李曉鋒， 馬 陽， 劉 波， 余陵峰， 熊 琪*

(1.湖北省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所/動物胚胎工程及分子育種湖北省重點實驗室，湖北 武漢 430064；2.藍田縣動物疾病預防控制中心，陜西 藍田 710500；3.沙洋縣漢江牛業(yè)發(fā)展有限公司，湖北 荊門 448200；4.湖北省畜禽育種中心，湖北 武漢 430070)

隨著我國肉牛業(yè)的快速發(fā)展，規(guī)?；蕡霾粩嘤楷F(xiàn)，育肥牛源日趨緊張，而牛是單胎動物，繁殖周期長，母牛繁育已成為制約肉牛產業(yè)發(fā)展的瓶頸環(huán)節(jié)。青年牛及時、成年牛盡快配種，縮短空懷期，是提高母牛繁殖率的關鍵。當前人工授精技術已得到廣泛應用，在品種改良、群體選育、優(yōu)秀種公?？焖偻茝V等方面發(fā)揮了重要作用。母牛正常的繁殖機能、及時準確的發(fā)情鑒定是牛人工授精的基礎，但生產中也會遇到安靜發(fā)情、卵巢靜止、卵巢囊腫、持久黃體等異常狀況，影響母牛的正常發(fā)情和配種受胎，延長產犢間隔，增加淘汰率，抬高飼養(yǎng)成本，給母牛養(yǎng)殖帶來很大損失。

定時輸精是在同期發(fā)情、人工授精技術的基礎上發(fā)展而來，近年來在養(yǎng)牛業(yè)中得到了較廣泛的應用。該技術通過施加外源激素，調控卵泡發(fā)育時間，使母牛在預定的時期內發(fā)情并排卵，在預定的時間實施人工授精，可省去發(fā)情觀察環(huán)節(jié)、提高配種效率，能有效解決安靜發(fā)情、持久黃體等問題，提高母牛繁殖效率，可調節(jié)配種時間、實現(xiàn)集中或錯峰產犢，適合規(guī)模化母牛繁育場應用。據(jù)張力青(2016)[1]、劉念銳(2011)[2]、于淼(2017)[3]、程蕾(2011)[4]等報道，與自然發(fā)情、常規(guī)人工授精技術相比，母牛定時輸精的受胎率可提高9～31個百分點。

由于定時輸精客觀上增加了試劑成本，為了準確評價該技術的效果，更好地指導生產應用，筆者將肉牛繁育場3年來的應用情況整理分析如下，供同行參考。

1 材料與方法

1.1 時間地點

試驗地點位于湖北省沙洋縣，整理分析某肉牛繁育場3年來的配種孕檢記錄，配種記錄的時間為2015年7月至2017年12月，孕檢記錄延續(xù)到2018年4月。

1.2 試驗牛及分組

牛群為西門塔爾牛，膘情中等或中等偏上，直腸檢查為空懷、子宮及生殖道健康狀況良好。青年牛滿16月齡后有自然發(fā)情者，常規(guī)人工授精；滿20月齡、且未觀察到自然發(fā)情者，適時采用定時輸精。成年牛產后有自然發(fā)情者，常規(guī)授精；產后60 d未觀察到發(fā)情者，適時采用定時輸精。

1.3 試劑耗材

注射用促性腺激素釋放激素(GnRH)、注射用氯前列醇鈉(PGF2α)均購自寧波市三生藥業(yè)有限公司，注射器、手套等耗材市購，輸精槍、恒溫水浴鍋等常規(guī)人工授精器械設備。

1.4 定時輸精程序及妊娠診斷

第0天，母牛健康檢查，肌注GnRH，100 μg/頭；第7天，肌注PGF2α，0.4 mg/頭；第9天，肌注GnRH，100 μg/頭；根據(jù)母牛卵泡發(fā)育狀況，第10天上午或下午人工授精。在激素處理期間若母牛出現(xiàn)發(fā)情，可根據(jù)卵泡發(fā)育狀況進行人工授精。授精20 d后，通過母牛的發(fā)情表現(xiàn)進行初步判斷，有必要實施直腸檢查；授精50 d后，通過直腸檢查法進行確診。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

