姚高友，吳浩敏，譚 杰，吳羽媛，夏 靜，劉志剛

( 1.廣東海洋大學 水產學院，廣東 湛江524088； 2.廣東省南海經濟無脊椎動物健康養(yǎng)殖工程研究中心，廣東 湛江 524088； 3.湛江銀浪海洋生物技術有限公司，廣東 湛江524022 )

方斑東風螺(Babyloniaareolata)屬腹足綱、蛾螺科、東風螺屬，俗稱花螺、海豬螺，主要分布于東南亞地區(qū)及我國東、南沿海。其肉質鮮美，營養(yǎng)價值高，深受廣大消費者的青睞，是國內外市場近年十分暢銷的優(yōu)質海產貝類[1]。但因海區(qū)污染和過度捕撈，導致野生資源匱乏[2]，因此，方斑東風螺的人工增養(yǎng)殖技術研究日益受到廣泛的重視，對方斑東風螺的種苗繁育[3-5]、養(yǎng)殖[6-10]等關鍵技術已有較多研究，促進了產業(yè)的發(fā)展，而目前養(yǎng)殖方斑東風螺的苗種主要來自人工繁育苗，但人工苗種的生產常因餌料、水質、病害、氣候等條件的影響而很不穩(wěn)定，限制了方斑東風螺產業(yè)的發(fā)展。

方斑東風螺早期發(fā)育主要依靠自身卵黃的營養(yǎng)物質，當發(fā)育至面盤幼蟲時開始從外界攝入營養(yǎng)物質[11]，因此，餌料是方斑東風螺幼蟲生長發(fā)育的物質和能量基礎，對幼蟲的生長及存活起著關鍵作用。目前方斑東風螺幼蟲餌料以單胞藻為主，而單胞藻培養(yǎng)是一項比較繁重的工作，且在培養(yǎng)中易受天氣、原生生物、人為操作等諸多因素影響，生產極不穩(wěn)定，影響幼蟲的餌料供應，從而給育苗生產帶來嚴重的影響[12]。開發(fā)方斑東風螺幼蟲的人工餌料，有利于降低育苗生產中的生產成本及風險，提高經濟效益。目前，國內外在用人工餌料替代天然餌料開展貝類育苗方面已做過較多研究[12-18]，這些研究結果證明人工餌料能夠部分甚至完全替代天然餌料并取得良好的效果。因此尋找合適的人工餌料來全部或部分代替天然餌料對方斑東風螺育苗生產具有重要意義。本試驗研究了在不同人工餌料及與添加劑混合投喂條件下方斑東風螺幼蟲生長、存活上的差異，旨在為方斑東風螺幼蟲人工配合飼料的開發(fā)及人工育苗技術的改進提供理論和實踐指導。

1 材料與方法

1.1 幼蟲培育

試驗幼蟲為來自湛江銀浪海洋生物技術有限公司的早期面盤幼蟲，幼蟲平均殼高(518.8±24.50) μm。

1.2 試驗設計

試驗分為6組，每組投喂不同的人工餌料，各組設2個重復。試驗開始前隨機抽取40個幼蟲測量初始殼高。試驗期間每日從各組中隨機抽取30個幼蟲測量殼高并在試驗的第6 d、第10 d、第14 d統(tǒng)計各驗組幼蟲的存活率。試驗結束時計算2～8 d、10～12 d、14 d的殼高特定生長率。殼高的特定生長率(SGR)按下式計算:

SGR/%·d-1=(lnL2-lnL1)/t×100%

式中L1和L2分別為幼蟲的初始殼高(μm)和試驗結束時的殼高(μm)，t為試驗持續(xù)時間(d)。

1.3 日常管理

試驗在白色聚乙烯塑料桶中進行，水溫(29.0±0.3) ℃，鹽度28.7±0.3，幼蟲密度4～5 個/mL。餌料用400目篩絹袋進行過濾，每日8:00和16:00投喂，第1 d投喂人工餌料1.5 g，混合組另投喂0.5 g添加劑，早晚投喂量比例為1∶2，每日的投喂量在前日的基礎上增加10%。投喂前觀察幼蟲胃飽滿度，若幼蟲對飼料的消化速度慢，可在試驗組的飼料中適當添加消化整腸素。試驗人工餌料來自博尚生物飼料有限公司，各飼料的主要營養(yǎng)成分如下：

