張志新，王　薇，何法霖，鐘　堃，袁　帥，劉佳麗，杜雨軒，王治國(guó)

(北京醫(yī)院 國(guó)家老年醫(yī)學(xué)中心 衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心/北京市臨床檢驗(yàn)工程技術(shù)研究中心，北京　100730)

珠蛋白生成障礙性貧血也稱地中海貧血，是由于遺傳基因缺陷導(dǎo)致血紅蛋白中至少一種珠蛋白合成缺乏或不足，而引起的貧血或病理狀態(tài)。本病高發(fā)于地中海沿岸和東南亞各國(guó)，在我國(guó)多分布于廣東、廣西、海南、四川等省區(qū)[1]。目前，基因檢測(cè)是診斷珠蛋白生成障礙性貧血的最可靠方法，但由于診斷的實(shí)驗(yàn)技術(shù)要求高、操作繁瑣、價(jià)格昂貴且不易進(jìn)行有效的質(zhì)量控制，不適合于大規(guī)模的人群篩查。而血紅蛋白電泳測(cè)試具有較高的應(yīng)用價(jià)值，能夠?yàn)榕R床診斷提供有力依據(jù)[2]，血紅蛋白A2(HbA2)和血紅蛋白F(HbF)的檢測(cè)分析，在珠蛋白生成障礙性貧血的篩查和診斷中發(fā)揮了重要作用。本文對(duì)我國(guó)HbA2和HbF檢測(cè)項(xiàng)目的室內(nèi)質(zhì)控(IQC)變異系數(shù)(CV)進(jìn)行了分析，了解我國(guó)實(shí)驗(yàn)室HbA2和HbF檢測(cè)精密度現(xiàn)狀。

1　材料和方法

1.1數(shù)據(jù)來源收集2014～2017年參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心HbA2和HbF室間質(zhì)量評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室4月份的室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果。實(shí)驗(yàn)室通過www.clinet.com.cn網(wǎng)站的室內(nèi)質(zhì)控信息界面上報(bào)，內(nèi)容主要包括：兩個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目質(zhì)控物生產(chǎn)廠家、質(zhì)控物批號(hào)、質(zhì)控規(guī)則、質(zhì)控結(jié)果個(gè)數(shù)、當(dāng)月在控變異系數(shù)、累積在控變異系數(shù)、實(shí)驗(yàn)室使用的方法、儀器、試劑等相關(guān)數(shù)據(jù)。

1.2方法選取由Westgard提出的檢測(cè)系統(tǒng)的允許不精密度(CV)應(yīng)小于CLIA’88(美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室修正法案)臨床實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證計(jì)劃評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的三分之一或四分之一[3]，即<1/3TEa(%)，1/4TEa(%)。根據(jù)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[4]，HbA2和HbF允許總誤差(TEa)為20%，故室內(nèi)允許CV為：6.67%(1/3TEa)，5%(1/4TEa)。按照不同的允許不精密度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算2個(gè)項(xiàng)目的通過率(通過率=當(dāng)月在控CV或累積在控CV滿足標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室數(shù)/回報(bào)實(shí)驗(yàn)室總數(shù))。對(duì)2017年室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，按照實(shí)驗(yàn)室使用的儀器不同進(jìn)行分組，分別計(jì)算2017年HbA2和HbF不同儀器組在兩種標(biāo)準(zhǔn)下的變異系數(shù)通過率。

2　結(jié)果

2.1CV通過率的計(jì)算2014～2017年回報(bào)實(shí)驗(yàn)室數(shù)逐年增多，從4年的室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果可以看出，HbA2項(xiàng)目84%以上的實(shí)驗(yàn)室精密度都能達(dá)1/3TEa的標(biāo)準(zhǔn)，達(dá)到1/4TEa標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室比例略有降低，當(dāng)月在控CV為77.78%～84.47%，累積在控CV為70.83%～81.33%；HbF項(xiàng)目結(jié)果除2015年外當(dāng)月和累積在控CV80%以上的實(shí)驗(yàn)室能達(dá)到1/3TEa標(biāo)準(zhǔn)，達(dá)到1/4TEa標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室比例分布在68.42%～85.07%，2017年CV通過率明顯高于2014和2015年，2015年CV通過率較低。以1/3TEa和1/4TEa為標(biāo)準(zhǔn)兩個(gè)項(xiàng)目當(dāng)月和累積CV通過率見表1。

