易兵，戚青林

(萍鄉(xiāng)市婦幼保健院生殖健康科，江西 萍鄉(xiāng)337000)

隨著經(jīng)濟發(fā)展，環(huán)境污染問題日益嚴重，不孕不育患者在人群中所占比例呈上升趨勢。在育齡人群中有10%～15%的比例存在不育問題，而男性不育患者約占50%[1]。目前常規(guī)精液分析在評估男性生育能力方面是一項重要指標，精液分析中的精液液化程度、精子濃度、精子活力等參數(shù)是評估精液質(zhì)量的重要指標，對于男性不育癥的臨床病因分析具有重要價值[2]。隨著生活壓力各方面的增大，女方生育年齡的延遲對生育存在產(chǎn)生的不良影響目前已成為共識，而作為另一半的男性，年齡因素對生育能力的影響也不可忽視[3]。

本研究通過對贛西地區(qū)男性不育癥患者進行精液常規(guī)分析和精子畸形率檢測，分析年齡與精液常規(guī)及精子形態(tài)的相關(guān)性，旨在了解本地區(qū)男性因素所致不育的情況，為臨床男性不育癥的診斷和治療提供重要依據(jù)。

1 對象與方法

1．1 研究對象與分組 選取2016年1月1日到2016年12月31日前來我院生殖中心男科實驗室進行精液檢測的1500例患者作為研究對象，年齡18～55 歲，平均 32．4±11．4 歲，主訴婚后同居 1 年以上未采取任何避孕措施而未育，體格檢測排除睪丸、附睪、外傷、輸精管異常，無遺傳性家族病史，不包括無精患者。

1．2 精液常規(guī)檢測 按照 《WHO人類精液檢查與處理實驗室手冊》（第5版）的標準要求所有檢測對象需禁欲2～7d采集標本，于本科取精室手淫法取精液，采用一次性無毒、帶蓋塑料杯收集精液，立即置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中保溫，記錄接收時間，待精液液化后取出觀察精液顏色、氣味、pH試紙測量pH值，采用稱重法測量體積。黏稠度檢測采用一次性塑料吸管吸取精液標本，輕輕擠壓塑料吸管讓精液借助重力滴下，正常精液從塑料吸管口成不連續(xù)的小滴滴下，如果精液黏稠度異常，精液液滴會形成大于2cm的拉絲。精液采用上海北昂精液分析系統(tǒng)進行計算機輔助分析（CASA），分析精子濃度、精子活動率等參數(shù)。精子運動分類按照WHO第5版標準[4]：前向運動(PR)：精子主動地呈直線或沿一大圓周運動，不管精子速度如何；非前向運動(NP)：所有其他非前向運動的形式，如以小圓周泳動，尾部動力幾乎不能驅(qū)使頭部移動，或者只能觀察到尾部擺動。不活動(IM)：沒有運動。拍照系統(tǒng)至少觀察5個視野，對至少200個精子進行分級，計算PR、NP和IM的精子百分率。

1．3 精液質(zhì)量分析標準 按照第5版 《WHO人類精液檢查與處理實驗室手冊》作為精子質(zhì)量分析的參考標準[4]：⑴精液體積≥1．5ml；⑵精液 pH≥7．2； ⑶精子濃度≥15×106/ml； ⑷PR 精子比例≥32%；⑸總活力(PR+NP精子比例)≥40%；⑹精子存活率≥58%。若各項指標同時達到上述參考值，則判定精液質(zhì)量正常；只要有一項異常時，則判定精液質(zhì)量異常；異常精液例數(shù)占該年齡組總例數(shù)的百分比為精液異常率。

1．4 精子形態(tài)率檢測 載玻片預(yù)先用擦鏡紙擦干凈，取1滴完全液化的精液置于處理過的載玻片上，采用推片法拉薄涂片，空氣下自然晾干，嚴格按照試劑盒說明書染色步驟先加染液A3-4滴，10～15s后加染液B3-4滴。10～15s后，用自來水輕輕沖洗，晾干，在顯微鏡下觀察200個精子形態(tài)，得出正常形態(tài)精子的百分率，正常形態(tài)精子率≥4%為正常精子形態(tài)。

