李艷軍, 溫旭杰,2, 代發(fā)文*, 高 來, 葉應建, 霍小東*
(1.北京大偉嘉生物技術股份有限公司,北京通州 101105;2.山西農業(yè)大學動物科技學院,山西太谷 030801)
近年來,大量研究表明,中草藥渣作為畜禽飼料原料,在畜禽日糧中應用獲得較好的飼喂效果,一方面可作為非常規(guī)飼料源,降低飼養(yǎng)成本,另一方面藥渣中存留一定活性物質,具有促生長、保健和抗應激作用(王向民,2008;耿春銀,2007)。 但中草藥渣在獺兔方面的研究報道較少。因此,本試驗在飼料中添加清瘟敗毒中草藥渣,研究其對熱應激條件下生長獺兔生產性能、血液生化指標和免疫力的影響,為進一步開發(fā)中草藥渣飼料資源提供理論依據(jù)。
1.1 試驗材料 淸瘟敗毒中草藥渣是制備清瘟敗毒口服液(由梔子 、黃連、牡丹皮、黃芩、赤芍、玄參、知母、連翹、桔梗、甘草、淡竹葉等組成)后的殘渣。經測定,藥渣中含粗蛋白質14.1%、粗脂肪1.7%、粗纖維15.8%、酸性洗滌纖維31.0%、中性洗滌纖維67.7%、鈣1.7%、磷0.3%。
1.2 試驗日糧 試驗日糧參照美國(NRC,1977)和獺兔營養(yǎng)標準(谷子林,2002),利用當?shù)刂饕暳显显O計飼料配方并壓制成Φ4.5×2.5 mm的顆粒。基礎日糧配方及營養(yǎng)水平見表1。
1.3 試驗動物及設計 試驗采用單因子試驗設計,選用 42 日齡體重相近[平均體重(650±50)g]、健康無病的生長兔80只,隨機分成4組(即:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四組),每組5個重復,每個重復4只。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組為試驗組,分別用1%、2%、3% 的清瘟敗毒中草藥渣等量替代基礎日糧中的麩皮。Ⅳ組為對照組,飼喂基礎日糧;預試期7 d,預試期結束后進行空腹稱重,經統(tǒng)計分析,差異不顯著 (P>0.05),正式期為42 d,自由飲水和采食。試驗結束前3 d天采集各組料樣,將每個重復3 d收集的糞便烘干混勻,粉碎,過40目篩備用。于試驗結束次日早晨空腹采血,每組隨機抽取3只,每只采血5 mL,3000 r/min離心10 min得血清,分裝到小離心管中,-20℃保存,待測。
表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)
1.4 試驗時間和地點 試驗于夏季高溫季節(jié)(2017年7月15日~9月3日)在河北保定俊英兔場進行,每天分別于 6∶00、14∶00 和 22∶00 測定兔舍環(huán)境溫度,其平均值為當日兔舍溫度。
1.5 指標測定 粗蛋白質(CP)采用凱氏定氮法;粗脂肪(EE)采用醚浸提法;酸性洗滌纖維(ADF)和中性洗滌纖維(NDF)采用 Van Soest(1963)方法;鈣(Ca)采用高錳酸鉀滴定法;磷(P)采用鉬黃比色法;尿素氮(BUN)、膽固醇(CHO)采用酶法;乳酸脫氫酶(LDH)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、堿性磷酸酶(ALP)采用酶動力學速率法;總蛋白(TP)采用雙縮脲法;白蛋白(ALB)采用溴甲酚綠法;三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)和皮質醇(Cortisol)采用放射免疫分析方法測定。
1.6 統(tǒng)計分析 采用SPSS(13.0)軟件進行ONEWAY ANOVA方差分析,用Duncan氏檢驗進行數(shù)據(jù)的多重比較。
2.1 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔生產性能的影響 由表2可知,1~2周,采食量方面,Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組的分別高于Ⅳ組0.03%、0.01%、0.04%,差異均不顯著(P>0.05);在日增重方面,Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組的分別高于Ⅳ組0.10%、0.09%、0.02%,差異均不顯著(P>0.05);在料重比方面,Ⅰ組和Ⅱ組低于Ⅳ組0.07%、0.08% ,Ⅲ組高于Ⅳ組0.02%,差異均不顯著(P > 0.05)。
