李洪瑞 李艷華

(天津海濱人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，天津 300280)

宮頸癌是全球女性第三大惡性腫瘤[1]。人乳頭狀瘤病毒(the human papillomavirus，HPV感染并不總是發(fā)展為癌癥，但90%的宮頸癌病例與高危型HPV的感染有著巨大關(guān)系。而這一感染也是宮頸癌患者臨床發(fā)病時(shí)的重要因素。HPV基因組編碼的E6和E7致癌基因的持續(xù)過(guò)表達(dá)在宮頸癌的發(fā)展中具有關(guān)鍵作用[2,3]。本文就E6、E7等的致癌機(jī)制的研究進(jìn)展作一綜述。

1 HPV及其致癌機(jī)制

HPV病毒是DNA腫瘤病毒，病毒為二十面體對(duì)稱的無(wú)包膜核衣殼病毒，呈球形，直徑為52～55nm，基因組是雙鏈環(huán)狀DNA結(jié)構(gòu)，基因組主要有3各區(qū)域，即早期、晚期以及調(diào)控區(qū)(long conrol region, LCR)。早期區(qū)含E1、E2、E4、E5、E6、E7六個(gè)閱讀框，分別對(duì)相應(yīng)蛋白進(jìn)行編碼處理。對(duì)于E2編碼的蛋白而言，可對(duì)E6以及E7的表達(dá)就行控制，并能夠調(diào)控病毒的生長(zhǎng)，是致癌的關(guān)鍵。晚期區(qū)域位置在早期區(qū)域的下游位置，有兩個(gè)ORF可對(duì)衣殼蛋白L1以及L2進(jìn)行編碼。LCR區(qū)無(wú)蛋白編碼功能。在LCR區(qū)中，主要含有HPV病毒復(fù)制起點(diǎn)以及多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)，在HPV復(fù)制的早期晚期能夠?qū)蜣D(zhuǎn)錄調(diào)控起到尤為重要的作用。在一些研究中也顯示，早期編碼區(qū)域中的E6和E7表達(dá)是宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸惡性腫瘤發(fā)生的重要因素，而E6以及E7則是發(fā)病過(guò)程中的關(guān)鍵點(diǎn)。

正常細(xì)胞每分裂一次，染色體縮短50～200bp，當(dāng)端?？s短到一定長(zhǎng)度時(shí)，細(xì)胞DNA損傷檢查點(diǎn)被檢測(cè)到，并激活p53通路和Rb通路，可致細(xì)胞周期停滯，細(xì)胞衰老。HPV依靠宿主細(xì)胞的復(fù)制以維持自身合成過(guò)程，HR-HPV DNA中的E1和E2開放閱讀框，并且開始分裂后，在下游的E2、E4、E5、L1和L2等會(huì)出現(xiàn)不在表達(dá)或是丟失的情況，在此時(shí)病毒DNA會(huì)被整合到宿主基因中[5]。在整合時(shí)，會(huì)導(dǎo)致E2蛋白的表達(dá)及其活性出現(xiàn)降低，而E6蛋白和E7蛋白的轉(zhuǎn)錄會(huì)上調(diào)，在此時(shí)會(huì)對(duì)周期通路以及蛋白造成干擾，導(dǎo)致HPV的持續(xù)復(fù)制增殖。

2 HPV E6和E7生物學(xué)特性及其與腫瘤的關(guān)系

幾乎所有類型的宮頸癌均發(fā)現(xiàn)了高危HPV DNA，而HPV16是普通人群中最常見的類型[6]。HPV E6導(dǎo)致p53的降解，P53是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯的關(guān)鍵腫瘤抑制因子；HPV E7結(jié)合和失活另一種重要的腫瘤抑制因子——視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白(retinoblastoma protein，pRb)，從而干擾細(xì)胞周期調(diào)控[7]。

