李 迎, 杜小燕, 崔曉霞, 馬蘭芝, 尚世臣,黃 斌, 趙 權(quán), 李桂軍, 王冬平, 陳振文

(1. 軍事科學院軍事醫(yī)學研究院實驗動物中心, 北京 100071;2. 首都醫(yī)科大學實驗動物科學部, 北京 100069;3. 吉林農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院, 長春 130118)

長爪沙鼠(Meriones unguiculatus) 又名長爪沙土鼠、蒙古沙鼠(Mongolian gerbil)等, 我國主要分布在內(nèi)蒙古、河北、陜西、寧夏等荒漠草原地帶[1],首都醫(yī)科大學1987年從內(nèi)蒙古包頭郊外捕獲到野生長爪沙鼠進行實驗動物化[2]。 由于該動物具有獨特的生物學特性被譽為“多功能”實驗用動物資源,已被廣泛用于醫(yī)學研究的各個領(lǐng)域當中。尤其長爪沙鼠具有明顯的腦底動脈Willis環(huán)變異缺失即先天畸形而成為理想的腦缺血研究實驗材料，首都醫(yī)科大學以長爪沙鼠腦底動脈Willis環(huán)變異缺失類型和單側(cè)頸動脈結(jié)扎后的模型癥狀為指導, 通過同一血管類型和一致的表型特征長爪沙鼠后代全同胞兄妹繁殖, 成功培育了腦缺血模型高發(fā)長爪沙鼠近交系群體CMU/1和CMU/2, 為了更利于2個近交系的保種、繁殖生產(chǎn), 本文就CMU/1和CMU/2近交系長爪沙鼠的繁殖性能指標進行了觀測, 以其為科學合理的進行長爪沙鼠近交系的保種和生產(chǎn)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

近交F20～22代CMU/1和CMU/2長爪沙鼠，均60只，雌雄各半，8～10周齡，首都醫(yī)科大學實驗動物中心提供[SCXK(京)-2013-0005]，動物飼養(yǎng)于普通級環(huán)境內(nèi)，室溫為20～24 ℃，日常飼喂60Co照射消毒飼料及飲用無菌水，自由采食及飲水。本實驗通過首都醫(yī)科大學實驗動物和動物實驗倫理委員會批準(No. AEEI-2017-032)。

1.2 繁殖方式

采取一雌一雄長期同居方式繁殖。分3組：CMU/1; CMU/2; CMU/1和CMU/2雜交繁殖。

1.3 觀察項目

1.3.1 生長發(fā)育觀察 自出生之日起逐日進行觀察,記錄初生體質(zhì)量，第一周，每日稱量仔鼠體質(zhì)量，以后每周稱量體質(zhì)量至八周。

1.3.2 繁殖情況 采用一雌一雄長期同居法飼養(yǎng)，在記錄卡片上記錄交配日期、出生日期、產(chǎn)仔數(shù)、死亡數(shù)、離乳仔鼠數(shù)、離乳仔鼠、體質(zhì)量，統(tǒng)計初產(chǎn)日齡，胎間隔和產(chǎn)仔胎數(shù)等繁殖信息。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 23.0軟件進行統(tǒng)計學處理，使用單因素方差分析及多重比較對測得的實驗數(shù)據(jù)進行比較分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 繁殖性能

2.1.1 窩產(chǎn)仔數(shù) 1～4胎不同繁殖群體窩產(chǎn)仔數(shù)差異不顯著(P＞0.05)，第2胎為最多，平均3～7只。多重比較: 三組動物的窩產(chǎn)仔數(shù)CMU/1與雜合差異顯著(P＜0.05)，雜交組窩產(chǎn)仔數(shù)多(表1)。

表 1 長爪沙鼠窩產(chǎn)仔數(shù)Table 1 Comparison of litter size in Mongolian gerbil

2.1.2 初生窩重的比較 結(jié)果顯示: 1～4胎不同繁殖群體初生窩重差異不顯著(P＞0.05)，初生窩重以第2胎為最重，多重比較差異均不顯著(表2)。

表 2 長爪沙鼠1～4胎的初生窩重比較Table 2 Comparison of the birth weights of the 1～4 fetuses in Mongolian gerbil g

2.1.3 離乳重、離乳成活率 結(jié)果顯示，CMU/2離乳重與雜交組差異顯著(P＜0.05)，離乳成活率均在65%～75%，沒有顯著差異(表3)。

表 3 長爪沙鼠離乳重和離乳成活率Table 4 Weaning weight and weaning survival rate of Mongolian gerbil

