姚文瑛,須 靜

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院檢驗科,上海 201900)

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種自身免疫性疾病，其臨床特點表現(xiàn)為多關(guān)節(jié)腫脹、疼痛，以及滑膜炎，最終引起成骨和軟骨的破壞，該病的致殘率較高[1]。RA不僅對自身關(guān)節(jié)造成傷害，還能引發(fā)多種并發(fā)癥，給患者的生活質(zhì)量帶來嚴(yán)重影響[2]。因此，早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療對于改善RA患者預(yù)后有重要意義。臨床上診斷RA常采用血清類風(fēng)濕性因子(RF)，但其敏感度和特異度均較低[3]。近年來，瓜氨酸相關(guān)自身抗體不斷被用于RA的臨床診斷，且效果顯著[4]。本文為了探討血清RF、Ⅰ型膠原吡啶交聯(lián)終肽(ⅠCTP)、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體)和抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(抗MCV抗體)對早期RA的診斷價值，選取2013年10月至2016年10月到本院就診的早期RA患者60例作為研究對象，進(jìn)行隨機(jī)分組研究?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2013年10月至2016年10月到本院就診的早期RA患者60例納入早期RA組，所有患者均符合2009年美國風(fēng)濕病學(xué)會及歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟制定的相關(guān)診斷和分期標(biāo)準(zhǔn)，均為早期RA[5]。其中男27例，女33例；年齡17～75歲，平均(46.87±5.9)歲。入組標(biāo)準(zhǔn)：(1)14個關(guān)節(jié)區(qū)至少存在3個以上關(guān)節(jié)炎；(2)腕、掌指或近端指間關(guān)節(jié)至少1處腫脹；(3)晨僵超過30 min；(4)RF陽性；(5)抗CCP抗體陽性；(6)病程3～12個月；(7)滿足以上5項中的至少3項。排除標(biāo)準(zhǔn)：惡性腫瘤疾??；嚴(yán)重肝腎功能不全；內(nèi)分泌疾??；嚴(yán)重感染；其他免疫性疾病。排除急性感染、腫瘤及其他自身免疫疾病。選取同期本院收治的非RA患者50例納入非RA組，男23例，女27例；年齡16～73歲，平均 45.8±6.1)歲；骨關(guān)節(jié)炎20例，強(qiáng)直性脊柱炎13例，干燥綜合征10例，系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)7例；所有患者均符合國內(nèi)或國際相應(yīng)自身免疫性疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)。選取同期到本院體檢的健康體檢者50例納入健康對照組，其中男25例，女35例；年齡18～74歲，平均(47.1±6.8)歲。3組的一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具可比性。

1.2方法 所有對象均于清晨采集空腹靜脈血4 mL，離心分離出血清，在-70 ℃保存待用。RF檢測采用免疫散射比濁法檢測，儀器為Beckman Coulter公司Immage免疫比濁分析儀，試劑為原裝配套試劑。ⅠCTP檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)，試劑盒來自由芬蘭Orion Diagnostica公司，其線性范圍為1～50 ng/L?？笴CP抗體和抗MCV抗體檢測采用ELISA，試劑盒來自德國歐蒙公司，嚴(yán)格按照說明進(jìn)行操作，檢測設(shè)備為BioTek ELx800全自動酶標(biāo)儀，在405 nm處讀取A值，以標(biāo)準(zhǔn)品水平為橫坐標(biāo)，以A值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)繪制的曲線，求出待檢樣品抗CCP抗體和抗MCV抗體水平。以上試劑均配有標(biāo)準(zhǔn)品與質(zhì)控品。各指標(biāo)陽性值范圍：抗MCV抗體≥20 U/mL；抗CCP抗體≥5 U/mL；RF≥20 U/mL；ⅠCTP>4.5 μg/L。

2 結(jié) 果

2.13組血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗體和抗MCV抗體水平比較 早期RA組的血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗體和抗MCV抗體水平顯著高于非RA組和健康對照組(P<0.05)。見表1。

2.23組血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗體和抗MCV抗體陽性率比較 早期RA組的血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗體和抗MCV抗體陽性率顯著高于非RA組和健康對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.34項指標(biāo)檢測對早期RA的診斷價值比較 抗MCV抗體單項檢測的敏感度和特異度顯著高于其他3項指標(biāo)，RF、ⅠCTP、抗CCP抗體和抗MCV抗體4項指標(biāo)聯(lián)合檢測的敏感度和特異度最高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表1 3組血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗體和抗MCV抗體水平比較

注：與早期RA組比較，*P<0.05；與健康對照組比較，△P<0.05

表2 3組血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗體和抗MCV抗體陽性率比較[%(n/n)]

注：與早期RA組比較，*P<0.05；與健康對照組比較，△P<0.05

表3 4項指標(biāo)檢測對早期RA的診斷價值比較(%)

2.4各指標(biāo)診斷早期RA的ROC曲線分析 血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗體和抗MCV抗體曲線下面積分別為0.719、0.754、0.807、0.857。見圖1。