2.1 HPV E6及其作用

HPV E6蛋白是通過(guò)不典型的鋅指結(jié)構(gòu)2個(gè)構(gòu)成的，每隔鋅指結(jié)構(gòu)均有兩段含有兩個(gè)半胱氨酸的氨基酸序列，而這也是所有HPV E6的保守結(jié)構(gòu)。E6蛋白的鋅指狀結(jié)構(gòu)是其許多已知功能所必需的[8]。E6蛋白有許多細(xì)胞蛋白的結(jié)合位點(diǎn)，這些蛋白包括p53、E6相關(guān)蛋白(E6 associated protein, E6-AP)、抑癌蛋白PDZ、p300等，這些蛋白的結(jié)合位點(diǎn)對(duì)于E6蛋白的功能至關(guān)重要[9]。在細(xì)胞增殖調(diào)控中p53、E6-AP、PDZ和p300都發(fā)揮著重要作用，它們通過(guò)與E6蛋白結(jié)合，使細(xì)胞周期發(fā)生改變，促進(jìn)細(xì)胞增殖。

p53蛋白是一個(gè)重要的抑癌基因，在細(xì)胞周期中具有重要的調(diào)節(jié)作用。當(dāng)細(xì)胞未完成修復(fù)時(shí)，p53蛋白使細(xì)胞停留在G1期，直到DNA完成修復(fù)后才能進(jìn)入S期。當(dāng)DNA損傷不能得到有效修復(fù)時(shí)，p53可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。p53主要通過(guò)激活細(xì)胞周期蛋白激酶抑制因子p21來(lái)抑制激酶CDK2的活性，從而阻斷細(xì)胞周期的進(jìn)程。E6-AP蛋白是細(xì)胞編碼的一種泛素蛋白連接酶，E6蛋白通過(guò)E6-AP介導(dǎo)與抑癌蛋白p53結(jié)合，經(jīng)過(guò)泛素途徑使p53、PDZ蛋白最終被蛋白酶體降解而失去功能，破壞p53蛋白的細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制，使細(xì)胞繞過(guò)細(xì)胞周期G1/S和G2/M檢查點(diǎn)，阻止細(xì)胞進(jìn)入DNA損傷應(yīng)答途徑，使細(xì)胞進(jìn)入S期[10]，而轉(zhuǎn)向惡性增殖。Hiller等[11]證實(shí)，多種高危型HPV類型的E6蛋白均可使p53表達(dá)下調(diào)，但在低危型HPV6，11，44，54和61中未觀察到這種現(xiàn)象。E6可通過(guò)阻斷p53依賴的細(xì)胞凋亡途徑阻止細(xì)胞凋亡，使基因異常的細(xì)胞持續(xù)增殖，導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生[12]。

E6蛋白可以增強(qiáng)人的端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(telomerase reverse transcriptase, TERT)活性，E6是通過(guò)E6-AP來(lái)增強(qiáng)TERT活性。TERT和端粒酶RNA是端粒酶發(fā)揮功能的核心成分，分別起提供模板和逆轉(zhuǎn)錄合成端粒DNA的作用。研究發(fā)現(xiàn)，若失去E6-AP結(jié)合能力的E6突變體不能提高人的TERT(h TERT)活性；E6-AP敲除鼠研究及人和鼠的RNA干擾研究都證實(shí)，E6-AP是E6激活h TERT基因啟動(dòng)子所必須的[13]。研究表明，HPVE6蛋白可以降低TERT轉(zhuǎn)錄起始區(qū)的甲基化，從而提高h(yuǎn) TERT表達(dá)[14]。E6蛋白可通過(guò)許多途徑激活端粒酶的表達(dá)和活性，TERT基因是人端粒酶的限速成分。TERT核心啟動(dòng)子包含多種轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)，包括NF-κB、E2F、Sp1等，這些轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合TERT核心啟動(dòng)子能激活端粒酶活性。研究證實(shí)，E6蛋白能與myc形成復(fù)合物，可以與h TERT啟動(dòng)子結(jié)合，并激活TERT啟動(dòng)子，而增強(qiáng)TERT表達(dá)和活性[15]。E6蛋白能與有活性的端粒酶復(fù)合物和端粒直接結(jié)合，從而激活端粒酶活性[16]。在惡性增殖細(xì)胞中E6蛋白最重要的作用是激活TERT[17]。研究證實(shí)，E6蛋白可增強(qiáng)hTERT基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)甲基化，從而促進(jìn)TERT基因表達(dá)，激活端粒酶[13]。

E6蛋白鋅指結(jié)構(gòu)區(qū)的其他蛋白結(jié)合位點(diǎn)對(duì)于其功能發(fā)揮同樣也非常重要的。E6蛋白的C端含有抑癌蛋白PDZ蛋白的結(jié)合區(qū)域[9]，PDZ蛋白在細(xì)胞周期中發(fā)揮著重要作用，可以抑制細(xì)胞增殖，而E6蛋白可以結(jié)合PDZ蛋白使其降解，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖。p300/CBP蛋白是轉(zhuǎn)錄輔助共激活因子，具有組蛋白乙?；?HAT)活性，它在轉(zhuǎn)錄調(diào)控和染色質(zhì)重塑等中發(fā)揮重要作用。p300/CBP蛋白能乙酰化p53蛋白，并激活p53蛋白。E6蛋白結(jié)合p300/CBP蛋白可將阻止其乙?；痯53蛋白，降低p53蛋白的活性。