蝦片(博尚牌高級雙色蝦片)：主要成分為魚粉、南極蝦粉、海蟲粉等。其營養(yǎng)組成為：粗蛋白50%，粗脂肪3%，粗纖維3%，灰分17%，水分10%。

黑粒(八卦牌黑粒寶)：使主要成分為白魚粉、南極蝦粉、烏賊粉等。其營養(yǎng)組成為：粗蛋白40%，粗脂肪6%，粗纖維3%，灰分16%，水分10%。

螺旋藻粉(八卦牌螺旋藻)：主要成分為螺旋藻。其營養(yǎng)組成為：粗蛋白65%，粗脂肪5%，粗纖維3%，灰分10%，水分7%。

B.P.(博尚牌B.P.)：主要成分為蛋粉、酪蛋白、魚肉蛋白等。其營養(yǎng)組成為：粗蛋白43%，粗脂肪15%，粗纖維3%，灰分5%，水分10%。

蝦元(八卦牌蝦元)：為飼料添加劑，含有維生素A、B1、B2、D、E等。

消化整腸素：為飼料添加劑，由多種酵素和乳酸菌組成。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)用平均值±標準差表示，使用SPSS 19.0軟件進行單因素方差分析，并結合Duncan′s法進行多重比較，檢驗各試驗組間的顯著性差異,顯著性水平為0.05，比較結果的顯著性與否僅限于統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 不同人工餌料條件下方斑東風螺幼蟲存活率

3種混合投喂試驗組幼蟲存活率高于3種單一投喂試驗組?；旌贤段乖囼灲M中，螺旋藻粉+B.P.組存活率顯著高于黑粒+蝦元和蝦片+蝦元組；單一投喂試驗組中，單獨投喂螺旋藻粉組方斑東風螺幼蟲存活率第6 d和10 d顯著高于其他各組，第14 d幼蟲存活率顯著低于單獨投喂蝦片和黑粒組(P<0.05)(表1)。

表1 不同餌料條件下方斑東風螺幼蟲的存活率 %

注：同列數(shù)據(jù)不同字母表示差異顯著(P<0.05).

2.2 不同人工餌料條件下方斑東風螺幼蟲殼高生長

前4 d各試驗組差異不顯著(P>0.05)；第6～8 d，3種混合投喂試驗組幼蟲殼高高于3種單一投喂試驗組，混合餌料投喂組中，螺旋藻粉+B.P.組殼高顯著高于其他各組(P<0.05)，蝦片+蝦元和黑粒+蝦元間差異不顯著(P>0.05)。單一投喂組中，單獨投喂黑粒組幼蟲殼高顯著低于其他各組。第10～12 d，3種混合投喂試驗組幼蟲殼高與相對應的3種單一投喂試驗組相比仍具有明顯的生長優(yōu)勢，螺旋藻粉+B.P.組顯著高于其他各組，單獨投喂螺旋藻粉幼蟲殼高顯著低于其他各組(P<0.05)。第14 d，混合投喂螺旋藻粉+B.P.組殼高最高，但與其他混合投喂組及單獨投喂黑粒組幼蟲殼高差異不顯著(P>0.05)，單獨投喂螺旋藻粉組幼蟲殼高顯著低于其他各組(P<0.05)。

試驗期內3種混合投喂試驗組幼蟲殼高特定生長率高于3種單一投喂試驗組(圖1)，混合投喂組中，2～8 d螺旋藻粉+B.P.組(3.96%/d)殼高特定生長率顯著高于其他各組(P<0.05)，單獨投喂螺旋藻粉(2.06%/d)顯著低于其他各組；10～12 d黑粒+蝦元組殼高特定生長率最高(4.54%/d)，顯著高于螺旋藻粉+B.P.組(3.40%/d)，與蝦片+蝦元組(3.97%/d)差異不顯著；14 d內單獨投喂螺旋藻粉(2.05%/d)方斑東風螺幼蟲殼高顯著低于其他各組，螺旋藻粉+B.P.殼高特定生長率最高(3.68%/d)，但與黑粒+蝦元組(3.59%/d)和蝦片+蝦元組(3.31%/d)差異不顯著(P>0.05)。

表2 不同餌料條件下方斑東風螺幼蟲殼高 μm

注：同列數(shù)據(jù)不同字母表示差異顯著(P<0.05).

