劉玉　王朱健　曹文俊　宋新貌　王勝資

全世界約80%的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)患者在中國(guó)，華南地區(qū)發(fā)病率可達(dá)(20～30)/10萬(wàn)[1-3]。NPC具有高度惡性及廣泛轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)，Ⅰ期和Ⅱa期的患者5年生存率可達(dá)90%和84%，但是晚期患者生存率只有50%～70%[4]。早期診斷、早期治療是提高NPC患者生存率的重要因素，然而早期癥狀隱匿，容易誤診、漏診[5]。盡管近年來(lái)NPC的治療取得了進(jìn)步，但是每年仍有很多NPC患者復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移導(dǎo)致治療失敗。臨床上迫切需要一種可靠而方便的腫瘤標(biāo)志物來(lái)幫助早期診斷和提示緩解復(fù)發(fā)。本研究檢測(cè)NPC患者及對(duì)照人群血清細(xì)胞角蛋白19片段(cytokeratin-19 fragment,CYFRA21-1)，探討CYFRA21-1對(duì)NPC的診斷及隨訪價(jià)值。

1　資料與方法

1.1資料病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①有NPC臨床癥狀和體征，如頸部淋巴結(jié)腫大等；②經(jīng)病理檢查確診為NPC；③沒(méi)有其他影響試驗(yàn)的腫瘤和疾病。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：①孕產(chǎn)婦、哺乳期婦女；②肝、腎功能障礙；③心功能不全；④腫瘤及其他疾病患者。

2013年7月～2016年7月在本院就診，經(jīng)鼻咽活檢病理確診未經(jīng)治療的NPC患者336例(觀察組)，其中男性244例、女性92例；年齡22～74歲，平均(53±12)歲，中位年齡55歲。同期健康體檢人群208例(對(duì)照組)，其中男性154例、女性54例；年齡22～77歲，平均(53±10)歲，中位年齡42歲。2組間年齡(t=0.316,P=0.316)和性別(χ2=0.132,P=0.717)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組和對(duì)照組均抽取靜脈血，并隨機(jī)隨訪100例患者，于治療前及治療后3個(gè)月各收集靜脈血1次，其中隨機(jī)挑選10例分別在放療前及放療5、10、15、20、25、30次時(shí)收集靜脈血。

1.2方法采集患者靜脈血4 mL于促凝管，30 min凝固后以3 000 轉(zhuǎn)/min離心10 min后分離血清標(biāo)本檢測(cè)。CYFRA21-1采用電化學(xué)發(fā)光法，儀器為瑞士羅氏Cobas e601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，試劑盒為羅氏CYFRA21-1配套試劑。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)復(fù)核后錄入Excel 2007數(shù)據(jù)庫(kù)，采用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，Excel繪制趨勢(shì)圖，GraphPad Prism繪制散點(diǎn)圖。采用Kolmogorov-Smirnoff法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)。連續(xù)變量采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，2組間分類(lèi)變量比較采用四格表χ2檢驗(yàn)，2組間連續(xù)變量比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)及配對(duì)t檢驗(yàn)。采用受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve， ROC曲線)進(jìn)行診斷分析。P<0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

觀察組血清CYFRA21-1水平為(4.12±3.23)ng/mL，高于對(duì)照組的(2.15±0.94)ng/mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=10.507,P<0.001)。2組CYFRA21-1水平分布見(jiàn)圖1。CYFRA21-1的ROC曲線見(jiàn)圖2，臨界值、靈敏度、特異度、曲線下面積分別為2.61、63.10%、79.33%、0.765(P<0.001，95%CI：0.726～0.804)。

圖1.　NPC患者及健康對(duì)照者血清CYFRA21-1水平

圖2.　NPC患者血清CYFRA21-1 ROC曲線分析

100例觀察組患者治療前的CYFRA21-1水平為(4.10±3.83)ng/mL，治療后為(2.93±3.61)ng/mL，顯著下降(t=2.218,P=0.028)。以2.61 ng/mL為臨界值，則治療前陽(yáng)性率為64.00%，治療后陽(yáng)性率為41.00%，陽(yáng)性率顯著降低(P=0.001 8)。10例NPC患者在放療前及放療5、10、15、20、25、30次的CYFRA21-1平均值分別為2.88、3.43、2.82、1.75、1.67、1.26、1.48 ng/mL。圖3顯示10例NPC患者在放療前及放療5、10、15、20、25、30次后的血清CYFRA21-1平均水平，CYFRA21-1隨放療次數(shù)增加而呈下降趨勢(shì)。

