董璐艷，王菊英，蘇　明，魏　軍，3，李　鋒，3

(1.寧夏醫(yī)科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)系，銀川　750003； 2.寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院醫(yī)學(xué)實驗中心，銀川　750004； 3.寧夏臨床病原微生物重點實驗室，銀川　750004)

丙型病毒性肝炎(丙肝)，是由丙型肝炎病毒(HCV)引起的一類傳染病，極大的危害人們的健康和生命。HCV主要侵犯肝臟，導(dǎo)致慢性肝炎，其中部分患者可發(fā)展為肝硬化，甚至肝癌[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，目前全球約有1.85億HCV感染者，感染率為2.8%，并且每年有約35萬因HCV感染導(dǎo)致死亡的病例[2，3]。在我國多地發(fā)生丙肝疫情的暴發(fā)，發(fā)病率和死亡率有越來越高的趨勢[4]。本研究旨在將2011～2015年寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院門診及住院患者的所有血清抗-HCV結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，探討化學(xué)發(fā)光免疫分析法對丙肝篩查的適用性，了解寧夏地區(qū)丙肝的感染現(xiàn)狀，為預(yù)防、診斷和控制丙肝提供科學(xué)思路。

1　材料和方法

1.1研究對象研究對象均來自寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院2011年1月～2015年12月的門診及住院患者，涵蓋了寧夏所有區(qū)縣人群，共計209 889例。其中男性106 169例，女性103 720例；0～10歲20 562人、11～20歲9 204人、21～30歲29 049人、31～40歲31 345人、41～50歲39 275人、51～60歲34 309人、61～70歲29 155人、70歲以上16 990人。同一患者的重復(fù)檢測結(jié)果不再計入。

1.2試劑和儀器試劑包括Vitros抗-HCV試劑盒，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)試劑盒，凱杰生物工程有限公司HCV-RNA試劑盒。儀器包括Vitros 3600全自動免疫分析儀，SIEMENS ADVIA2400全自動生化分析儀，ABI PRISM 7500型核酸擴(kuò)增熒光檢測儀。

1.3方法

1.3.1實驗方法：采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法(CIA)檢測抗-HCV，速率法檢測ALT，熒光定量RT-PCR法檢測HCV-RNA。

1.3.2病例分組及判斷標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)美國《2003CDC實驗室丙肝抗體檢測及結(jié)果報告指南》將抗-HCV檢測結(jié)果S/CO值分為弱陽性(0.9≤S/CO值≤8.0)和陽性(S/CO>8.0)兩組。依照《丙型肝炎防治指南》(2015更新版)[5]臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，據(jù)病人“流行病學(xué)史+臨床表現(xiàn)+實驗室檢查(如ALT，HCV-RNA指標(biāo))”等，進(jìn)行“急性丙肝”的確診；據(jù)病人“流行病學(xué)史、抗-HCV，HCV-RNA，肝組織病理學(xué)檢查”等，進(jìn)行“慢性丙肝”的確診。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，不同性別組間、年齡組別間結(jié)果差異比較采用卡方檢驗，丙肝感染陽性率的年齡趨勢分析采用回歸分析的曲線估計作圖，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1HCV感染狀況209 889例患者中抗-HCV結(jié)果有反應(yīng)性的為2 829例(占1.35%)，其中弱陽性組為1 268例(占研究人群的0.60%)，陽性組為1 561例(占研究人群的0.74%)。最終1 549例被確診為丙肝(感染率為0.74%)，占抗-HCV有反應(yīng)性總病例的54.75%。其中急性丙肝24例(占1.55%)，慢性丙肝1 525例(占98.45%)。在S/CO值>8.0組，1 523例被確診患丙肝，確診率為97.57%；在0.9≤S/CO值≤8.0組，26例被確診為丙肝，確診率為1.68%，且其確診率隨S/CO值的增大而升高。

2.2感染HCV的人群分布特征確診感染HCV的人群中，男性807例，女性742例，男女丙肝感染率分別為0.38%和0.35%，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.432，P=0.231)。按年齡分組，0～10，11～20及>60歲組患者丙肝陽性率低，21～60歲年齡段患者丙肝陽性率較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=254.901，P<0.01)，見表1。將丙肝陽性率隨年齡變化作趨勢分析顯示，10歲以下兒童丙肝陽性率最低，隨年齡增加逐步上升，31～40歲年齡段陽性率最高，后隨年齡增加逐步降低，見表1，圖1。各科室均有患者分布，肝病門診最多，共575例(占37.12%)，其次為內(nèi)科科室共256例(占16.53%)，外科科室共196例(占12.65%)，感染科共141例(占9.10%)，婦產(chǎn)科共91例(占5.87%)，腫瘤科共71例(占4.58%)，兒科共31例(占2.00%)，其他科室共188例(占12.14%)。

表1

感染HCV人群不同年齡組間差異比較

圖1　丙肝感染陽性率隨年齡變化趨勢圖

2.3抗-HCV假陽性的人群分布特征最終1 230例抗HCV有反應(yīng)性的病人被確診未感染丙肝，仍有50例病人因為病史資料相關(guān)實驗室檢測結(jié)果等缺失未確診是否患有丙肝。將該人群按年齡分組，0～10歲年齡組抗-HCV假陽性率最高(約占該年齡段抗-HCV有反應(yīng)標(biāo)本的83.33%)，隨年齡增加假陽性率逐漸降低，31～40歲年齡組最低，40歲后隨年齡增加假陽性率逐漸增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=153.606，P<0.01)，見表2。比較該組患者的就診科室分布，分布最多的科室為產(chǎn)科，共113例(占9.1%)；其次為腫瘤科，共107例(占8.70%)；再次為兒科，共80例(占6.50%)；口腔頜面外科，共40例(占3.25%)。