此外，E6蛋白可與多種細(xì)胞因子蛋白相互作用，如凋亡調(diào)控因子BAK、黏著素樁蛋白、鳥苷酸激酶類似物MAGI-1、-2和-3、基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)、小G蛋白R(shí)ap的GTP酶激活蛋白類似物E6TP1、G蛋白途徑抑制因子2(GPS2)等[18]。

2.2 HPV E7及其作用

E7蛋白是HR-HPV主要的致癌蛋白。E7分為CR1、CR2、CR3三個(gè)功能區(qū)。E7蛋白N末端的CR1和CR2區(qū)在E7蛋白的體外中轉(zhuǎn)化起重要作用[8]。E7蛋白可與Rb、p130、E2F1、Cyclin A、HDAC等多種細(xì)胞蛋白結(jié)合。E7主要通過(guò)阻止p Rb與轉(zhuǎn)錄因子E2F結(jié)合從而降低pRb活性。pRb是重要的細(xì)胞周期調(diào)控因子。E2F是細(xì)胞增殖所必需的，在細(xì)胞周期G1/S轉(zhuǎn)換及DNA復(fù)制中起至關(guān)重要作用。細(xì)胞周期依賴于CDKs和cyclin的調(diào)控，CDKs只有結(jié)合cyclins后才具有激酶活性。一般情況下，活性pRb蛋白處于低磷酸化狀態(tài)，其與E2F結(jié)合，形成特異性pRb/E2F復(fù)合物，影響cyclins的表達(dá)和CDKs激酶的活性，作為轉(zhuǎn)錄抑制因子負(fù)向調(diào)控G1/S期的轉(zhuǎn)變，可阻止細(xì)胞進(jìn)入S期。而當(dāng)E7蛋白CR2區(qū)的LXCXE結(jié)構(gòu)域與pRb第649-72位氨基酸的口袋結(jié)構(gòu)特異性結(jié)合后，pRb與E2F作用受阻，使細(xì)胞避免進(jìn)入DNA損傷應(yīng)答途徑，不能負(fù)向調(diào)控G1/S期的轉(zhuǎn)變，形成不受控的細(xì)胞增殖[19]；同樣E7蛋白可以結(jié)合CDK2并激活其酶活性。HPV16 E7可通過(guò)泛素-蛋白酶體通路降解pRb[20]，使基因異常的細(xì)胞發(fā)生癌變。p21可通過(guò)pRb非依賴性方式抑制E2F活性，而E7能與p21結(jié)合使其失活，進(jìn)而解除p21對(duì)CDK2的抑制，也能消除p21對(duì)增殖細(xì)胞核抗原依賴性DNA復(fù)制的抑制功能，弱化p21的雙重抑制作用，而激活CDK2，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖[17]。E7蛋白也可使細(xì)胞周期相關(guān)負(fù)向調(diào)節(jié)因子p16、p27失活，引起惡性轉(zhuǎn)化。RAS蛋白可以誘導(dǎo)細(xì)胞衰老，CR1區(qū)含RAS蛋白結(jié)合位點(diǎn)，E7蛋白可以與RAS蛋白相互作用，降低其表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞增殖。

E7蛋白的C末端有一鋅指結(jié)構(gòu)，能與轉(zhuǎn)錄因子E2F1結(jié)合，激活那些對(duì)E2F有應(yīng)答的啟動(dòng)子活性。E7蛋白的C端可結(jié)合BRCA1，阻止BRCA1對(duì)h TERT的抑制作用，促進(jìn)細(xì)胞增殖[21]。CR3區(qū)的鋅指結(jié)構(gòu)發(fā)生突變，E7蛋白會(huì)失去癌變的能力。E7蛋白可增加HAT的表達(dá)，并顯著增強(qiáng)E2F上調(diào)h TERT啟動(dòng)子活性，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖[8]。