圖3.　NPC患者放療前后血清CYFRA21-1水平變化趨勢(shì)

3　討論

細(xì)胞角蛋白屬于中微絲(intermediate filament)蛋白家族，主要分布于上皮細(xì)胞，是角質(zhì)細(xì)胞中的主要骨架蛋白，主要功能是維持上皮細(xì)胞的完整性和延續(xù)性。細(xì)胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)主要分布于層狀或鱗狀上皮細(xì)胞質(zhì)中，正常情況下體內(nèi)細(xì)胞無(wú)表達(dá)或低表達(dá)。在惡性上皮細(xì)胞癌中，激活的蛋白酶加速了細(xì)胞的降解，細(xì)胞內(nèi)的CK19釋放入血，使其在組織血液中的濃度升高[6]。CYFRA21-1是CK19的可溶性片段，因此血清中CYFRA21-1水平的升高可提示鱗狀細(xì)胞癌的分化趨勢(shì)。在頭頸部腫瘤、食管癌、宮頸癌等很多上皮源性腫瘤中，血清CYFRA21-1可作為預(yù)后的一個(gè)指標(biāo)[7-9]。在腫瘤的臨床診斷方面，血清CYFRA21-1檢測(cè)已應(yīng)用于非小細(xì)胞性肺癌[10]、卵巢癌[11]等的診斷和分期。在NPC的治療、預(yù)后中尚缺少可靠的腫瘤標(biāo)志物作為預(yù)測(cè)指標(biāo)，CYFRA21-1是否可以反映NPC患者的病情進(jìn)展程度及治療方案的有效性，需要做進(jìn)一步的深入研究。

本研究中發(fā)現(xiàn)，336例NPC患者治療前的血清CYFRA21-1水平明顯高于對(duì)照組，并根據(jù)ROC曲線分析得出最佳界限值為2.61，曲線下面積為0.765，以此為判斷值則靈敏度為63.10%，特異度為79.33%。趙惠柳等[12]和周青等[13]發(fā)現(xiàn)血清CYFRA21-1可以作為NPC診斷的重要指標(biāo)，趙萍萍等[14]和Zhu等[15]同樣發(fā)現(xiàn)血清CYFRA21-1水平對(duì)于NPC的診斷十分有價(jià)值。因此，血清CYFRA21-1對(duì)NPC具有一定的診斷價(jià)值，可作為早期診斷NPC的一個(gè)補(bǔ)充指標(biāo)，與其他頭頸部腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)可能具有更高的診斷作用，有待于進(jìn)一步研究證實(shí)。

同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)，NPC患者治療后CYFRA21-1水平明顯低于治療前水平。此外，NPC患者在放療前及放療5、10、15、20、25、30次后的血清CYFRA21-1平均水平，隨放療次數(shù)增加而呈下降趨勢(shì)。孫文潔等[16]報(bào)道NPC患者治療后血清CYFRA21-1明顯低于治療前。林月好等[17]也曾報(bào)道血清CYFRA21-1水平隨放療后腫瘤的消亡而下降。我們的結(jié)果與之前的報(bào)道相符合。CYFRA21-1在正常對(duì)照組的水平高于治療后的患者，原因與放療可能影響患者正常表皮細(xì)胞骨架的形成有關(guān)。這些數(shù)據(jù)顯示CYFRA21-1與NPC疾病的進(jìn)展有關(guān)。10例連續(xù)放療的隨訪患者臨床均表現(xiàn)為持續(xù)緩解。在治療過(guò)程中，由于腫瘤組織受到抑制、壞死，釋放CYFRA21-1入血，導(dǎo)致治療初期的一過(guò)性升高，之后隨著腫瘤的縮小，病灶變小，血清CYFRA21-1水平也逐漸降低，因此血清CYFRA21-1可作為動(dòng)態(tài)觀察NPC的一個(gè)指標(biāo)。本研究的隨訪例數(shù)較少，且未能跟蹤到復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移病例，有待于進(jìn)一步收集病例來(lái)證實(shí)CYFRA21-1對(duì)NPC治療預(yù)后的臨床價(jià)值。

綜上所述，本研究表明血清CYFRA21-1水平可作為一種有效的腫瘤標(biāo)志物，有助于NPC的診斷及治療監(jiān)測(cè)。

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