◎ 池文華,鄧芳偉,盧 芳
(1.深圳市通量檢測科技有限公司,廣東 深圳 518126;2.江西出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫綜合技術(shù)中心,江西 南昌 330038)
食品安全以及其營養(yǎng)價值等問題受到了社會廣泛關(guān)注,而微生物是造成食品污染的病源之一,所以人們逐漸提高了對食品微生物的檢驗要求。為提高食品微生物檢驗水平,確保食品安全,本文將論述食品微生物的檢驗方法和質(zhì)量控制途徑,從而提高檢測效率與檢測質(zhì)量。
食品微生物通常是指與食品相關(guān)的微生物,分為:生產(chǎn)型微生物,如酵母菌;食物變質(zhì),如霉菌;細菌以及食源性病微生物,如大腸桿菌等。這些食品微生物與人們的日常飲食建立了緊密的關(guān)系,為人們的飲食提供了材料,如利用酵母菌可以發(fā)酵面食、酸奶。但是,一些微生物的存在卻有損人體健康。例如,大腸桿菌會侵入腸胃,輕則引起嘔吐腹瀉,重則引發(fā)中毒。食品微生物的檢測內(nèi)容主要包括兩部分:①檢驗食品污染程度指示菌。②檢測食品中的致病菌。前者主要是建立檢驗樣本,確定樣本中含有的菌落個數(shù),從而判斷食品被污染的程度。而后者是在檢驗食品污染程度的基礎(chǔ)上,根據(jù)食品微生物檢驗標準中已經(jīng)明確規(guī)定的微生物的數(shù)量,再次檢測其中所含有的致病菌[1]。
電阻抗法是食品中微生物檢測中較為常見的方式,其主要通過微生物在培養(yǎng)基中新陳代謝的特征不同,利用電阻抗測量法對微生物進行鑒定的技術(shù)。例如,在檢測食品中是否含有大腸桿菌時,由于該菌在遇到電阻抗時在儀器中會顯示出獨特的曲線,根據(jù)對于大腸桿菌形狀的記錄可以查出其為大腸桿菌。另外,可以通過檢測培養(yǎng)基的電阻抗變化情況來判斷細菌在培養(yǎng)皿中的生長繁殖特性。電阻抗法可以區(qū)分較為相似的微生物,如大腸菌與大腸桿菌,其原理是大腸菌會使電阻抗減小,而大腸桿菌的阻抗會增加,波長也不相同。所以,在區(qū)分相似性食品微生物中,電阻抗法更具有優(yōu)勢。電阻抗法還可以判斷食品樣品中菌落的數(shù)量,通常電阻抗越小,說明食品中含有的菌落越多,對于飲用水、實用油這一類食品的檢測,更為快速、直接[2]。
分子生物技術(shù)主要是利用微生物中含有的蛋白質(zhì)、基因,利用其在分子上的結(jié)構(gòu)不具有相似性這一特點,來判斷具體的微生物種類。
目前,最為常用的是PCR技術(shù),該項技術(shù)可對食物樣品進行定性或定量分析,且其準確性較高,在檢測過程中得到一定程度的推廣。由于食品中往往含有多種致病菌,在定量PCR發(fā)展的基礎(chǔ)上,多重PCR體系通過優(yōu)化PCR條件,對兩種或多種致病菌進行同時檢測的方法,目前已在多種病原微生物的檢測中得到了初步應(yīng)用,為食源性致病菌快速檢測找到了新的開發(fā)方向。
另一種常用的方法是分子生物方法,該方法利用基因中RNA、DNA與微生物中的核酸相結(jié)合來診斷和鑒別微生物。DNA探針指帶有用同位素或其他方法標記的特異DNA片斷,將DNA探針置入食物樣品中,通過顯微鏡觀察可以發(fā)現(xiàn),DNA探針可以與食品樣品中擁有同源序列的DNA區(qū)段形成雜交雙鏈,從而達到鑒定樣品中DNA的目的,再通過DNA來判斷樣品中含有具體的微生物種類。DNA探針技術(shù)方法特異、敏感又沒有放射性,不會破壞食品自身的結(jié)構(gòu),也不需要進行復(fù)雜的純培養(yǎng)和擴培菌等過程,縮短了檢測周期,所以在食品微生物檢測中得到了一定的應(yīng)用。目前,該方法已在沙門氏菌、產(chǎn)腸毒素大腸桿菌及乳酸菌檢測分型中得到了廣泛應(yīng)用,同時這種方式可以用于檢測蔬菜水果,擴大了檢測食品的范圍。雖然這項技術(shù)還處于研究階段,但是在食品檢測中具有良好的前景[3]。