研究表明，E7蛋白持續(xù)表達(dá)有助于穩(wěn)定癌細(xì)胞端粒酶活性，同時(shí)能增強(qiáng)E6蛋白對(duì)h TERT啟動(dòng)子的直接激活作用[22]。E2F可以調(diào)控TERT基因的表達(dá)，pRb是E2F的主要負(fù)調(diào)控因子，而E7蛋白可以滅活pRb，從而釋放E2F，故E7可間接激活h TERT啟動(dòng)子活性，從而激活端粒酶的表達(dá)和活性。

E7也可作用于多種細(xì)胞因子，如Rb相關(guān)p107和p130蛋白，組蛋白H1激酶，TATA框結(jié)合蛋白，S4三磷酸腺苷酶，c-Jun，腫瘤抑制因子h Tid1，丙酮酸激酶Mi2，p48，周期依賴激酶抑制物p21CIP1和p27KIP1，IRF-1等[18]

3 其他

3.1 RASSF1A

致癌基因和腫瘤抑制基因都有助于癌癥的發(fā)生。HPV16-E6和RASSF1A是已知的致癌和腫瘤抑制基因，對(duì)凋亡調(diào)節(jié)至關(guān)重要[23]。RASSF1A是具有高甲基化啟動(dòng)子的腫瘤抑制基因，參與腫瘤發(fā)生，發(fā)展和預(yù)后[24]。RASSF1A通過(guò)其結(jié)合和穩(wěn)定微管的能力誘導(dǎo)凋亡和細(xì)胞周期改變，控制有絲分裂和調(diào)節(jié)基因組穩(wěn)定性。特異性效應(yīng)因子包括細(xì)胞周期蛋白D1，p120E4F，Cdc20，PMCA4b，Bax，CNK1和Raf1-MST2[25]。HPV16感染和RASSF1A表達(dá)在腫瘤發(fā)展和進(jìn)展中起重要作用。研究發(fā)現(xiàn)[26]，HPV16-E6通過(guò)p53的降解選擇性上調(diào)RASSF1A的表達(dá)，其與RASSF1A啟動(dòng)子相互作用并調(diào)節(jié)凋亡。HPV16感染調(diào)節(jié)p53介導(dǎo)的RASSF1A表達(dá)并抑制細(xì)胞凋亡。RASSF1A參與p53依賴性細(xì)胞凋亡。

HPV感染和異常Ras相關(guān)域家族基因1A(RASSF1A)啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)參與宮頸癌的發(fā)病機(jī)制。一些研究表明[27]，E6和E7參與RASSF1A的致病機(jī)制。研究表明，在異位表達(dá)HPV16 E6和E7的宮頸癌細(xì)胞系中檢測(cè)到重新表達(dá)和下調(diào)的啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)；與正常宮頸樣本相比，統(tǒng)計(jì)學(xué)顯示宮頸癌樣品中RASSF1A的甲基化顯著(P<0.05)。研究表明，RASSF1A基因表達(dá)可以通過(guò)其啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)來(lái)調(diào)節(jié)；HPV16 E6和/或E7的異位表達(dá)可能參與RASSF1A基因的異常甲基化和表達(dá)。

3.2 EMT

HPV E6、E7癌基因在宮頸癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中起重要作用。E6和E7與上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)密切相關(guān)。EMT是惡性腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的重要機(jī)制，通過(guò)下調(diào)黏附分子的表達(dá)使細(xì)胞間接觸力降低及細(xì)胞流動(dòng)性增強(qiáng)，促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。鈣粘素轉(zhuǎn)換是EMT的關(guān)鍵標(biāo)志，其特征在于E-鈣粘蛋白表達(dá)降低，N-鈣粘蛋白或P-鈣粘蛋白表達(dá)增加，并且涉及許多侵襲性腫瘤。Hu D等研究中，Pearson相關(guān)系數(shù)分析顯示，40例高級(jí)別宮頸病變中E-鈣粘蛋白表達(dá)與E6/E7水平呈強(qiáng)負(fù)相關(guān)，P-鈣粘蛋白表達(dá)與E6/E7水平呈強(qiáng)正相關(guān)；此外，該研究表明，HPV-16 E6/E7表達(dá)的調(diào)控顯著影響細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，以及宮頸細(xì)胞系中E-鈣粘蛋白和P-鈣粘蛋白表達(dá)的水平；該研究揭示了HPV-16 E6/E7可以通過(guò)調(diào)節(jié)鈣粘蛋白轉(zhuǎn)換來(lái)提高細(xì)胞侵襲潛能，從而有助于宮頸癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移[28]。E6和E7通過(guò)激活EMT轉(zhuǎn)錄因子Slug、Twist、ZEB1和ZEB2，使細(xì)胞發(fā)生EMT樣改變，增強(qiáng)癌細(xì)胞的侵襲力，促進(jìn)惡性細(xì)胞浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移[29]。同時(shí)，E6和E7還可影響宿主的免疫功能，如干擾素應(yīng)答基因被干擾，E6與干擾素調(diào)節(jié)因子3結(jié)合、E7與干擾素調(diào)節(jié)因子1結(jié)合，抑制干擾素應(yīng)答啟動(dòng)，導(dǎo)致病毒逃逸免疫系統(tǒng)的監(jiān)視，促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展[30]。