圖1 不同餌料條件下方斑東風螺幼蟲殼高特定生長率

3 討 論

3.1 幼蟲在不同生長階段對餌料的選擇

研究表明，貝類幼蟲的最適餌料隨生長發(fā)育的推進而不同。在貝類浮游幼蟲階段，投喂金藻較其他藻類的效果更好，但對于已完成變態(tài)發(fā)育的稚貝，投喂金藻的稚貝生長優(yōu)勢并不明顯[19-22]。基于這種現(xiàn)象，王慶志等[23]認為，由于營養(yǎng)需求的不同，貝類幼蟲在不同生長階段之間存在一個營養(yǎng)需求轉化的過渡期。方斑東風螺幼蟲在匍匐幼蟲前主要以浮游藻類為食，當變態(tài)為匍匐幼蟲時逐漸轉變?yōu)槿馐承訹24]，開始逐漸以攝食動物性餌料為主。本研究發(fā)現(xiàn)，前期單獨投喂螺旋藻粉，方斑東風螺幼蟲存活率最高，但后期降為最低，顯著低于單獨投喂蝦片與黑粒組。原因可能是蝦片、黑粒是動物性餌料，而螺旋藻粉則是植物性餌料。試驗后期方斑東風螺幼蟲發(fā)育至匍匐幼蟲，完成變態(tài)發(fā)育后的營養(yǎng)需求及食性開始發(fā)生變化，更加偏向動物性餌料并大幅減少對螺旋藻粉的攝取。單獨投喂螺旋藻粉已經不能滿足此階段稚貝的生理及營養(yǎng)需求并開始大量死亡。

3.2 配合飼料生化組成及飼料添加劑對方斑東風螺幼蟲生長及存活的影響

由于早期面盤幼蟲殘留有卵黃塊，此階段幼蟲可以通過吸收卵黃塊的營養(yǎng)物質維持生長，因此外界餌料對貝類此階段幼蟲的生長及存活無顯著性影響[25]，由于餌料原因引起的育苗失敗一般發(fā)生在早期面盤幼蟲后[11]。一般認為蛋白質、脂肪、糖類是動物的三大基礎營養(yǎng)素[26]，餌料中蛋白質、脂肪、糖類含量能夠顯著影響貝類的生長及存活[27-29]，而對于貝類幼蟲來說，現(xiàn)有研究表明幼蟲餌料中脂肪對其生長及存活影響最為顯著。長牡蠣(Crassostreagigas)在變態(tài)附著1個月內主要以脂肪作為能源物質[30]。Numaguchi[31]用微膠囊化鱈魚油投喂馬氏珠母貝(Pinctadamartensii) 稚貝，證實不飽和脂肪酸對馬氏珠母貝生長來說是必需的。Langdon等[32]發(fā)現(xiàn)餌料中的二十二碳六烯酸等不飽和脂肪酸能夠明顯促進長牡蠣的生長。還有研究發(fā)現(xiàn)，二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸夠在貝類胚胎的形成和幼蟲的能量供應上發(fā)揮重要作用，而二十二碳六烯酸是貝類幼蟲的細胞膜和功能完整的關鍵成分[25,33]。

本試驗利用3種人工餌料研究了不同人工餌料及添加劑對方斑東風螺幼蟲生長及存活的影響，結果表明，人工餌料與添加劑混合投喂比對應單一投喂更能促進幼蟲生長及存活，其中以螺旋藻組+B.P.效果最好。在單一投喂組中，各試驗組在試驗初期生長差異不明顯，但投喂螺旋藻粉的存活率明顯高于其他試驗組。試驗后期單獨投喂螺旋藻粉生長及存活最差。說明試驗初期方斑東風螺幼蟲處于早期的面盤幼蟲階段，此階段的幼蟲能利用體內殘留的卵黃，對外界的營養(yǎng)需求不大，因此在試驗早期各試驗組生長差異相對不大。試驗中期及后期，幼蟲卵黃塊消失，開始攝食不同人工餌料，造成后期各試驗組幼蟲生長及存活的差異。通過對試驗中所使用的三種人工餌料及添加劑成分分析發(fā)現(xiàn)，B.P.及黑粒中含有較高的對貝類幼蟲生長發(fā)育至關重要脂肪，尤其是B.P.脂肪含量高達15%，可能相對含有的對幼蟲生長重要的多不飽和脂肪酸如二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸含量較高，所以此類餌料或添加劑更能促進幼蟲的生長及存活。

蝦元的主要成分為多種維生素，而維生素作為在水產養(yǎng)殖中常用的添加劑對水產經濟動物生長及存活影響顯著。Zhu等[34]研究發(fā)現(xiàn)在飼料中添加維生素B1能提高皺紋盤鮑(Haliotisdiscushannai)的質量增加率和貝殼日增長；張春曉等[35]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加4.1 mg/kg的維生素B6 能顯著提高大黃魚(Pseudosciaenacrocea)的特定生長率和存活率；徐志昌等[36]報道，飼料中維生素B6的含量為140 mg/kg時，中國明對蝦(Fenneropenaeuschinensis)的存活率、質量增加率、增長率顯著提高。本試驗中添加蝦元組生長及存活高于相對應的單一投喂組，說明在餌料中加入蝦元能夠促進方斑東風螺幼蟲的生長及存活。

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