在微生物檢測中,常用的指示劑有熒光指示劑。使用方法為直接在食品樣品中滴加具有特異性熒光標記的抗血清,然后再清洗樣本,在熒光顯微鏡下觀察,從而獲得細菌抗體。還可以通過微型全自動熒光酶標分析儀對已標記的樣本進行檢測,如在檢測大腸桿菌時,采用熒光劑對其進行標示,一般會在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)紅色,那么就可以判斷樣品中含有大腸桿菌。這種檢測方式時間短,效率高,不會破壞樣本自身的結(jié)構(gòu),提高了微生物檢測的準確性,是整個微生物檢測行業(yè)的發(fā)展趨勢。
為了微生物質(zhì)量檢驗得到有效保障,要做到以下兩點。①需要對檢測人員的行為進行規(guī)范。工作者必須具有相關(guān)資格的就業(yè)執(zhí)照。在食品微生物檢測中,需要規(guī)范每一環(huán)節(jié),避免人為操作對檢測的結(jié)果產(chǎn)生干擾。②檢測人員必須要對檢測的樣品進行保存,避免樣品在空氣中被污染,造成檢測結(jié)果存在差異性。
在食品保存中,需要按照蔬菜、肉類等進行分類,粘貼標簽,分別放置,避免樣本之間造成影響,同時減少食物樣本的浪費。在運輸過程中,需要注意運輸工具的保溫性和遮光性,對不同的食品樣品,按照體積大小以及保存條件進行運輸工具的選擇,盡量選取合適的運輸方式。特別是冷凍食品,要注意樣品在運輸過程中的溫度控制,避免溫度過高,導(dǎo)致食物樣品變質(zhì),從而影響檢測結(jié)果。對于已經(jīng)發(fā)生質(zhì)變的食物樣本要詳細記錄,作為后期檢測數(shù)據(jù)的參考依據(jù)。如果在檢測中樣品未使用完,則需要在4~12 ℃下進行避光保存,樣品的保存時間不宜過長,在采集樣品后,需要密封運輸,避免樣品在運輸過程中氧化變質(zhì),使采集的結(jié)果不具有代表性。
①在檢測過程中,必須要在無菌的環(huán)境下進行,在進行檢測前,需要對實驗室內(nèi)的裝置、儀器等進行消毒殺菌處理,確保外界環(huán)境不會對檢測結(jié)果造成影響。②由于食物中微生物的生存條件如溫度等都不相同,培養(yǎng)基滅菌之后,必須進行溫度等調(diào)控,為微生物提供一個合適的生存環(huán)境,才能夠保證檢測結(jié)果的準確性。在檢測過程中,需要按照時間段來對檢測結(jié)果進行記錄,多次取樣,進行對比檢測,取結(jié)果的平均值,提高檢測準確率。
在日常食物中,微生物的存在是必不可少的,它使人們的食品種類更加豐富。但是,一些微生物的存在會給人們的生活帶來疾病。所以,食品微生物的檢測主要是清除一些對于人們身體有害的微生物,以確保食品安全。微生物檢測是食品安全監(jiān)測工作中重要的環(huán)節(jié),在近幾年中,受到了政府與社會的關(guān)注,提高檢測的準確性是提高檢測水平的前提,所以,在檢測過程中,要根據(jù)微生物的特性,有效地檢測出食物中微生物的含量[4]。
[1]趙智花.食品微生物檢驗的方法及質(zhì)量控制[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2015,15(34):71-71.
[2]趙春艷.食品微生物檢驗的方法及質(zhì)量控制[J].糧食流通技術(shù),2016,1(2):87-89.
[3]孫巖琳.食品微生物檢驗的質(zhì)量控制管理[J].黑龍江科技信息,2016(12):116.
[4]結(jié) 莉,陳 玲,王曉鵬.食品微生物檢驗技術(shù)和質(zhì)量控制探究[J].食品安全導(dǎo)刊,2017(1X):52.