潘德彥

（遼寧省大連市普蘭店區(qū)城子坦動物衛(wèi)生監(jiān)督所，遼寧 大連 116200）

糞便蟲卵檢查是寄生蟲病、特別是蠕蟲病生前診斷的重要方法，其原理是：大多數(shù)寄生性蠕蟲寄生在消化道內(nèi)，它們的卵、節(jié)片、幼蟲或成蟲隨宿主糞便排至外界；某些寄生于呼吸道的蠕蟲，它們的蟲卵和幼蟲隨痰液到口腔又被動物咽下也隨糞便排出；一些寄生于血液的蠕蟲，它們的蟲卵也可隨血流到達(dá)腸壁，并進(jìn)入腸腔而隨糞排出.

1 應(yīng)用范圍

1.1 動物寄生蟲病的生前診斷

適用于所有動物寄生蟲病的診斷，尤其是不能剖檢的珍貴和珍稀動物。

1.2 動物寄生蟲流行區(qū)系調(diào)查

此項調(diào)查可確定感染率、感染強(qiáng)度，感染種類和優(yōu)勢蟲種，為科學(xué)研究、監(jiān)測預(yù)警、區(qū)域性寄生蟲病防控服務(wù)。

1.3 驅(qū)蟲效果評價

根據(jù)驅(qū)蟲前后蟲卵轉(zhuǎn)陰率，判斷驅(qū)蟲效果。

2 儀器設(shè)備材料

2.1 器 材 鐵架臺、漏斗、糞篩、紗布、糞勺 、燒杯、玻璃棒、鑷子、載玻片、蓋玻片、粗天平、錐形瓶、吸管、鐵絲圈等。

2.2 各種動物糞便

2.3 飽和食鹽水溶液、自來水

2.4 普通顯微鏡

3 糞便的采集及保存

3.1 糞便采集的原則和方法

原則：新鮮未被污染。

方法：直腸采糞或排出的新鮮糞便，采集糞堆上面未被污染的部分。采集的糞便要裝入潔凈的容器中。

3.2 糞便的保存

采集的新鮮糞便應(yīng)當(dāng)天檢查，不能當(dāng)天檢查的糞便要密封后放在4℃的冰箱中保存。如需轉(zhuǎn)送別處檢查，則可將糞樣浸入5%～10%的福爾馬林中，將蟲卵固定，使其失去活力。

4 常用的糞便蟲卵檢查方法

4.1 糞便外觀檢查法

所有的吸蟲、線蟲的蟲卵全部隨著糞便排出體外，通過糞便外觀檢查，可以檢出蟲卵及成蟲。

4.2 直接涂片法

適用于產(chǎn)卵量多的蟲體的糞便檢查，如球蟲、消化道線蟲卵等；本方法簡便、快速，但檢出率低。取1～2滴生理鹽水放入載玻片上取少量被檢糞便與之混合均勻，剔出糞渣加蓋玻片鏡檢。

4.3 漂浮法

本方法適用于對大多數(shù)線蟲卵、絳蟲卵尤其是球蟲卵囊，本法的應(yīng)用原理是飽和鹽水的比重（1.3～1.9）大于蟲卵的比重（1.0～1.2）。

蟲卵被漂浮在溶液的上層。操作方法：

（1）取糞：取5～10g糞便放入100mL燒杯中；

（2）化糞：加10～20倍的飽和鹽水，用玻璃棒攪開；

（3）過濾：用3～4層紗布或銅篩網(wǎng)過濾；

（4）靜置：40min左右；

（5）鏡檢：用直徑0.5～1cm的金屬環(huán)平著接觸液面，提起后將液面抖落在載玻片上加蓋玻片用顯微鏡檢查。

4.4 自然沉淀法

本方法適用于各種蠕蟲卵及幼蟲檢查，特別適用于比重較大的吸蟲卵、棘頭蟲卵及比重較大的原蟲卵囊。原理：蟲卵的比重（1.2～1.5）大于水的比重（1.0），蟲卵或包囊體沉于溶液的底部。

（1）取糞：取5～10克糞便放入100mL燒杯中。

（2）化糞：加10～20倍的自來水，用玻璃棒攪開。

（3）過濾：用 3～4層紗布過濾。

（4）靜置洗滌：靜置20min后，倒掉上清液，留取沉淀物，再次加水靜置沉淀，每20min一次直至上清液透明為止。

（5）鏡檢：用吸管吸取沉淀物，將沉淀物滴1-2滴于載玻片上，加蓋玻片用顯微鏡檢查。

5 蟲卵的基本形態(tài)結(jié)構(gòu)

形狀：圓形、卵圓形、橢圓形、三角形等。

結(jié)構(gòu)：外層：2～4層膜，內(nèi)層：有多個卵黃細(xì)胞和一個胚細(xì)胞。

顏色：黃褐色、黃白色等。

6 糞便蟲卵培養(yǎng)技術(shù)

有一部分蟲卵形態(tài)相似，在蟲卵階段很難區(qū)別，為了鑒定這些蟲卵，需要做糞便蟲卵培養(yǎng)。

培養(yǎng)條件：25℃恒溫箱，有充足的氧氣。

操作方法：培養(yǎng)皿底部加放濾紙一張，將糞便100g左右加水調(diào)成硬糊狀并堆成半球形放在濾紙上，使半球形糞便頂部略高于培養(yǎng)皿高度，而后加蓋另外一個培養(yǎng)皿，放入25℃恒溫箱中一周左右，多數(shù)蟲卵可以發(fā)育為幼蟲，并集中在上面培養(yǎng)皿蓋的水滴中，用吸管吸出幼蟲在顯微鏡下檢查鑒定。