圖1 各指標(biāo)診斷早期RA的ROC曲線分析

2.5血清抗MCV抗體與RF、ⅠCTP、抗CCP抗體的相關(guān)性分析 經(jīng)過Pearson相關(guān)分析，血清抗MCV抗體水平與RF、ⅠCTP、抗CCP抗體均呈正相關(guān)(r=0.376、0.509、0.613,P<0.05)，其中與抗CCP抗體的相關(guān)性最強(qiáng)。

3 討 論

RA是一種自身免疫性疾病，其致殘率較高，主要病理特點是關(guān)節(jié)滑膜炎增生及滑膜炎血管翳形成[6]。早期RA是可逆的，但病情發(fā)展2年后常會出現(xiàn)不可逆性損傷，因此RA的早期診斷對于有效、及時治療RA非常重要。傳統(tǒng)檢測指標(biāo)RF對RA的敏感度和特異度均較低。因此，針對早期RA患者尋找多項聯(lián)合診斷指標(biāo)已成為國內(nèi)外臨床學(xué)者的共同研究熱點。

診斷RA的傳統(tǒng)血清學(xué)指標(biāo)包括RF、抗瓜氨酸蛋白抗體(ACPN)系列，如抗CCP抗體、抗角蛋白抗體(AKA)、抗Sa抗體等，抗MCV抗體屬于抗Sa抗體之一。RF在其他自身免疫性疾病、腫瘤、慢性感染疾病等患者中檢測結(jié)果也可表現(xiàn)出陽性[7]。AKA和抗核周因子抗體的特異度雖然較高，但敏感度較低，且其結(jié)果受個人主觀判斷的影響較大。而抗CCP抗體的敏感度公認(rèn)較低，原因是每例患者血清中的抗體亞群不同，尚存在未知抗原決定簇，檢測使用的合成肽無法全部涵蓋，但其特異度較高。抗MCV抗體是近年來發(fā)現(xiàn)的ACPN之一，有研究表明其特異度較高。其可能的作用機(jī)制是當(dāng)關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等發(fā)生共同作用，從而形成血管翳，同時釋放多種炎癥因子，進(jìn)而刺激凋亡巨噬細(xì)胞分泌波形蛋白及突變型的波形蛋白，隨后又在肽酰精氨酸亞氨酶作用下結(jié)構(gòu)發(fā)生變異，導(dǎo)致抗原決定簇增加。在凋亡細(xì)胞抗突變型瓜氨酸波形蛋白不斷聚集，且無法清除，進(jìn)而誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗MCV抗體[8]。有許多文獻(xiàn)均報道了血清RF、抗CCP抗體和抗MCV抗體三者聯(lián)合檢測對RA具有較高的診斷價值，許軍華等[9]研究結(jié)果顯示三者聯(lián)合檢測對RA的特異度可高達(dá)99.1%，但敏感度降至67.3%。本研究結(jié)果中三者的敏感度為71.3%，特異度為93.8%，與以上報道基本一致。本研究表明，早期RA組的血清RF、抗CCP抗體和抗MCV抗體的水平及陽性率均顯著高于非RA組和健康對照組(P<0.05)。

RA患者的病理特征之一是伴有局部和全身性骨質(zhì)的丟失。Ⅰ型膠原蛋白是人體內(nèi)最豐富的膠原蛋白，主要存在于骨骼中，占有機(jī)成分90%以上。ⅠCTP具有完整免疫源性肽形式，是唯一從膠原纖維分子中釋放進(jìn)入血液的交聯(lián)，可反映骨吸收情況，具有較高的敏感度和特異度。ⅠCTP以完整免疫源性肽形式進(jìn)入血液，不會繼續(xù)分解，且機(jī)體的飲食對其無影響[10]。ⅠCTP水平高低與破骨細(xì)胞活性密切相關(guān)，其變化可反映I型膠原的降解速率和骨基質(zhì)的病理性破壞程度。有研究結(jié)果表明，ⅠCTP在早期RA與非RA組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)[11]，但顯著高于對照組(P<0.05)。本文研究結(jié)果與其一致。

董奕裕等[12]報道，ⅠCTP、基質(zhì)金屬蛋白酶-3、抗CCP抗體和RF檢測對旱期RA的敏感度為43.8%，特異度為99.0%。而本文選取RF、ⅠCTP、抗CCP抗體和抗MCV抗體4項指標(biāo)在保證特異度(96.9%)的基礎(chǔ)上，顯著提高敏感度(92.9%)。本研究結(jié)果還表明，血清抗MCV抗體水平與RF、ⅠCTP、抗CCP抗體均呈正相關(guān)關(guān)系。說明RF、ⅠCTP、抗CCP和抗MCV抗體4項指標(biāo)互相補(bǔ)充，進(jìn)而提高了診斷的敏感度和特異度。

綜上所述，血清RF、ⅠCTP、抗CCP抗體和抗MCV抗體聯(lián)合檢測有利于對RA進(jìn)行的早期診斷，可作為臨床輔助診斷方法。

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