3.3 miRNA

許多致癌miRNA與宮頸癌腫瘤發(fā)生相關(guān)[31,32,33]。表觀遺傳學(xué)不穩(wěn)定性受到微小RNA(miRNA或miR-)的影響。MiRNA長(zhǎng)度為19至25個(gè)核苷酸(nt)，并通過(guò)結(jié)合靶mRNA的3′-UTR而在轉(zhuǎn)錄和表觀遺傳調(diào)控中起作用[34]。眾所周知，miRNA失調(diào)與多種人類惡性腫瘤有關(guān)，如乳腺癌，肺癌，結(jié)腸癌和胃癌[35]。許多miRNAs(miR-9，miR-21，miR-27a，miR-34a，miR-146a，miR-155，miR-196a，miR-203，miR-221等)研究試圖通過(guò)不同的方法證實(shí)每個(gè)miRNA在子宮頸癌中的效用。Ma等研究顯示miR-9通過(guò)靶向鈣黏著蛋白1(CDH1)增加細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性和侵襲力，并導(dǎo)致癌癥轉(zhuǎn)移[36]。Asangani等和Bumrungthai等研究顯示miR-21通過(guò)靶向程序性細(xì)胞死亡4(PDCD4)促進(jìn)侵襲和細(xì)胞增殖[33]。MiR-155通過(guò)靶向肝臟激酶B1(LKB1)促進(jìn)細(xì)胞增殖擴(kuò)散[32,37]。王曉紅等發(fā)現(xiàn)miR-92a和miR-378表達(dá)與HPV陽(yáng)性組織樣本中的癌癥進(jìn)展相關(guān)[38]。劉偉軍等發(fā)現(xiàn)miR-9和HPV E6通過(guò)下調(diào)卵泡抑素樣1(FSTL1)和活化的白細(xì)胞細(xì)胞粘附分子(ALCAM)mRNA，從而引起細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性增加，兩者均參與細(xì)胞遷移[39]。許多研究都報(bào)道了miR-21和miR-155與免疫反應(yīng)以及HR-HPV E6/E7表達(dá)相關(guān)的其他機(jī)制。Bumrungthai等發(fā)現(xiàn)miR-21與α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)和白細(xì)胞介素6(IL-6)的表達(dá)增加相關(guān)，與細(xì)胞增殖中PDCD4的表達(dá)降低相關(guān)；在結(jié)腸癌和子宮頸癌細(xì)胞中，miR-21通過(guò)活化的B細(xì)胞(NF-kB)和白介素-6(IL-6)信號(hào)通路的核因子κ-輕鏈引發(fā)炎癥相關(guān)癌變；Asangani等發(fā)現(xiàn)在結(jié)腸癌中，miR-21下調(diào)PDCD4，促進(jìn)侵襲和轉(zhuǎn)移[33]。對(duì)于miR-155，Guoying Lao等發(fā)現(xiàn)miR-155調(diào)節(jié)LKB1的表達(dá)，起到胚胎極性、代謝和細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，miR155的上調(diào)促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的增殖[32]。研究發(fā)現(xiàn)[40]，與正常宮頸組織相比，三種miRNA(miR-9，miR-21和miR-155)在子宮頸癌組織中的表達(dá)均顯著增高(P<0.0001)；miR-21和miR-155是HPV E6/E7陰性子宮頸癌患者7倍和10.3倍高風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)因子(分別為P=0.024和P=0.017)，而miR-155是HPV E6/E7陽(yáng)性患者宮頸癌27.9倍高風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)因子(P<0.0001)。在診斷價(jià)值方面，miR-21和miR-155的表達(dá)與HPV E6/E7 mRNA測(cè)定結(jié)合有助于獨(dú)立于HPV感染的宮頸癌的診斷，因?yàn)檫@些miR-21和miR-155可能能夠鑒別HPV陰性宮頸癌的病例。miR-21與HPV狀態(tài)無(wú)關(guān)，在宮頸癌中持續(xù)上調(diào)。miR-21和miR-155的表達(dá)是HPV陰性宮頸癌組織高風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)因子。研究結(jié)果表明，特異性miRs的miRNA RT-qPCR檢測(cè)可能是診斷宮頸癌，尤其是宮頸癌HPV陰性病例的有用方法。

