詹虎 蔡燕瑜 許雅輝 邱世惠

（福建省晉江市疾病預防控制中心 福建 晉江 362200）

結核病是由結核分枝桿菌感染引起的慢性傳染病，是當今世界危害人類安全的重大疾病之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織評估，每年約有870萬例新發(fā)肺結核患者，中國是世界22個結核病高負擔國家之一，每年新患者數(shù)僅次于印度，位居世界第二位[1]。一個世紀以來，人類在結核病的防治上做了大量工作，有效遏制了肺結核的傳播。但是隨著耐藥結核病例的出現(xiàn)，國內(nèi)結核病的防控面臨著巨大的挑戰(zhàn)。2012年以后，晉江市疾病預防控制中心開展了結核桿菌的培養(yǎng)工作。本文對2013年1月—2015年12月期間在晉江市疾病預防控制中心培養(yǎng)的440例結核桿菌進行統(tǒng)計分析，了解晉江地區(qū)結核桿菌培養(yǎng)結果。

1.材料與方法

1.1 材料

泉州市疾病預防控制中心統(tǒng)一發(fā)放的珠海BASO生物技術公司的“萋-尼”抗酸染色試劑盒與改良酸性羅氏培養(yǎng)基。

1.2 標本來源

2013年1月—2015年12月在晉江市疾病預防控制中心結防科就診的疑似結核病人，初診病人取3份痰標本（即時痰、夜間痰和清晨痰），復診病人取2份痰標本（夜間痰和清晨痰）。每份痰標本為3～5ml，用“萋-尼”抗酸染色法進行染色鏡檢，陽性標本按照分類納入痰培養(yǎng)對象。具體分類如下：

1.2.1 新患者從未應用過抗結核藥物治療或者應用抗結核藥物治療不足1個月的新病人。

1.2.2 復發(fā) 過去明確診斷肺結核，完成規(guī)定的治療療程后，醫(yī)生診斷已治愈，現(xiàn)痰涂片又出現(xiàn)陽性的肺結核患者。

1.2.3 返回 已確診的患者治療≥1個月，中斷治療≥2個月后，再次到結防機構接受治療的患者。

1.2.4 初治失敗 新涂陽患者治療第5個月末或者療程結束時，痰涂片檢查仍是陽性的患者。

1.2.5 復治失敗 復治第5個月末或者療程結束時，痰涂片檢查陽性的患者。

1.2.6 初治2月末或3月末陽性患者新涂陽患者治療第2月或3月末，痰涂片檢查陽性。

1.3 痰培養(yǎng)方法

選擇痰涂片陽性級別高的2份標本進行培養(yǎng)，方法是改良

與即刻檢測結果相比，室溫放置1h、即刻分離血清后-20℃冷凍24、72h后血清LDH、FFA、m-AST水平變化不明顯，組間差異不顯著（P＞0.05）；2～8℃冷藏過夜、室溫放置3、6h、室溫放置6h再-20℃冷凍24、72h血清LDH、FFA水平均升高，血清m-AST水平降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表。羅氏培養(yǎng)基培養(yǎng)法[2]。培養(yǎng)基采購于珠海BASO生物技術有限公司，由泉州市疾病預防控制中心驗收合格后統(tǒng)一發(fā)放。

1.4 質(zhì)量控制

痰涂片質(zhì)控按照《中國結核病防治規(guī)劃痰涂片鏡檢標準化操作及質(zhì)量保證手冊》[3]進行，痰培養(yǎng)新患者的涂陽培陰率＜10%，培養(yǎng)污染率＜5%。

1.5 統(tǒng)計學處理

應用SPSS13.0 for windows軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，對結果進行χ2檢驗，取P＜0.025為統(tǒng)計學有顯著差異。

2.結果

自2013年1月—2015年12月，晉江市疾控中心共培養(yǎng)440例，培養(yǎng)陽性318例，陰性122例，污染0例，總體培養(yǎng)陽性率為72.27%。每例標本各接種4管，總共1760管，污染16管，污染率為0.91%。新患者和復發(fā)的培養(yǎng)陽性率分別為95.57%和87.37% ，二者比較有統(tǒng)計學意義（χ2=6.28，P＜0.025）。初治失敗和初治2/3月末陽性人群的培養(yǎng)陽性率是53.49%、41.13%，二者無統(tǒng)計學意義（χ2=2.04，0.1＜P＜0.25）。把返回和復治失敗患者合二為一，與復發(fā)人群相比，無統(tǒng)計學意義（χ2=0.19，P＞0.5）。具體結果見表。

表 不同分類患者培養(yǎng)結果

3.討論

從本次實驗結果來看，新患者的培養(yǎng)陽性率高于復發(fā)患者，且有統(tǒng)計學意義，證明新患者的菌株很容易在羅氏培養(yǎng)基上生長，但復發(fā)患者，由于之前接受過抗結核治療，導致有些菌株是死菌，或者菌株的活性低，具體表現(xiàn)為涂片陽性、培養(yǎng)陰性。新患者有6例培養(yǎng)陰性，陰性率4.03%，低于質(zhì)控要求的10%，高于黃曉偉[4]等報道的泉州地區(qū)的3.05%，可能與實驗者的操作習慣有關，如前處理加入NaOH過多，或者前處理時間過長等，致使菌株不容易存活。初治失敗和初治2/3月末陽性的患者培養(yǎng)陽性率比較低，推測抗結核藥物的使用，使化療患者痰標本的活力低，導致涂片陽性培養(yǎng)陰性和陽性生長時間滯后[5]。返回和復治失敗者，與復發(fā)患者一樣，由于已經(jīng)服用抗結核藥，所以培養(yǎng)陽性率，一般都低于新患者。

本次實驗污染0例，有16管污染，因此以后的實驗中，還需要更加嚴格操作，合理安排同批次的標本，嚴格控制NaOH的量和前處理時間。

在以后的痰培養(yǎng)工作中，還需加強醫(yī)生與就診病人的溝通，特別是“初治失敗”和“初治2/3月末陽性”患者，指導留取合格的痰標本[6]。同時，未使用完的痰標本及時冷凍保存，出現(xiàn)陰性或者污染時再次培養(yǎng)，提高培養(yǎng)陽性率。

[1] World Health Organization.Global tuberculosis report 2012 [R].Geneva:World Health Organization,2012:11.

[2]中國防癆協(xié)會基礎專業(yè)委員會.結核病診斷實驗室檢驗規(guī)程[M].北京:中國教育文化出版社，2006:33-37.

[3]中國疾病預防控制中心.中國結核病防治規(guī)劃痰涂片鏡檢標準化操作及質(zhì)量保證手冊[M].北京:中國協(xié)和醫(yī)科大學出版社，2009:7-34.

[4]黃曉偉，吳艷紅.878例肺結核患者痰培養(yǎng)結果分析[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學，2016，43(8):762-764.

[5]嚴碧涯.結核病學[M].北京:北京出版社，2003:14.

[6]李永紅.痰培養(yǎng)標本不合格原因分析及對策[J].現(xiàn)代臨床護理，2014，13(5):21-23.