3~4周,采食量方面,Ⅰ組和Ⅱ組分別高于Ⅳ組 0.01%、0.02% ,差異均不顯著(P>0.05);在日增重方面,Ⅱ組高于Ⅳ組0.03%,差異不顯著(P>0.05);在料重比方面,Ⅰ組高于Ⅳ組0.01%,差異不顯著(P>0.05)。
5~6周,采食量方面,Ⅱ組高于Ⅳ組0.02%,差異不顯著(P>0.05);在日增重方面,Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組的分別高于Ⅳ組0.02%、0.09%、0.05%,差異均不顯著(P>0.05);在料重比方面,Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組分別低于Ⅳ組0.01%、0.06%、0.05%,差異均不顯著(P > 0.05)。
全期,采食量方面,Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組分別高于Ⅳ組0.01%、0.02%、0.01%,差異均不顯著 (P>0.05);在日增重方面,Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組的分別高于Ⅳ組 0.04%(P > 0.05)、0.07%(P < 0.05)、0.02%(P>0.05);在料重比方面,Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組低于Ⅳ組0.03%、0.05%、0.02% ,差異均不顯著(P > 0.05)。
2.2 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔血液生化指標的影響 由表3可見,Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組與Ⅳ組相比,CHO 分別降低了 19.62%、22.43%、33.64%,各組間差異不顯著 (P>0.05);BUN分別降低了9.82%、10.50%16.37%,各組間差異不顯著 (P>0.05);CK 分別降低了 11.66%、11.64%、12.00%,Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組與Ⅳ組相比差異顯著(P<0.05);隨著清瘟敗毒中草藥渣量的增加,血清中LDH、ALP、AST和ALT分別呈現(xiàn)降低趨勢。LDP分別降低了 7.05%、1.39%、20.86%;ALP分別降低了2.48%、5.58%、24.28%;AST分別降低了 3.23%、5.38%、13.50%;ALT分別降低了 17.87% 、20.60%、33.80%,各組間差異均不顯著(P > 0.05)。與Ⅳ相比,TP分別提高了0.32%、0.76%、5.58%,ALB趨于穩(wěn)定,球蛋白的含量表現(xiàn)為先降低后增高的趨勢,Ⅰ組降低了2.63%,Ⅱ組、Ⅲ組分別增高了 0.57%、10.80%,差異均不顯著(P > 0.05),白球比例表現(xiàn)為先增高后降低趨勢,Ⅰ組、Ⅱ組分別增高了5.88%、3.14%,Ⅲ組降低了8.24%,各組間差異不顯著(P > 0.05)。
表2 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔生產性能的影響
表3 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔血液生化指標的影響
2.3 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔免疫指標的影響 表4顯示,Ⅱ、Ⅲ組lgA含量比Ⅳ組提高了9.00%、18.01%,各組間差異均不顯著(P>0.05);lgM含量分別比對照組提高了1.47%、2.35%、5.28%,各組間差異不顯著(P>0.05);lgG含量分別提高了12.11%、13.15%、14.53%。差異均顯著(P<0.05)。添加清瘟敗毒中草藥渣,提高了血液中l(wèi)gG含量,表明添加清瘟敗毒中草藥渣有增強機體免疫力的作用。
表4 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔免疫指標的影響g/L
