龐 靜，李 婭，景躍波，趙永紅，師春娟

(云南省林業(yè)科學(xué)院，云南省森林植物培育與開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/國家林業(yè)局云南珍稀瀕特森林植物保護(hù)和繁育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南昆明 650201)

金線蓮[Anoectochilusroxburghii(Wall.)Lindl]為蘭科(Orchidaceae)開唇蘭屬(Anoectochilus)多年生草本植物，別名花葉開唇蘭、金絲草、金線蘭等，是一種珍稀中草藥，民間稱之為“藥王”[1]。金線蓮全草均可入藥，其性平味甘，主要化學(xué)成分為多糖、黃酮、揮發(fā)油、三萜、甾體、氨基酸及其配糖體類等，具有降血糖、抗高血壓、保肝、抗HBV等藥理活性[2-3]。

金線蓮喜陰涼、潮濕、弱光的生境，主要生長在常綠闊葉林下或溝谷陰濕地帶，主要分布于中國、日本、斯里蘭卡、印度和尼泊爾等國[4]。我國西南、東南各省均有分布，云南省主要分布在西雙版納、普洱、德宏、文山、紅河等熱帶和亞熱帶地區(qū)[5-6]。金線蓮具有極高的藥用價(jià)值和觀賞價(jià)值，但自然繁殖率低，自然數(shù)量極稀少。由于近年來人為大量的掠奪性采挖和對其生境的破壞，金線蓮野生自然資源趨于枯竭。為適時(shí)保護(hù)和更好地利用金線蓮珍稀植物資源，現(xiàn)已利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)對金線蓮進(jìn)行快速繁殖和人工培育[7-8]。不同種源和栽培類型的金線蓮在形態(tài)學(xué)性狀、活性成分含量、產(chǎn)量和對環(huán)境的適應(yīng)能力都有著明顯的差異[9-13]。金線蓮人工栽培中，種質(zhì)材料是影響其產(chǎn)量和品質(zhì)的主要因素之一，其選取合適與否直接關(guān)系到栽培的成效。筆者采用生物有機(jī)基質(zhì)林下栽培法，比較云南省3種金線蓮主要栽培品種人工組培苗在西雙版納州的生長狀況和主要藥用成分的不同，為該省金線蓮生態(tài)種植提供技術(shù)參考和理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)區(qū)概況試驗(yàn)點(diǎn)設(shè)于云南西雙版納天豐農(nóng)林有限公司金線蓮種植基地。云南西雙版納位于北回歸線以南的熱帶北部邊緣，平均海拔1 200 m，全年降雨量在1 200～1 900 mm，相對濕度在80%以上，年平均溫度在21.0 ℃，極端最高氣溫達(dá)41.1 ℃，極端最低氣溫2.7 ℃，全年無霜雪，屬熱帶和亞熱帶季風(fēng)性濕潤氣候，特殊的地理氣候和生態(tài)環(huán)境適宜珍稀植物金線蓮對生長環(huán)境的獨(dú)特需求。

1.2材料與處理方法試驗(yàn)材料選用莖段粗壯、長勢良好、株高6～7 cm、具有2～3片葉的滇越金線蘭、福建尖葉金線蓮和福建圓葉金線蓮組培苗。植物材料分別由云南省森林植物資源培育和開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、福建大地金華生物科技有限公司提供。

栽培基質(zhì)使用K4基質(zhì)，由云南省林業(yè)科學(xué)院提供。該基質(zhì)材料是一種有機(jī)生態(tài)型無土栽培基質(zhì)，是采用當(dāng)?shù)乜Х燃庸なＳ鄰U棄物咖啡果皮、果肉、內(nèi)果皮(種殼)等，以糞肥和微生物腐熟劑為調(diào)理劑，經(jīng)高溫好氧堆肥化處理制成。輔以一定比例的珍珠巖、蛭石、河沙等無機(jī)質(zhì)進(jìn)行使用增加保水透氣性。

1.3栽培及管理方法金線蓮栽培適宜光線為3 000～5 000 lx，最適宜的溫度和相對濕度分別為18～28 ℃和75%～85%。忌陽光直射，35 ℃以上生長不良，5 ℃以下則影響其生長力[6]。根據(jù)當(dāng)?shù)貧夂驐l件，試驗(yàn)選擇2014年10月份進(jìn)行。將金線蓮組培苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗凈附著其上培養(yǎng)基，放在多菌靈800倍液中浸泡消毒10～15 min。同時(shí)，將K4基質(zhì)裝入54 cm×27 cm×6 cm規(guī)格的育苗盤，按株行距 4 cm×4 cm進(jìn)行移植(每盤大概種植90株左右)，置于林下,種植5個(gè)月后采收測定。

