吳蕾,沈志勇,崔雪志,魯守偉,許傳田

(1.山東新希望六和集團有限公司，山東 濟南 250100；2.臨沂市臨港區(qū)壯崗鎮(zhèn)獸醫(yī)站，山東 臨沂 276615；3.山東省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，山東省畜禽疫病防治與繁育重點實驗室，山東 濟南 250100）

雞場消毒是做好生物安全措施最關鍵的一個環(huán)節(jié)，消毒效果好壞直接關系到場外微生物能否傳入到雞場，雞場外消毒保證場外病原進入雞場機會大大降低，雞舍內(nèi)消毒能保證雞舍內(nèi)已經(jīng)存在的病原微生物控制在一定范圍內(nèi)，不致引起疾病爆發(fā)。因此消毒預防和控制畜禽傳染病的重要措施之一[1-5]。

由于市場上消毒劑種類繁多，消毒效果各異，如何選擇適合自己養(yǎng)殖場的消毒劑是養(yǎng)殖場在生產(chǎn)過程經(jīng)常遇到的一個實際問題。本研究擬通過定量殺菌試驗比較過硫酸鉀復合粉、復方酚溶液、復方戊二醛溶液、10%聚維酮碘、火堿對細菌的殺菌效果，并結合消毒劑的價格，以及這5種消毒劑的消毒特點進行綜合分析，為養(yǎng)殖戶篩選消毒劑提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料 8.5%的生理鹽水、營養(yǎng)肉湯（陸橋）、平板計數(shù)瓊脂（陸橋）、過硫酸鉀復合粉、復方酚溶液、復方戊二醛溶液、10%聚維酮碘、火堿（純度99%）、棉簽、18mm×180mm 試管（帶塞子）、250ml錐形瓶、100μl吸頭、1ml吸頭、10～100μl單道移液器、100～1000μl單道移液器、蘇凈牌超凈工作臺、一恒牌37℃恒溫培養(yǎng)箱、酒精燈、申安牌高壓滅菌鍋等。

1.2 方法

1.2.1 細菌的培養(yǎng) 使用滅菌棉簽在種雞養(yǎng)殖場的舍內(nèi)墻壁上采集細菌，立即將棉簽放入滅菌的營養(yǎng)肉湯中，放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。

1.2.2 計算營養(yǎng)肉湯中的細菌的含量 室溫條件下（25℃），將培養(yǎng)24h的肉湯在超凈工作臺中用滅菌的生理鹽水進行10倍系列稀釋，稀釋到107倍。分別從104～107的稀釋肉湯中，依次取0.1ml菌懸液，加入平板計數(shù)瓊脂，搖勻，凝固后倒置放入37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h，計數(shù)菌落總數(shù)。

1.2.3 五種消毒劑對細菌的殺菌效果 室溫條件下（25℃），根據(jù)廠家推薦濃度設置消毒劑稀釋比例（見表1）。將過硫酸鉀復合粉、復方酚溶液、復方戊二醛溶液用蒸餾水分別進行1:200、1:400、1:600、1:800、1:1000 倍稀釋；10%聚維酮碘稀釋至0.5%、1%、2%、4%、5%（以碘含量計算）；火堿稀釋至1%、2%、4%、5%、6%。震蕩混勻后，取系列稀釋的不同種類的消毒劑與菌懸液按25:1（5m l消毒劑：0.2ml菌液）比例混合，經(jīng)不同時間反應后（30min、1、3、5、10、12、24h），將 0.1m l的細菌消毒劑混合液加入滅菌平皿中，倒入滅菌平板計數(shù)瓊脂，混勻，凝固后倒置放入37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h，觀察結果，計算菌落總數(shù)（整個處理過程在超凈工作臺中無菌進行）。實驗過程中設置滅菌蒸餾水陽性對照（滅菌蒸餾水：菌懸液=25:1）和陰性對照（滅菌蒸餾水）。

表1 廠家推薦消毒劑使用濃度

2 結果

2.1 營養(yǎng)肉湯中細菌含量的結果 由表2計算出，菌懸液中含菌量為3.1×107CFU/ml。

表2 菌懸液中細菌含量

2.2 五種消毒劑對細菌的殺菌效果 菌落計數(shù)結果表明：復方戊二醛溶液稀釋至1000倍、火堿稀釋至1%、10%聚維酮碘稀釋至0.5%、過硫酸鉀復合粉稀釋至800倍、復方酚溶液稀釋至600倍，反應30min殺菌率可達100%；陽性對照菌落多不可計，陰性對照細菌為0（見表3）。在實驗室條件下，復方戊二醛溶液、火堿、10%聚維酮碘、過硫酸鉀復合粉、復方酚溶液推薦比例分別是1:1000、1%、0.5%、1:800、1:600。