分年齡(青年牛、成年牛)和配種季節(jié)(春季3-5月份、夏季6-9月份、秋季10-11月份、冬季12月至次年2月份)，分析定時輸精與常規(guī)授精的母牛第一情期受胎率。

Excel軟件進行數(shù)據(jù)處理與分析，χ2法檢驗差異的顯著性。

2 結果與分析

2.1 不同年份的受胎率

不同年份之間的定時輸精受胎率差異不顯著(P>0.05)，不同年份之間的常規(guī)授精受胎率差異不顯著(P>0.05)，詳見表1。因定時輸精與常規(guī)授精的母牛生理階段不同，因此兩者間不作比較。

表1 不同年份的受胎率 %

2.2 不同年齡的受胎率

青年牛的受胎率極顯著高于成年牛(P<0.01)。青年牛與成年牛的定時輸精受胎率差異不顯著(P>0.05)、常規(guī)授精受胎率差異顯著(P<0.05)，詳見表2。

表2 不同年齡的受胎率 %

2.3 不同季節(jié)的受胎率

在定時輸精方面，冬季的受胎率極顯著高于夏季(P<0.01)，其余差異不顯著(P>0.05)，詳見表3。在常規(guī)授精方面，春季的受胎率顯著高于秋季(P<0.05)，冬季的受胎率極顯著高于秋季(P<0.01)、顯著高于夏季(P<0.05)，其余差異不顯著(P>0.05)。

表3 不同季節(jié)的受胎率 %

2.4 經(jīng)濟效益分析

在一個情期內，定時輸精比常規(guī)人工授精增加試劑及耗材成本36元/頭。母牛每天的飼養(yǎng)費約為12元/頭，按定時輸精平均44%的受胎率計，提前一個情期受孕可節(jié)約飼養(yǎng)成本110元(12元/天×21天×44%)。

3 討 論

3.1 定時輸精的對象

定時輸精通過激素注射，調節(jié)母牛生殖激素分泌，可促進卵泡發(fā)育、提高受胎率。第一次注射GnRH可促進優(yōu)勢卵泡成熟、排卵和黃體形成，以及誘導新一輪的卵泡發(fā)育，第二次注射GnRH可促進新生卵泡發(fā)育成熟和排卵，注射PG可溶解黃體，誘發(fā)母牛發(fā)情[5]。根據(jù)其原理，定時輸精對卵巢靜止、持久黃體、隱性發(fā)情等母牛具有較好效果，本次試驗對象為未觀察到發(fā)情的滿20月齡的青年牛、產后60 d的成年牛，第一期情受胎率分別為45.1%和43.8%，支持了這一觀點。

3.2 定時輸精的時機

青年牛的配種一般在16～18月齡，滿20月齡、且未發(fā)現(xiàn)發(fā)情的青年牛通常是卵巢靜止或隱性發(fā)情，可以實施定時輸精。成年牛通常是分娩40 d后發(fā)情配種(本場2017年151頭牛的平均產后配種時間為64.5±15.4 d)，產后60 d未發(fā)現(xiàn)發(fā)情，則可能存在卵巢靜止、持久黃體、隱性發(fā)情等問題，應及時實施定時輸精。從本次試驗結果來看，為獲得較好的效果，應避免在夏季開展定時輸精，這與李文瑞等(2017)[6]的研究結果一致。在定時輸精的激素處理期間，少數(shù)?？赡芮『锰幱诼雅莩墒炱冢贕nRH的作用下有發(fā)情表現(xiàn)，此時應實施直腸檢查，根據(jù)卵泡發(fā)育狀況適時授精，而不應繼續(xù)既定流程。

3.3 定時輸精的成功率及效益

本次試驗2種授精方法的受胎率存在極顯著差異，應該是試驗對象的差異所致，不能說明定時輸精技術不如常規(guī)人工授精，兩者各有應用的側重點。在實際生產中，對于有可能正常發(fā)情配種的牛(16～18月齡的青年牛，產后40～60 d的成年牛)是否有必要實施定時輸精有待商榷，筆者認為并不是所有的牛都有必要實施定時輸精。從經(jīng)濟角度分析，實施定時輸精、提前一個情期受孕，平均可節(jié)約母牛飼養(yǎng)成本110元/頭，但施加外源激素是否會干擾母牛正常的內分泌，造成下個胎次發(fā)情配種困難等潛在風險，目前尚未見到相關報道。