1．5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 20．0軟件進行統(tǒng)計分析，計量數(shù)據(jù)以均值±標準差表示，比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用方差分析，計數(shù)數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗，以P＜0．05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2．1 贛西地區(qū)男性不育患者精液質(zhì)量分析 1500例男性不育患者中，精液質(zhì)量分析均正常者316例，占 21．1%；精液質(zhì)量異常者 1184 例，占 78．9%。異常組精液質(zhì)量與正常組精液質(zhì)量比較，各精液質(zhì)量指標中，異常組的精液量呈現(xiàn)顯著下降 (P＜0．05)，而精子濃度、活率、前向運動百分率及正常形態(tài)率均呈現(xiàn)極顯著下降(P＜0．01)，其中無精子癥患者26例，占1．7%。 見表1。

2．2 異常精液分類統(tǒng)計1184例異常精液中，除去26例無精子癥患者外，主要表現(xiàn)為前向運動百分率下降（PR＜32%)，占 77．5%；其余依次為精子活率下降占59．2%、精子濃度下降占 18．7%、精液量異常占12．6%。 見表2。

表1 1500例精液質(zhì)量分析結(jié)果

表2 1184例精液常規(guī)檢測結(jié)果分析

2．3 1500例男性不育癥患者中，精液液化異常者（包括精液不液化者和精液不完全液化者）289例，占19．3%，其中精液不液化者156例，液化不完全者133例，精液液化異常組精液質(zhì)量與液化正常組精液質(zhì)量比較，各精液質(zhì)量指標中，異常組的精子活率及前向運動百分率呈現(xiàn)顯著下降 (P＜0．05)，而兩組精液精子濃度、正常形態(tài)率無顯著性差異（P＞0．05）。精液液化異常者與正常者精液參數(shù)比較見表3。

表3 精液液化異常者部分參數(shù)比較

2．4 不同年齡組精液異常率對比分析 從表4可以看出，＞40歲年齡組患者精液異常率最高，與其他各年齡組相比，患者精液異常率呈顯著性差異（P＜0．05）。其他各年齡組患者之間精液異常率均無顯著性差異（P＞0．05）。

表4 不同年齡組精液異常率對比分析

2．5 不同年齡組的精液質(zhì)量 不同年齡組精液質(zhì)量對比分析結(jié)果見表5，單因素方差分析顯示精液量和pH值在各組組間均無顯著性差異（P＞0．05）。～40歲年齡組精液濃度、前向運動百分率及精子總活力均低于其他3個年齡組，呈相對下降趨勢，＞40歲年齡組患者與其他各年齡組相比，患者精液異常率呈顯著性差異（P＜0．05），但其他各組間差異無統(tǒng)計學意義 （P＞0．05）。 通過對比分析發(fā)現(xiàn)，～30歲組精子正常形態(tài)率最高，＞40歲年齡組精子正常形態(tài)率比例最低，但是各年齡組間的精子正常形態(tài)率無顯著性差異（P＞0．05）。

表5 不同年齡組精液質(zhì)量對比分析結(jié)果

3 討論

隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展的同時伴隨環(huán)境污染加劇，食品安全問題日益加重，同時隨著人們的工作壓力加大以及生活習慣改變不孕不育的發(fā)生率逐年遞增[5]。研究報道育齡人群中存在不育問題的夫婦占10%～15%，其中由男性因素導(dǎo)致的不育占50%[6]。然而，長期以來人們對女性年齡對生育影響的關(guān)注比較普遍，對年齡對男性生育能力研究報道的較少[7]。精液質(zhì)量常規(guī)分析作為一項基本的檢查手段運用于男性不育癥的診治、男性生殖生理研究及男性節(jié)育措施效果評價的過程中[8]。