2.1.4 胎間隔 胎間隔大多數(shù)在21～70 d，三組繁殖群的胎間隔差異不顯著(P＞0.05)，但CMU/2近交系繁殖群初產(chǎn)日齡和胎間隔天數(shù)較長(表4)。

表 4 長爪沙鼠胎間隔Table 4 Birth interval of Mongolian gerbil d

2.2 生長發(fā)育

CMU/1近交系長爪沙鼠1～8周齡生長曲線，R=0.991 1, 決定度R2=0.982 2, 在該段時間內(nèi)影響體質(zhì)量增加的因素中周齡起了98.22%的作用; CMU/2近交系長爪沙鼠, R=0.9916, 決定度R2=0.9833; CMU/1和CMU/2雜交長爪沙鼠, R=0.9895, 決定度R2=0.9791(圖 1)。

圖 1 CMU/1和CMU/2近交系長爪沙鼠1到8周齡生長曲線Figure 1 Growth curves of CMU/1 and CMU/2 inbred Mongolian gerbil from 1 to 8 weeks

3 討論

近年來，我國對長爪沙鼠實驗動物化的研究已有一些報道[3,4]，并且在一些地區(qū)已經(jīng)培育了以大、小鼠微生物學和寄生蟲學國家標準為檢測對照的普通級和清潔級長爪沙鼠封閉群。但對長爪沙鼠生物學背景資料的研究仍顯不足，尚未見有關(guān)近交系長爪沙鼠的報道。

長爪沙鼠初產(chǎn)周齡最早為13周齡, 根據(jù)長爪沙鼠妊娠期為24～26 d判斷, 其配種日齡最早在65日齡，多數(shù)為3～6個月[5]。本文結(jié)果表明，三組長爪沙鼠繁殖群胎次間窩產(chǎn)仔數(shù)、初生窩重差異不顯著(P＞0.05); 不同繁殖種群間比較, 窩產(chǎn)仔數(shù)CMU/1與雜合差異顯著(P＜0.05)，離乳質(zhì)量CMU/2與雜交組差異顯著(P＜0.05)。盧靜等[4]對長爪沙鼠研究表明, 窩產(chǎn)仔數(shù)多數(shù)為3～7只, 初生仔平均重為3.5g，離乳重為28 g左右，成年體質(zhì)量為55 g左右，這與本研究結(jié)果基本一致。近交系長爪沙鼠離乳存活率在65%～75%, 比劉寒英等[3]報道的存活率88.1%低，可能與近交繁殖有關(guān)。胎間隔大多數(shù)在21～70 d，分別占總數(shù)的82.05%、65.22%、89.29%，周文偉等[6]研究表明，Z-ZCLA長爪沙鼠的胎間隔大多在20～60 d，占總數(shù)的72.16%，與本文結(jié)果比較無明顯差異。

1～8周齡生長曲線結(jié)果表明，近交系長爪沙鼠隨時間的增加體質(zhì)量都有明顯上升， 周齡都起到94%～99%的作用。

通過對近交系長爪沙鼠三組繁殖群體繁殖性能初步觀察表明，CMU/1和CMU/2近交系的繁殖性能差異不顯著，雜合繁殖有一定的優(yōu)勢。本研究結(jié)果為今后腦缺血模型長爪沙鼠近交系保種和繁殖提供一定的參考數(shù)據(jù)。

[1] 盧耀增. 實驗動物學[M]. 北京: 北京醫(yī)科大學中國協(xié)和醫(yī)科大學聯(lián)合出版社, 1995:212- 214.

[2] 聶金榮, 劉金明, 葉亞玉. 長爪沙鼠的飼養(yǎng)管理與繁殖[J].上海實驗動物與科學, 1989, 9(1):20-22.

[3] 劉寒英, 文端成. 長爪沙鼠生長與繁殖性能的主要指標測定[J]. 動物科學與動物醫(yī)學, 2004, 12(21):35-37.

[4] 盧靜, 喬欣, 石淑靜, 等. 長爪沙鼠生產(chǎn)繁殖性能的研究[J].中國實驗動物學報, 2004, 12(4):123-126.

[5] 李厚達. 實驗動物學[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2003.

[6] 周文偉, 石巧娟, 施張奎, 等. 44代Z-ZCLA長爪沙鼠生長繁殖性能的研究[J]. 醫(yī)學研究雜志, 2009, 38(7):58-61.