2.3 五種消毒劑使用成本 根據(jù)本實驗得出的五種消毒劑的推薦比例和市場價格計算其使用成本，成本由低到高：火堿＜復方戊二醛溶液＜復方酚溶液＜過硫酸鉀復合粉＜10%聚維酮碘，見表4。

表4 五種消毒劑使用成本

3 討論

試驗的五種消毒劑中最經(jīng)濟實惠的是火堿，對病毒和細菌的殺滅作用均較強，高濃度可殺滅芽孢，但具有腐蝕性，主要用于養(yǎng)殖場地面、墻壁等的消毒；復方戊二醛為醛類消毒劑，無腐蝕性，高效廣譜[6]，作用迅速，但有芳香氣味，不易受環(huán)境酸堿度及有機物影響，對細菌和真菌均有殺滅作用，對芽孢和無囊膜病毒作用弱，其抗菌活性不受低溫影響，化學性質穩(wěn)定，主要用于雞舍、器具、噴霧等消毒；復方酚為酚類消毒劑，對皮膚和粘膜具有刺激性和腐蝕性，對大多數(shù)不產(chǎn)生芽孢的繁殖型細菌和真菌均有殺滅作用，但對芽孢和無囊膜病毒作用不強，其抗菌活性不受低溫影響，化學性質穩(wěn)定，主要用于禽舍表面、外部環(huán)境、器具、設備等消毒；過硫酸鉀復合粉為過氧化物類消毒劑，可以殺滅各種病原微生物，并不受有機物影響，其代謝產(chǎn)物不會對人類和環(huán)境帶來影響，主要用于禽舍、空氣、飲水、畜禽等消毒；聚維酮碘為碘制劑類消毒劑，對細菌、病毒、真菌具有良好的殺菌效果，具有高效廣譜的特點，但使用成本較高，主要用于帶雞消毒、飲用水、雞舍、場地、皮膚、粘膜等消毒[7-10]。

表3 五種消毒劑不同反應時間后菌落計數(shù)

本實驗結果是在實驗室條件下得出的數(shù)據(jù)，而在畜禽養(yǎng)殖場使用消毒劑消毒會受到消毒對象、有機物、溫度、作用時間、生物膜、污染物等因素的影響，因此畜禽養(yǎng)殖場使用消毒劑消毒時需根據(jù)消毒對象選擇適宜類型的消毒劑并適當調整消毒濃度，以期達到較好的消毒效果。

本研究為養(yǎng)殖場正確篩選消毒劑種類以及消毒劑的使用濃度提供了理論數(shù)據(jù)。

[1] 陳呂華，沈明亮，云麟.重視畜禽圈舍及環(huán)境消毒是畜牧業(yè)健康發(fā)展的關鍵[J].中國獸醫(yī)雜志，2010，46(1)：86-87.

[2] 匡偉.畜禽養(yǎng)殖消毒劑的科學使用[J].家禽科學，2014，(4)：38-40.

[3] 袁正東.大型養(yǎng)禽場生物安全體系的建立與保障[J].中國家禽，2012，18(4)：1-4.

[4] 孫秀如,盧永勝,張梅芳,等.如何建立種雞場的生物安全體系[J].中國家禽，2008,11(2)：43-44.

[5] 楊丁.規(guī)?；B(yǎng)禽場生物安全措施[J]. 中國家禽,2005,27(19):30-31.

[6] 徐利平，陳小萍.戊二醛消毒劑的安全性與臨床應用[J].中國消毒學志，2005，22(1)：96-98.

[7] 王安,范偉杰,趙慶楓,等.不同消毒方法對胚蛋消毒效果和孵化成績的影響[J].畜牧與獸醫(yī)，2013，45(7)：52-54.

[8] 任景樂,肖靜靜,焦洪超,等.不同消毒方式對蛋雞場消毒效果的影響[J].中國家禽，2012，34(22)：44-46.

[9] 肖愛歡,覃國喜,盧劍,等.多種常用消毒劑有效消毒濃度的確定試驗 [J].廣西畜牧獸醫(yī)，2012，28(6):329-331.

[10] 薛文青.季銨鹽類陽離子表面活性消毒劑研究進展[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2002,12(8):634-636.