表1

兩個(gè)項(xiàng)目當(dāng)月和累積CV<1/3TEa和1/4TEa的實(shí)驗(yàn)室所占比例(%)

2.2按儀器分組計(jì)算2017年實(shí)驗(yàn)室CV通過率2017年HbA2和HbF分別有176和67家實(shí)驗(yàn)室回報(bào)結(jié)果，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室使用的儀器不同進(jìn)行分組，HbA2項(xiàng)目分為4個(gè)組(共161家)，HbF分為3個(gè)組(共59家)，分別計(jì)算2017年HbA2和HbF不同儀器組在兩種標(biāo)準(zhǔn)下的CV通過率，見表2。

表2

2017年HbA2和HbF不同儀器組在兩種標(biāo)準(zhǔn)下的CV通過率(%)

兩個(gè)項(xiàng)目使用最多的儀器均是sebia capillarys 2。在sebia capillarys 2分組中，兩個(gè)項(xiàng)目的當(dāng)月和累積在控CV兩種標(biāo)準(zhǔn)下通過率均達(dá)85%以上。其次，兩個(gè)項(xiàng)目使用較多的儀器是全自動(dòng)血紅蛋白分析儀伯樂VariantⅡ，均有23家實(shí)驗(yàn)室，HbA2此分組中CV通過率達(dá)85%以上，HbF此分組中CV通過率達(dá)90%以上，此分組中HbF項(xiàng)目CV通過率較HbA2項(xiàng)目高。兩個(gè)項(xiàng)目sebia capillarys 2儀器組和全自動(dòng)血紅蛋白分析儀伯樂VariantⅡ儀器組在兩種標(biāo)準(zhǔn)下的精密度較好。其它儀器使用實(shí)驗(yàn)室數(shù)相對(duì)較少。

3討論本研究數(shù)據(jù)顯示2014～2017年開展HbA2和HbF室內(nèi)質(zhì)控的實(shí)驗(yàn)室逐年增多，HbA2的室內(nèi)質(zhì)控開展情況明顯好于HbF。HbF參與實(shí)驗(yàn)室數(shù)量不多，可能會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。研究表明，兩個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的變異系數(shù)滿足允許不精密度要求的實(shí)驗(yàn)室所占比例不同，兩個(gè)項(xiàng)目中80%以上的實(shí)驗(yàn)室能達(dá)到1/3TEa標(biāo)準(zhǔn)(除HbF2015年結(jié)果外)，但是達(dá)到1/4TEa標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室比例有所降低，說明實(shí)驗(yàn)室的精密度水平有待提高。室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的變異系數(shù)大小代表著實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng)的不精密度水平，只有測(cè)量系統(tǒng)的精密度好才能獲得準(zhǔn)確可靠的結(jié)果[5]，影響實(shí)驗(yàn)室變異系數(shù)的因素很多，1/3TEa和1/4TEa標(biāo)準(zhǔn)只位于質(zhì)量規(guī)范層級(jí)模型的第4級(jí)，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)從“人員、機(jī)器、試劑、方法、環(huán)節(jié)”等多方面查找原因并持續(xù)改進(jìn)，以提高檢測(cè)項(xiàng)目精密度水平，提升檢測(cè)質(zhì)量，從而達(dá)到1/4TEa標(biāo)準(zhǔn)乃至更高的質(zhì)量規(guī)范。