3.4 Ado

子宮頸癌細(xì)胞通過(guò)腺苷能途徑抑制細(xì)胞毒性T細(xì)胞的效應(yīng)功能。在腫瘤細(xì)胞中，CD73的表達(dá)在腺苷(Ado)的產(chǎn)生中起重要作用，Ado可以抑制抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞。Mora-García ML等研究結(jié)果顯示，HPV+宮頸癌細(xì)胞膜表達(dá)的CD73水平顯著高于HPV-宮頸癌細(xì)胞(P<0.01)；HPV+宮頸癌細(xì)胞通過(guò)水解AMP產(chǎn)生大量的腺苷；由HPV+宮頸癌細(xì)胞產(chǎn)生的腺苷可以抑制CD8+T細(xì)胞的效應(yīng)功能。研究表明，沉默E6/E7表達(dá)的宮頸癌細(xì)胞中，大大降低了其CD73表達(dá)水平和產(chǎn)生Ado的能力。研究提示，HPV感染可能會(huì)增加宮頸癌CD73的組成型表達(dá)，從而通過(guò)大量Ado的產(chǎn)生而抑制免疫應(yīng)答[41]。在過(guò)去幾年中，幾項(xiàng)臨床前研究強(qiáng)調(diào)了CD73(ecto-5′-核苷酸酶)作為癌癥治療的潛在治療靶標(biāo)的價(jià)值。實(shí)際上，通過(guò)單克隆抗體或小分子對(duì)CD73進(jìn)行藥理學(xué)封鎖，有望抵消癌癥的發(fā)展，成長(zhǎng)和傳播?？笴D73藥物與常規(guī)癌癥治療(即化療，放射治療，免疫治療，靶向治療)的協(xié)同組合具有增加的治療潛力[42]。

3.5 細(xì)胞外囊泡

癌細(xì)胞釋放的細(xì)胞外囊泡是細(xì)胞間通訊介質(zhì)，其有助于癌癥發(fā)生。由于它們?nèi)菀自隗w液中檢測(cè)到，它們也可以用作癌癥生物標(biāo)志物。Harden ME等研究，檢測(cè)一組68個(gè)癌相關(guān)的miR(MicroRNA)，揭示了許多miR在細(xì)胞中和胞外囊泡中具有相似的表達(dá)模式，而其他一些miR具有不同的表達(dá)模式，并且可以選擇性地包裝入胞外囊泡中。有趣的是，可以選擇性包裝在HPV16E6/E7細(xì)胞外囊泡中的miR組被預(yù)測(cè)可以抑制壞死和凋亡[43]。HPV16 E6和E7癌蛋白表達(dá)可改變細(xì)胞外囊泡中的微小RNA表達(dá)，而抑制壞死和凋亡。

4 展望

宮頸癌是威脅女性健康的惡性腫瘤之一，也是目前惟一可以預(yù)防的婦科惡性腫瘤，通過(guò)早期篩查及干預(yù)可以有效地阻止CIN向?qū)m頸癌進(jìn)展。HPV癌基因E6和E7在宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要作用。宮頸癌篩查的HPV DNA檢測(cè)被廣泛用作預(yù)防子宮頸癌進(jìn)展的早期診斷指南。對(duì)癌基因表達(dá)產(chǎn)物E6和E7蛋白檢測(cè)的難度較高，分子檢測(cè)技術(shù)的研究更多聚焦于癌基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物E6/E7 mRNA。由于目前存在一些HPV陰性宮頸癌癌癥病例[44]，因此仍需要研究調(diào)查與宮頸癌癌變發(fā)生相關(guān)的其他分子機(jī)制。致癌基因和腫瘤抑制基因都有助于癌癥的發(fā)生，HPV E6/E7致癌基因及腫瘤抑制基因等宮頸癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)因子的致癌機(jī)制及其相互作用的研究也越來(lái)越多，各因子具體如何相互影響，在病變發(fā)生、發(fā)展中所起作用的權(quán)重如何，有待進(jìn)一步研究。