(河南省西華縣農(nóng)牧局，河南 西華 466600)

0 引言

近年來(lái)我國(guó)生豬產(chǎn)業(yè)集約化、規(guī)?；潭妊杆偬岣撸i養(yǎng)殖業(yè)得到了迅猛發(fā)展。但受頻繁從國(guó)外引進(jìn)種豬、國(guó)內(nèi)生豬產(chǎn)業(yè)發(fā)展區(qū)域不平衡及布局不合理而引發(fā)的南種北運(yùn)、育肥豬北豬南運(yùn)的局面的影響，導(dǎo)致我國(guó)生豬疫病的種類逐漸增多，病原毒株變異加快，部分疫病非典型化，疫病混合感染嚴(yán)重的現(xiàn)狀。這給臨床診斷工作帶來(lái)了巨大的挑戰(zhàn)，因此很多生豬疫病輔助實(shí)驗(yàn)室診斷顯的尤為重要，而影響實(shí)驗(yàn)室結(jié)果診斷準(zhǔn)確性的因素除了受所選檢測(cè)試劑、設(shè)備、人員、方法等因素的影響外，所采集樣品的質(zhì)量對(duì)其也有重要影響。本文作者主要對(duì)豬群樣品的采集、保存及運(yùn)送等環(huán)節(jié)做了簡(jiǎn)要的敘述。

1 做好生物安全防護(hù)

大多數(shù)的動(dòng)物疫病為人畜共患病，對(duì)二者均能感染并相互之間進(jìn)行傳播引起危害。近年來(lái)人畜共患病在國(guó)內(nèi)外不斷爆發(fā)，不但對(duì)養(yǎng)殖業(yè)造成重大損失，對(duì)人類的生命健康也造成了巨大威脅。一線采樣工作人員由于近距離接近染疫豬群，必須提高生物安全防護(hù)意識(shí)，做好相應(yīng)的生物安全防護(hù)措施，采樣時(shí)應(yīng)穿防護(hù)服、帶相應(yīng)級(jí)別的口罩、帶手套、必要時(shí)還應(yīng)佩戴護(hù)目鏡，接觸患畜或其分泌物后要進(jìn)行洗手和消毒，盡量保持工作環(huán)境空氣通暢。樣品采集前應(yīng)穿戴防護(hù)服等安全防護(hù)用品，做好采樣者的個(gè)人安全防護(hù)；樣品采集過(guò)程中，應(yīng)注意操作的安全性，避免被豬只攻擊;采樣結(jié)束后應(yīng)將用品及廢棄物等做無(wú)害化處理，避免污染環(huán)境及疫病傳播。

2 送檢樣品信息的填寫

由于不同年齡、不同管理?xiàng)l件下飼養(yǎng)的豬群，其發(fā)病率或流行率不同，可從中得到有關(guān)疫病病原的重要信息，實(shí)驗(yàn)室在獲取有關(guān)豬群發(fā)病率、病死率、發(fā)病豬群的年齡順序、對(duì)治療的反應(yīng)及近期的飼養(yǎng)管理和環(huán)境變化等方面的詳細(xì)情況，有助于實(shí)驗(yàn)室對(duì)豬群疫病的診斷。為了能提高對(duì)生豬疫病診斷的準(zhǔn)確率，有必要保證采樣樣品有代表性、樣品信息詳細(xì)、準(zhǔn)確，還需詳細(xì)記錄被采樣動(dòng)物的臨床癥狀、剖檢變化、用藥情況等詳細(xì)信息。