2.4 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔T3、T4、皮質醇的影響 表5顯示,Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組與Ⅳ組相比,T3含量分別提高了 28.13%(P > 0.05)、30.47%(P >0.05)、48.44%(P < 0.05);T4含量分別提高了5.96%、7.24%、13.53%,各組間差異不顯著 (P>0.05)。Ⅰ、Ⅱ組和Ⅲ組與Ⅳ組相比皮質醇含量分別降低了 13.37%(P > 0.05)、44.01%(P < 0.05)、50.77%(P<0.05)。表明添加清瘟敗毒中草藥渣,有提高血清中T3、T4組的趨勢,其中Ⅲ組差異達到顯著水平(P<0.05);而皮質醇含量有明顯的降低趨勢,其中Ⅱ組和Ⅲ組達到差異顯著水平(P<0.05),表明添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔有抗熱應激作用。
表5 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔 T3、T4、皮質醇的影響ng/mL
3.1 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔生產性能的影響 試驗期間,兔舍最高平均溫度為32℃,最低平均溫度為28℃,平均溫度為30℃。熱應激時兔采食中樞的興奮受到抑制,維持需要的能量降低,采食量下降(宋智娟,2006),導致兔的生產性能降低。藥渣含有的活性成分具有解肌清熱、涼血止血、生津解毒、清熱瀉火等作用。全期,Ⅱ組日增重達到了差異顯著水平(P<0.05)。表明添加清瘟敗毒中草藥渣能有效地緩解生長兔熱應激,提高生長兔生產性能的作用。
3.2 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔血液生化指標的影響 血液生化指標是衡量兔生理健康狀況的重要指標之一,對于科學研究有重要的意義。本試驗獺兔血清中CHO有一定程度的降低,表明藥渣具有降低CHO的作用。BUN是衡量腎功能主要指標,也是衡量動物對蛋白質利用效率的指標。當腎功能損害時,BUN的濃度升高。本試驗中血清中BUN的濃度均有不同程度的下降,表明清瘟敗毒中草藥渣不會造成腎損害,同時對于提高蛋白質的利用率有一定作用。CK是熱應激的重要指標,試驗組血清中CK有明顯的下降趨勢 (P<0.05),表明添加清瘟敗毒中草藥渣能有效的緩解生長兔的熱應激作用。各試驗組中ALP(P>0.05)、LDH(P > 0.05)、AST(P > 0.05)、ALT(P > 0.05)含量均有不同程度的降低,表明清瘟敗毒中草藥渣能有效的改善獺兔的心臟、肝臟、腎臟系統(tǒng)。TP、球蛋白、ALB的含量與機體蛋白質的吸收和代謝狀況有關,同時也可反映機體的免疫水平。ALB具有參與物質轉運、維持血漿滲透壓、合成組織蛋白的作用。血清球蛋白是抗體蛋白,可參與機體的免疫。本試驗中獺兔血清中TP、ALB、球蛋白含量雖差異不顯著(P>0.05),但有一定程度的提高,表明清瘟敗毒中草藥渣對生長兔有效利用體內蛋白質,加強蛋白質的沉積,維持機體免疫機能有一定的作用。
3.3 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔免疫指標的影響 血清中的IgA、IgM和IgG是機體主要免疫球蛋白,具有抗菌、抗病毒、抗毒素作用(吳德峰,2006),熱應激時,機體免疫抑制與抗體水平下降(Franci,1996)。 試驗組 IgA、IgM 和 IgG 均有不同程度的提高,其中IgG含量達到差異顯著水平(P<0.05)。清瘟敗毒中草藥渣含有生物堿、多糖、鞣質、甙類等生物活性物質,能夠加速生長兔新陳代謝、刺激造血機能、促進紅細胞再生,從而對機體的免疫器官和免疫細胞進行調節(jié),提高機體的免疫力。
3.4 添加清瘟敗毒中草藥渣對生長兔T3、T4、皮質醇的影響 生長兔熱應激時,可促進皮質醇的分泌,抑制甲狀腺素分泌。由于皮質醇能加速機體分解反應,抑制蛋白質合成,導致生產性能降低。試驗組中T3含量有明顯的提高,其中Ⅲ組中T3含量達到差異顯著水平(P<0.05);試驗組中皮質醇含量有明顯的降低,其中Ⅱ組和Ⅲ組中皮質醇含量達到差異顯著水平(P<0.05)。表明添加清瘟敗毒中草藥渣,能降低血清中皮質醇含量,提高血清中T3、T4含量,有效地緩解生長兔熱應激。
本試驗結果表明,日糧中添加清瘟敗毒中草藥渣,能提高熱應激條件下生長兔的生產性能和機體免疫力,并建議最適添加量為2%~3%。
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