李茹 李師默 熊戰(zhàn)之 趙崢 王宏寶

(1.淮安市農(nóng)科院 223001,2.淮陰師范學(xué)院 223300)

青枯病是一種由青枯勞爾氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一種頑固性土傳病害[1]。發(fā)病植物維管束遭到破壞,莖葉萎蔫下垂直至全部枯死,是世界上分布最廣、危害最大、造成損失最嚴(yán)重的植物病害之一,廣泛分布于熱帶、亞熱帶及溫帶地區(qū)[2],在我國青枯病主要發(fā)生在長江以南地區(qū)。該病以茄科作物受害最為嚴(yán)重,另外馬鈴薯、花生、辣椒、煙草、甘薯和姜等作物都有不同程度受害[2,3][l2]。由于迄今尚未找到防治此病的有效藥物和抗病品種,而生物防治一直是解決土傳病害的重要途經(jīng),并有利于減少環(huán)境污染、生產(chǎn)投入和農(nóng)藥的過度使用,符合農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的要求,已經(jīng)成為防治該病害的重點(diǎn)發(fā)展方向[4,5]。

我國從60年代初就已開始研究青枯病的生物防治。目前,青枯病拮抗菌集中在無致病力青枯病和內(nèi)生菌的研究。迄今為止,篩選出的生防菌株主要有芽孢桿菌、假單胞菌、菌根真菌及鏈霉菌等少數(shù)放線菌[14,15],但絕大多數(shù)拮抗菌株的篩選均是針對茄科勞爾氏菌的某一株,因此防治范圍較小,并且存在拮抗能力退化快,定殖能力弱,效果不穩(wěn)定,使用方法復(fù)雜等問題。

國內(nèi)外對茄子青枯菌生物防治的研究取得不少進(jìn)展,但目前茄子青枯病生物防治方法大都處于試驗(yàn)階段,進(jìn)入實(shí)際生產(chǎn)的很少。采用拮抗細(xì)菌、無致病力青枯菌菌株、鏈霉菌等方法能在一定程度上對茄子青枯病起到防治作用[2],但是在田間條件下的防治效果卻不太穩(wěn)定[16]。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上現(xiàn)主要采用化學(xué)農(nóng)藥、農(nóng)業(yè)防治等傳統(tǒng)防治方法防治茄子青枯病,但是其效果都不盡理想,且對生態(tài)環(huán)境造成嚴(yán)重污染,增加農(nóng)產(chǎn)品有毒化學(xué)物質(zhì)的殘留量;其生物防治具有無污染、不殺傷天敵、病菌不易產(chǎn)生抗藥性、有利于人畜安全及環(huán)境保護(hù),符合現(xiàn)代有機(jī)農(nóng)業(yè)發(fā)展的要求,受到人們廣泛重視[6-8]。如何篩選理想有益的生物防治菌株在田間使用,是生物防治面臨的關(guān)鍵問題,特別是生防微生物的環(huán)境和生態(tài)適應(yīng)能力是決定生物防治效果的關(guān)鍵環(huán)節(jié),加強(qiáng)這方面的研究將有效控制青枯病的發(fā)生和流行,保證防治效果的持續(xù)和穩(wěn)定。

1 材料與方法

1.1 材料

供試菌株：HY-123、HY-113、HY-7、HY-1、HY-6、HY-601,均來自本實(shí)驗(yàn)室。

茄子品種：萬利3號黑紫長茄。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)基 初始培養(yǎng)基(1L)：玉米粉10克;大豆蛋白胨5克;CaCl22H2O 1克;MnSO4H2O 1.39克;K2HPO41克,pH=7.0;放大培養(yǎng)基：麥芽糖 ：0.25%;玉米粉：0.5%;黃豆粉：0.5%;胰蛋白胨：0.5%;CaCl22H2O：0.05%;MnSO4H2O：0.05%;K2HPO4：0.1%pH=7.0 接種量：5%;最適發(fā)酵溫度：28℃ ;發(fā)酵時間：48小時。

1.2.2 接種及培養(yǎng) 發(fā)酵菌液離心5000rpm收集菌體,0.85%無菌生理鹽水懸浮,調(diào)整濃度為5.0×109CFU/ml。

1.2.3 田間試驗(yàn) 田間試驗(yàn)時間從2017年9月12日—11月7日,檢測的菌劑分為 A、B、C、D、E、F;A為HY-123菌株、B為HY-113菌株、C為HY-7菌株、D為HY-1菌株、E為HY-6菌株、F為HY-601菌株,清水處理為對照。定植時每株澆灌不同處理菌液250ml,6個處理與對照按隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn),每處理重復(fù)3次;每小區(qū)面積為3.2×6.0米,田間管理措施一致。

分別于藥后于33天、39天、47天統(tǒng)計(jì)病情,統(tǒng)計(jì)時進(jìn)行采摘,記錄茄子的總產(chǎn)量。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)病情況

從圖1可以看出,除HY-123處理未出現(xiàn)青枯病癥狀外,其余處理均出現(xiàn)不同程度的青枯病癥狀;各處理相比CK處理來看,除HY-123處理外,其余處理發(fā)病率均高于CK處理,其中HY-7處理和HY-6處理的發(fā)病率明顯高于其他處理,HY-7處理發(fā)病率為10.20%,HY-6處理發(fā)病率最高,為14.89%,說明除HY-123處理外,其余處理總現(xiàn)階段無明顯防治青枯病的效果。