本研究對贛西地區(qū)1500例男性不育患者精液的精子活率、精液量、精子密度、活力、pH值等指標進行分析。發(fā)現(xiàn)1500例男性不育患者中，精液質(zhì)量分析均正常者316例，占21．1%；精液質(zhì)量異常者1184例，占78．9%。本地區(qū)男性不育患者精液質(zhì)量低于全國多中心調(diào)查結(jié)果的平均水平(43．2%，2003年)[9]而與劉冰等[10]報道的佛山地區(qū)的結(jié)果相近。常規(guī)精液檢測項目中異常率最高的是前向運動百分率減少，其次分別為活率下降、精子濃度降低及精液量減少。這些結(jié)果表明弱精子癥是贛西地區(qū)精液異常的主要表現(xiàn)。這些結(jié)果和付莉等[11]報道的川南地區(qū)男性不育的結(jié)果相似。本地區(qū)屬于煤炭開采和鋼鐵生產(chǎn)區(qū)，一部分就診不育患者有長期從事礦產(chǎn)開采的經(jīng)歷，加上本地區(qū)長期由于礦產(chǎn)開采導(dǎo)致的環(huán)境和水污染以及近年來人們工作壓力的增大不良生活習慣的增加，都會對精液質(zhì)量產(chǎn)生不利影響。

精液液化是通過精囊腺分泌的凝固蛋白和前列腺分泌的液化因子一起共同作用的結(jié)果，一旦精囊腺或前列腺分泌失衡，會導(dǎo)致精液液化不良，從而使精液黏稠度增加，進而影響精液中精子的活力及精子穿透宮頸黏液的能力，從而影響其受孕過程[12]。從表3中可見1500例男性不育癥患者中，精液液化異常者（包括精液不液化者和精液不完全液化者）289例，占19．3%，精液液化異常組精液質(zhì)量與液化正常組精液質(zhì)量比較，發(fā)現(xiàn)各精液質(zhì)量指標中，液化異常組的精子活率及前向運動百分率呈現(xiàn)顯著下降(P＜0．05)，而兩組精液精子濃度、正常形態(tài)率無顯著性差異（P＞0．05），原因可能是由于液化異常的精漿中蛋白類相互網(wǎng)織從而使精子活動空間減少進而影響了精子的活力有關(guān)，這些結(jié)果與以往的報道相符[13]。

男性不育患者精液質(zhì)量和年齡之間是否存在相關(guān)性一直存在不同看法[14]，有些學者研究認為僅僅單從內(nèi)分泌學角度研究發(fā)現(xiàn)年齡不太影響性激素分泌及睪丸生精細胞的功能[15]。而另外一些研究發(fā)現(xiàn)隨著男性年齡的增長，其精子的發(fā)生與睪丸的內(nèi)分泌功能發(fā)生改變的幾率明顯增加，精液濃度、前向運動百分率及精子總活力普遍降低[16]。本研究也證實了上述觀點，＞40歲年齡組患者精液異常率最高，精液濃度、前向運動百分率及精子總活力均低于其他3個年齡組，呈相對下降趨勢，＞40歲年齡組患者與其他各年齡組相比，患者精液異常率呈顯著性差異（P＜0．05），可能隨著年齡增長，男性體內(nèi)有害物質(zhì)不斷積累、生理機能衰退、機體功能代謝下降、其體內(nèi)睪丸的生精功能不斷下降，提示男性也有合適的生育年齡，鑒于40歲以上的男性患者其精子各項指標下降趨勢明顯，可以考慮將40歲作為評價男性生育健康的一個分水嶺，同時可以考慮將年齡作為男性不育癥的原因之一。

綜上所述，本地區(qū)男性不育患者精液異常的主要原因是精子活力和活動率下降，精液濃度降低。此外本研究提示在評估男性精液質(zhì)量的時候要考慮年齡對精液質(zhì)量的影響。建議本地區(qū)的不孕不育患者及時進行醫(yī)學檢查和治療，增加懷孕機會。

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