林英，王新波，焦玥明，郝慎文

（萊蕪市動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，山東 萊蕪 271100）

萊蕪市是傳統(tǒng)的蛋雞養(yǎng)殖基地，蛋雞養(yǎng)殖戶大部分是從原來的家庭養(yǎng)殖逐步發(fā)展而來，養(yǎng)殖數(shù)量在1萬～2萬之間的占80%以上，大多采用機(jī)械化飼養(yǎng)，平時(shí)由家庭成員管理，不雇傭工人，只在注射疫苗雇傭防疫人員進(jìn)行操作。由于目前蛋雞場(chǎng)免疫的疫苗種類多、注射頻次高，從事防疫的人員良莠不齊，而且一棟雞舍少說也有上萬只蛋雞，一旦免疫達(dá)不到應(yīng)有效果，帶來的經(jīng)濟(jì)損失不可估量。所以免疫后抗體水平檢測(cè)成為評(píng)估疫苗免疫效果和確定下次合適的免疫時(shí)間的重要依據(jù)。由于家庭養(yǎng)殖的局限性，很多蛋雞場(chǎng)沒有會(huì)采集血清的工作人員，不具備送檢血清的條件，單靠各級(jí)畜牧部門到場(chǎng)到戶采樣監(jiān)測(cè)，受到人員、時(shí)間的限制，遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了各蛋雞場(chǎng)的需求。外人進(jìn)入雞舍逮雞采血的過程給雞群帶來較大的應(yīng)激，且進(jìn)入全封閉的雞舍采樣需要消毒、更衣等一系列準(zhǔn)備工作，耗時(shí)耗力，有的養(yǎng)殖戶怕交叉感染，采樣后的雞只不再放回原雞舍而直接淘汰，造成很大的浪費(fèi)。檢測(cè)卵黃抗體采樣簡(jiǎn)便，對(duì)雞群無應(yīng)激，可成批次進(jìn)行檢測(cè)，是蛋雞養(yǎng)殖戶樂于接受的檢測(cè)方法。但是隨著禽流感免疫毒株的不斷變化，從H5N1Re-1一直到 H5N1Re-8，2017年秋季又改為H5N1Re-8+H7N9，注射疫苗后血清抗體和卵黃抗體的相關(guān)性到底如何，成為我們檢測(cè)者和養(yǎng)殖戶共同關(guān)心的問題。

我國(guó)在20世紀(jì)80年代就有用卵黃樣本代替血清樣本進(jìn)行新城疫抗體檢測(cè)的研究，一般來說，雞的免疫球蛋白存在于血液中，并能通過血液到達(dá)卵黃中，所以血清抗體和卵黃抗體具有一定的相關(guān)性，但是卵黃的形成較血清有滯后性，所以在免疫后各個(gè)階段相關(guān)性如何需要進(jìn)行研究。

萊蕪市動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心為了更好的做好高致病性禽流感、新城疫的監(jiān)測(cè)，為養(yǎng)殖戶提供檢測(cè)服務(wù)和免疫方案的指導(dǎo)，防范重大動(dòng)物疫病，保障蛋雞養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。于2017年9～12月在蛋雞養(yǎng)殖密集的萊蕪口鎮(zhèn)、羊里鎮(zhèn)等地區(qū)，選擇了30家養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）進(jìn)行試驗(yàn)。給這些雞群注射禽流感、新城疫等疫苗后采集血清和雞蛋，對(duì)3個(gè)月的免疫抗體情況進(jìn)行檢測(cè)，以便找出血清抗體與卵黃抗體的相關(guān)性，為今后檢測(cè)數(shù)據(jù)的的分析提供基礎(chǔ)資料。

1 試驗(yàn)方法

選擇30家日齡在180～200d的蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)（戶），每10家一個(gè)組，分別注射禽流感H5N1Re-8+H7N9、新城疫和禽流感H9油乳劑滅活疫苗。注射疫苗后隔 15、30、40、50、60、90d 每家對(duì)應(yīng)采集30份血清和雞蛋進(jìn)行抗體檢測(cè)，檢測(cè)內(nèi)容為新城疫、禽流感H5Re-8、禽流感H7N9、禽流感 H9抗體，檢測(cè)方法為血凝抑制試驗(yàn)。取每次檢測(cè)的平均值進(jìn)行比較和分析。

檢測(cè)滴度平均值統(tǒng)計(jì)見表1、表2、表3、表4。

表1 新城疫（單位log2）

表 2 禽流感 H5Re-8（單位 log2）

表 3 禽流感 H7N9（單位 log2）

表 4 禽流感 H9（單位 log2）

2 結(jié)論與分析

由表1、表2、表3、表4可以得出以下結(jié)論：

2.1 新城疫、禽流感血清和卵黃抗體在雞體內(nèi)的消減程度并不相同，相關(guān)性也有一定的差異。新城疫油苗注射后40d抗體水平達(dá)到最高值，在此之前卵黃抗體和血清抗體平均值相差2個(gè)滴度，40～60d基本維持最高值，卵黃抗體和血清抗體平均值相差1個(gè)滴度；禽流感H5Re-8注射后40d達(dá)到最高值，在此之前卵黃抗體和血清抗體平均值相差4～5個(gè)滴度，50～60d逐漸下降，血清抗體和卵黃抗體相差3～4個(gè)滴度；禽流感H7N9注射后40d達(dá)到最高值，在此之前卵黃抗體和血清抗體平均值相差數(shù)為 4.75、3.75、1，40～50d 維持原有抗體水平，抗體相差1個(gè)滴度，60d后逐漸下降，抗體相差1.5個(gè)滴度；禽流感H9注射后15d檢測(cè)時(shí)已達(dá)峰值并在峰值維持很長(zhǎng)時(shí)間，直到90d未檢測(cè)到下降，估計(jì)和禽流感H9毒株特性有關(guān)，檢測(cè)期間抗體一直相差一個(gè)滴度。檢測(cè)卵黃抗體時(shí)應(yīng)根據(jù)以上規(guī)律增加滴度，才能正確反映血清中抗體滴度。

2.2 高致病性禽流感在卵黃中抗體上升較慢，數(shù)值上與血清抗體差別較大，檢測(cè)時(shí)應(yīng)引起注意。

2.3 新城疫、禽流感H5Re-8、禽流感H7N9抗體水平在血清和卵黃抗體中40d左右達(dá)到峰值，60d開始下降，一個(gè)月大致下降1.5個(gè)滴度。建議養(yǎng)殖戶4個(gè)月左右注射一次油苗以維持機(jī)體內(nèi)較高抗體水平。

2.4 禽流感H9抗體水平維持時(shí)間較長(zhǎng)，可適當(dāng)降低免疫注射頻次，節(jié)省養(yǎng)殖成本。

本次試驗(yàn)雞群不是SPF雞群，在實(shí)驗(yàn)開始前做過禽流感H5、H9、新城疫的基礎(chǔ)免疫，禽流感H7N9為首次免疫，試驗(yàn)結(jié)果可能受到一定影響，僅供同行參考。