病蟲害防治，主要以生物防治為主。在栽培區(qū)域撒放滅鼠藥、生石灰或鹽巴，防止鼠患和蟲害。通過根灌注入哈茨木霉5、解淀粉芽孢桿菌BJ和多粘芽孢桿菌JC1等進(jìn)行生物防治[14-15]。

1.4測定指標(biāo)和方法移栽5個(gè)月后測定金線蓮整株的主要化學(xué)指標(biāo)和形態(tài)指標(biāo)。粗多糖的測定采用苯酚-硫酸法，總黃酮和氨基酸的測定采用分光光度法，植株鮮重和植株干重使用千分之一天平測定。

1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 19.0進(jìn)行方差分析和多重比較分析。

2　結(jié)果與分析

2.1不同品種金線蓮內(nèi)含物的比較使用K4基質(zhì)作為栽培基質(zhì)，滇越金線蘭、福建圓葉金線蓮和福建尖葉金線蓮在移栽、培育5個(gè)月后，比較3種金線蓮的粗多糖、總黃酮和氨基酸含量。結(jié)果表明(表1)，3種來源的樣品粗多糖、總黃酮和氨基酸含量差異顯著。福建圓葉金線蓮和福建尖葉金線蓮的粗多糖含量分別是滇越金線蘭的1.74倍和1.52倍；滇越金線蘭的總黃酮含量顯著高于福建圓葉金線蓮和福建尖葉金線蓮，分別是其1.22倍和1.95倍；滇越金線蘭和福建圓葉金線蓮的氨基酸含量差異不顯著，但均顯著高于福建尖葉金線蓮的氨基酸總量，分別是福建尖葉金線蓮的1.64倍和1.65倍。因此，如果以多糖作為金線蓮的有效成分指標(biāo)，臨床用藥及試驗(yàn)研究中應(yīng)該選用福建地區(qū)的金線蓮來提取粗多糖；若以黃酮作為金線蓮的有效分成指標(biāo)，應(yīng)采用滇越金線蘭為原材料提取黃酮。

2.2不同品種金線蓮生物量的比較生物量的多少反映了植株生長的效果。滇越金線蘭與福建圓葉金線蓮、福建尖葉金線蓮的植株鮮重差異顯著，分別是福建圓葉金線蓮、福建尖葉金線蓮的1.76倍和1.98倍。在植株的干重上，滇越金線蘭也有著類似的優(yōu)勢，滇越金線蘭的植株干重比福建圓葉金線蓮高105%，比福建尖葉金線蓮高150%。滇越金線蘭植株高大，植株鮮重、植株干重都顯著高于福建圓葉金線蓮和福建尖葉金線蓮，這與邵清松等[11]的研究結(jié)論一致。

表1　不同品種金線蓮有效成分比較

折干率是藥用植物常用的生長指標(biāo)，是指經(jīng)過栽培后植株干物重與鮮重的比率，反映植株干物質(zhì)的積累與含水量情況。折干率越高，表示植株干物質(zhì)積累越多。從表2可以看出，用K4基質(zhì)種植3個(gè)不同種的金線蓮5個(gè)月后，金線蓮植株的折干率差異顯著，折干率最高的是滇越金線蘭，為11.25%。

表2　不同品種金線蓮的生物量和折干率

3　小結(jié)與討論

粗多糖、總黃酮和氨基酸是金線蓮的主要有效成分，是金線蓮質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的重要成分，其含量的差異將直接影響金線蓮及其相關(guān)產(chǎn)品的應(yīng)用功效。在云南省西雙版納州培育3種不同類型的金線蓮5個(gè)月，3種金線蓮主要有效成分含量差異顯著。建議臨床用藥及試驗(yàn)研究中應(yīng)該選用福建地區(qū)的金線蓮來提取粗多糖，采用滇越金線蘭為原材料提取黃酮。

滇越金線蘭是云南省本地種，植株形態(tài)高大，對鮮重和干重有較大的正向直接作用，植株含水率低、干物質(zhì)積累多，生物量指標(biāo)遠(yuǎn)大于福建2個(gè)栽培品種，是云南省人工種植首選的栽培品種。

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