2017年室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)顯示，實(shí)驗(yàn)室使用的儀器主要有：sebia capillarys 2，全自動(dòng)血紅蛋白分析儀伯樂VariantⅡ，美國(guó)海倫娜電泳儀spife3000，sebia minicap 4種，還有幾種儀器(Interlab G26，sebia hydrasys，伯樂D-10血紅蛋白分析儀，美國(guó)helena-V8全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀等)因使用實(shí)驗(yàn)室數(shù)較少(<5家)，故未進(jìn)行分組計(jì)算其CV通過率。兩個(gè)項(xiàng)目使用最多的儀器是sebia capillarys 2，其CV通過率較高，在兩種評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)下表現(xiàn)出較好的精密度。法國(guó)sebia公司capillarys 2全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀對(duì)Hb區(qū)帶分辨及定量準(zhǔn)確度高，可為Hb病(包括珠蛋白生成障礙性貧血及異常Hb病)的初篩提供快速的診斷依據(jù)[6]，此儀器的方法學(xué)原理是毛細(xì)管電泳法，應(yīng)用毛細(xì)管電泳開展珠蛋白生成障礙性貧血的篩查，對(duì)預(yù)防和降低重型珠蛋白生成障礙性貧血患兒出生具有重要意義[7]。精密度是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)，良好的精密度水平是獲得準(zhǔn)確可靠結(jié)果的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)室開展珠蛋白生成障礙性貧血血紅蛋白檢測(cè)時(shí)應(yīng)綜合考慮各種因素，選擇適宜的檢測(cè)系統(tǒng)，并對(duì)檢測(cè)儀器精密度、準(zhǔn)確度等進(jìn)行驗(yàn)證，保證檢測(cè)質(zhì)量。

綜上，目前我國(guó)實(shí)驗(yàn)室HbA2和HbF檢測(cè)的不精密度水平需進(jìn)一步提高，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)繼續(xù)加強(qiáng)室內(nèi)質(zhì)量控制，通過對(duì)當(dāng)月和累積質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)CV進(jìn)行監(jiān)測(cè)，將其與允許不精密度水平比較，評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng)是否滿足規(guī)定的質(zhì)量要求，為進(jìn)一步提高檢測(cè)質(zhì)量提供方向。

參考文獻(xiàn)：

[1]陳熙，肖克林，羅茗月，等．地中海貧血實(shí)驗(yàn)室篩查指標(biāo)評(píng)價(jià)[J]．分子診斷與治療雜志，2016，8(4)：242-245，288．

Chen X，Xiao KL，Luo MY，et al．Evaluation of laboratory index for screening thalassemia[J]．J Mol Diagn Ther，2016，8(4)：242-245，288．

[2]盧燦娣，魏權(quán)，陳麗娟，等．血紅蛋白電泳在地中海貧血篩查中的應(yīng)用價(jià)值研究[J]．心血管病防治知識(shí)，2015(10)：142-143．

Lu CD，Wei Q，Chen LJ，et al．Hemoglobin electrophoresis in the Mediterranean anemia screening the application value of research[J]．Journal of Cardiovascular Disease Prevention，2015(10)：142-143．

[3]王薇，鐘堃，何法霖，等．全國(guó)新生兒遺傳代謝病篩查室內(nèi)質(zhì)量控制結(jié)果分析[J]．中國(guó)兒童保健雜志，2014，22(1)：106-109．

Wang W，Zhong K，He FL，et al．Analysis of results of internal quality control for neonatal screening-phenylalanine and thyrotropin-stimulating hormone[J]．Chinese Journal of Child Health Care，2014，22(1)：106-109．

[4]衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心．衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[EB/OL]．[2016．7]．http：//www．clinet．com．cn/plan/?type=detail&id=5322．

National Center for Clinical Laboratoies ．National Center for Clinical Laboratoies External Quality Assessment Standards[EB/OL][2016．7]．http：//www．clinet．com．cn/plan/?type=detail&id=5322．

[5]費(fèi)陽，王薇，何法霖，等．尿液定量生化檢驗(yàn)項(xiàng)目室內(nèi)質(zhì)量控制變異系數(shù)調(diào)查與分析[J]．現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，31(6)：154-157．

Fei Y，Wang W，He FL，et al．Investigation and analysis of the coefficient of variation of internal quality control of quantitative urine chemistry[J]．J Mod Lab Med，2016，31(6)：154-157．

[6]劉基鐸，何惠，袁晴，等．全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀在珠蛋白生成障礙性貧血篩查中的應(yīng)用[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10(14)：1829-1831．

Liu JD，He H，Yuan Q，et al．Application of automatic capillary electrophoresls in screening for thalassemia[J]．Lab Med Clin，2013，10(14)：1829-1831．

[7]鄧國(guó)明．毛細(xì)管電泳在地中海貧血篩查中的應(yīng)用[J]．華夏醫(yī)學(xué)，2013，26(6)：1121-1124．

Deng GM．Application of capillary electrophoresis to the screening of thalassemia[J]．Acta Medicinae Sinica，2013，26(6)：1121-1124．