表2

抗-HCV假陽性人群年齡差異比較

3討論丙肝大多起病隱匿、癥狀不明顯，不易引起大家注意，但其發(fā)展為慢性肝炎的比例很高[6]。2006年對我國31個省160個疾病監(jiān)測點的1～59歲常住人群約8萬人份血清標(biāo)本檢測結(jié)果顯示，我國1～59歲人群組丙肝感染率為0.43%。該研究結(jié)果提示寧夏地區(qū)丙肝感染率約較全國檢測稍偏高。分析其原因可能是前者選取我國31個省的常住人群為研究對象，而該調(diào)查研究選取寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院的患病人群，從而導(dǎo)致其丙肝感染率統(tǒng)計結(jié)果比普通人群高。要注意加強對門診及住院患者丙肝的篩查，做到早診斷、早治療。

該地區(qū)確診患丙肝的人群中，男女丙肝的感染率無明顯差異。其高發(fā)年齡段與蔣慶等[7]人報道基本相符，醫(yī)院內(nèi)各科室均有丙肝患者分布。2014年中國《丙型病毒性肝炎篩查及管理》[8]衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中明確定義：有醫(yī)源性暴露史(包括手術(shù)、透析、不潔口腔診療操作等)、準(zhǔn)備進(jìn)行特殊或醫(yī)療侵入性操作的人群(如輸血或應(yīng)用血制品者、接受各種內(nèi)鏡檢查者、各種有創(chuàng)導(dǎo)管及其他有創(chuàng)診療者等)是需要丙肝篩查的高危人群，基本涵蓋了醫(yī)院各科室人群。因此，我們既要加強對高發(fā)年齡段人群丙肝的篩查，又要重視加強院內(nèi)感染的預(yù)防和控制。

采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測抗-HCV，若結(jié)果為弱陽性時，其假陽性率極高。本研究發(fā)現(xiàn)，兒童及老年人的假陽性率比例高，而中年患者假陽性率低。婦產(chǎn)科、腫瘤科、兒科及口腔頜面外科的患者丙肝假陽性率相對其他科室患者較高。分析原因可能為：①存在其他IgG抗體的干擾，如：兒童，尤其是6月齡內(nèi)母乳喂養(yǎng)的嬰兒，其體內(nèi)含有來自母親乳汁的IgG抗體；老年人易并發(fā)風(fēng)濕類疾病，ASO，RF，ANA 等都會導(dǎo)致抗-HCV假陽性。②口腔頜面外科的患者有相當(dāng)部分病人為非綜合征型唇腭裂患兒，據(jù)王菊英等[9]人的報道，引起該人群出現(xiàn)假陽性的原因尚不清楚，有可能因為其代謝產(chǎn)物與 HCV抗原存在相似的表位，刺激機體產(chǎn)生的抗體與試劑HCV抗原發(fā)生了交叉反應(yīng)，抑或是這些異常蛋白質(zhì)干擾了CIA反應(yīng)。③產(chǎn)科大部分患者為孕婦，關(guān)于該人群及腫瘤病人產(chǎn)生抗-HCV假陽性原因的研究很少，這些患者體內(nèi)代謝產(chǎn)物與正常人相比發(fā)生明顯改變，不排除存在一些復(fù)雜抗體的干擾，但原因尚待進(jìn)一步確證。

應(yīng)用RT-PCR方法檢測HCV-RNA可以縮短檢測窗口期，因此已成為HCV感染診斷、療效監(jiān)測及血液篩查的重要手段[10]。但HCV-RNA檢查對實驗室及操作人員的要求很高，很多實驗室達(dá)不到開展分子診斷實驗室的資質(zhì)。重組免疫結(jié)合試驗(RIBA)曾被推薦為檢測丙肝的確證實驗，但其成本高、且仍有少部分病人不能完全確診。因此化學(xué)發(fā)光免疫分析法更適合對丙肝的初步篩查，可用前兩種方法對丙肝可疑患者進(jìn)行輔助確診。從對診斷丙肝的靈敏度、特異度和成本考慮，采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法均可滿足臨床對丙肝初篩的需要。但采用CIA法檢測抗-HCV抗體，當(dāng)0.9≤S/CO值≤8.0時，雖然對丙肝感染有一定的診斷價值，鑒于其假陽性率很高，對于該部分患者的結(jié)果報告我們要慎重。Home[11]曾提出，若檢測抗-HCV為反應(yīng)性，建議進(jìn)一步檢測HCV-RNA，若HCV-RNA為陽性表明存在丙肝現(xiàn)癥感染，要采取治療措施清除病毒；若為陰性，考慮為非現(xiàn)癥感染，建議采用其他實驗進(jìn)一步補充確認(rèn)(如：為解決生物學(xué)假陽性的HCV感染問題，可考慮另一種HCV抗體檢測方法進(jìn)行檢測，如果檢測者被懷疑在過去6個月內(nèi)患有HCV感染或有臨床證據(jù)表明有HCV感染或如果對測試樣品的處理或存儲有疑問，可重復(fù)HCV-RNA檢測)。因此為減少誤診率的發(fā)生，我們可以在報告單上添加備注，建議患者進(jìn)行HCV-RNA或RIBA等補充實驗，或建議其1～3個月后進(jìn)行抗-HCV復(fù)檢。綜上，我們應(yīng)不斷完善對丙肝的篩查和監(jiān)測體系，為丙肝的早期診斷、療效判斷、預(yù)后評估提供依據(jù)[12]。

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