合格。
參考文獻
[1]中華人民共和國農業(yè)行業(yè)標準.SY/T488-2001蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘毒快速檢測方法、
[2]中華人民共和國國家標準.GB/T5009.199.2003蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測、
(作者單位:遼寧省沈陽)