圖1 藥后33天不同處理后茄子青枯病的發(fā)病率比較

從圖2可以看出,相比一周前的統(tǒng)計(jì)比較,HY-123處理出現(xiàn)青枯病癥狀,各處理相比CK處理,仍除HY-123處理外,其余處理發(fā)病率均高于CK處理,其中除CK、HY-113和HY-6處理發(fā)病率保持不變外,其余處理的發(fā)病率都有所增長,HY-7和HY-6處理的發(fā)病率仍明顯高于其他處理,HY-6處理發(fā)病率仍為最高,為14.89%,說明HY-123處理有一定的防治茄子青枯病,但其他處理現(xiàn)階段仍無明顯防治效果。

圖2 藥后39天不同處理后茄子青枯病的發(fā)病率比較

HY-123處理發(fā)病率最低,為6.17%,CK處理發(fā)病率最高,發(fā)病率高達(dá)46.88%,相比一周前的統(tǒng)計(jì)比較,CK處理青枯病的發(fā)病率十分迅速的增長,其余各處理相比上一周的統(tǒng)計(jì)比較,除HY-7處理外,其余處理發(fā)病率僅有略微增長,說明六種處理均有一定防治茄子青枯病的效果,在作物成熟后期防治效果較為明顯,且HY-123處理防治效果最好。

2.2 產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)

從圖3可以看出,HY-123處理產(chǎn)量最高,為392.20g,HY-601處理的產(chǎn)量最低,為156.73g,各處理相比CK處理,除F6處理外,其余處理平均產(chǎn)量均高于CK處理,其中除HY-113和CK處理的平均產(chǎn)量基本相同,HY-123和HY-6處理的平均產(chǎn)量明顯高于其他處理。說明除HY-601處理無明顯提高產(chǎn)量的效果,其余處理現(xiàn)階段有一定提高產(chǎn)量的效果。

圖3 藥后33天不同處理后茄子平均產(chǎn)量的比較

從圖3可以看出,相比一周前的統(tǒng)計(jì)比較,CK處理和HY-1+HY-6+095001處理的處理增長最為顯著。各處理相比CK處理,CK處理的平均產(chǎn)量有明顯增加,除HY-1+HY-6+095001處理外,其余處理平均產(chǎn)量均低于CK處理,其中F6處理的平均產(chǎn)量仍為最低。說明HY-1+HY-6+095001處理有明顯增加處理的效果。

圖4 藥后39天不同處理后茄子平均產(chǎn)量的比較

從圖4可以看出,HY-1處理產(chǎn)量最高,為623.40g,HY-601處理的產(chǎn)量仍為最低,為273.40g,各處理相比CK處理,除HY-1處理外,其余處理平均產(chǎn)量均略低于CK處理,其中除HY-113和HY-601處理的平均產(chǎn)量明顯低于CK處理外,其余處理的平均產(chǎn)量與CK處理基本相同,說明除HY-113和HY-601處理無明顯提高產(chǎn)量的效果,其余處理現(xiàn)階段有一定提高產(chǎn)量的效果。

圖5 藥后47天不同處理后茄子平均產(chǎn)量的比較

從圖5可以看出,HY-1處理產(chǎn)量最高,為925.60g,CK處理的產(chǎn)量為最低,為673.60g,各處理相比CK處理,各處理平均產(chǎn)量均有所高于CK處理,其中相比上一周的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)比較,CK處理的增長量有明顯降低,說明六種處理對有提高茄子產(chǎn)量均有一定的效果,其中HY-1處理提高最為顯著。

3 討論

本研究表明,使用A(HY-123)處理可明顯抑制茄子青枯病的發(fā)病率,且有較高的茄子產(chǎn)量,D(HY-1)處理雖抑制茄子青枯病的發(fā)病率無HY-123處理的抑制性顯著,但可以較高的提高茄子的產(chǎn)量。另從實(shí)驗(yàn)整體來看,青枯病在作物生長前期并無明顯癥狀,但在作物生長后期突然爆發(fā),導(dǎo)致作物大量死亡,使作物的經(jīng)濟(jì)效益大大降低,從而防治青枯病在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上必不可少。

青枯病的發(fā)生與土壤環(huán)境關(guān)系密切,青枯病的發(fā)生是土壤有害生物和環(huán)境條件共同作用的結(jié)果,土壤微生物組成及非生物因素如土壤的理化特性和營養(yǎng)狀況等都會對病害的發(fā)生和為害程度產(chǎn)生影響[9,10]。因此我們在田間噴施生防菌防治植物病害時,還需要進(jìn)一步研究生防菌與土壤環(huán)境中其他微生物種群的消長規(guī)律,促進(jìn)有益微生物的生長,從而保證生防菌能更好地發(fā)揮生防作用,改善了土壤微生物的營養(yǎng)條件,提高了土壤微生物多樣性,從生態(tài)水平上抑制了茄子青枯病的發(fā)生[11,12]。加強(qiáng)生物防治,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)土壤穩(wěn)定、適度的生態(tài)肥力,抑制土傳病害的發(fā)生,實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展,而實(shí)現(xiàn)高效、簡便、經(jīng)濟(jì)地防治植物青枯病的目的[13]。