3 樣品采集的原則

一是凡血液凝固不良、天然孔出血的病死豬應(yīng)謹(jǐn)慎解剖，炭疽病嚴(yán)禁解剖。二是在進(jìn)行內(nèi)臟病料采集時(shí)應(yīng)先胸腔后腹腔的原則。三是診斷實(shí)驗(yàn)室與豬場(chǎng)雙方應(yīng)共同協(xié)商檢驗(yàn)項(xiàng)目，以確定選擇合適的樣本類型及數(shù)目，這樣可以確保樣本的采集處理和運(yùn)輸以最佳的方式進(jìn)行，如不同的樣品需要冷凍、冷藏、或特殊包裝等不同的處理方式。明確了檢驗(yàn)?zāi)康募按_定了樣品類型和運(yùn)輸要求后，須選好采樣豬只并提供必要的信息，如當(dāng)豬群爆發(fā)高發(fā)病率、低死亡率的呼吸道疫病時(shí)，若需分離病原，則要采集處于急性期的豬為樣本。

4 樣品采集要求

4.1 病料樣品的典型性

所要采集的病料樣品要考慮兩個(gè)方面，一是所選擇的豬只要具有代表性，主要指的是在進(jìn)行疫病診斷時(shí)，應(yīng)選擇沒(méi)有經(jīng)受過(guò)藥物治療且病狀典型的豬只，這種狀態(tài)下采集的樣品對(duì)該病的確診和研究具有特殊的意義；二是所選病料組織要典型，不同的生豬疫病采集病料樣品前，從采樣豬只身上選取病變嚴(yán)重的組織部位進(jìn)行檢測(cè)，為了確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，淋巴結(jié)、肝臟、心臟、肺臟等，無(wú)論是否有病變，都應(yīng)該采集。三是在進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)評(píng)估的時(shí)候所選擇的豬只應(yīng)考慮免疫時(shí)間、日齡、胎次等因素，豬只選樣盡量科學(xué)有代表性，采樣數(shù)應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)的要求。

4.2 樣品采集操作的無(wú)菌性

采集病料樣品，應(yīng)保持全程無(wú)菌操作，以避免外源性微生物影響檢測(cè)結(jié)果。血液樣品采集前應(yīng)對(duì)采樣部位按要求進(jìn)行點(diǎn)狀螺旋式消毒；無(wú)菌采集的樣品，使用的解剖器械、容器等用品，應(yīng)做嚴(yán)格的消毒處理，采樣時(shí)遵守相應(yīng)的無(wú)菌操作流程。

4.3 選擇適宜的采樣時(shí)機(jī)

應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的不同，選擇適宜的采樣時(shí)機(jī)，以避免對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響。血液樣品在采集前一般禁食8h，此時(shí)的血液理化性質(zhì)較為穩(wěn)定采集血液樣品用于病毒檢測(cè)時(shí)，應(yīng)在豬只發(fā)病初期體溫升高期間采集。對(duì)于需要做病原分離的，樣品宜在病初的發(fā)熱期或癥狀典型時(shí)按診斷要求采樣，病死的豬只應(yīng)立即采樣，最遲不超過(guò)死后6 h。

5 樣品的保存及運(yùn)輸

對(duì)需要送檢的病料，應(yīng)做好記錄編號(hào)，附上詳細(xì)的采樣記錄信息。血液樣品不能及時(shí)檢測(cè)的，應(yīng)保存于2℃～8℃冰柜中冷藏保存，析出的血清樣品可進(jìn)行-20℃冷凍保存，以避免失效。運(yùn)輸時(shí)將樣品放入防滲防漏的容器中，依據(jù)到達(dá)目的地時(shí)間的和氣溫加入足量的冰袋降溫，最好在1日內(nèi)送達(dá)；另外還需對(duì)外包裝進(jìn)行加固處理，減少樣品因擠壓、摔落等因素的影響。

在動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與檢測(cè)過(guò)程中，采樣時(shí)機(jī)、采樣方法、樣品選擇、樣本數(shù)量及樣品質(zhì)量等環(huán)節(jié)，對(duì)診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性和結(jié)論的科學(xué)性有著直接的影響，因此，在采樣過(guò)程中要遵守病料樣品采集的基本原則，還要按照相關(guān)要求及順序?qū)Σ×线M(jìn)行處理，采用最佳的方法對(duì)患病豬只進(jìn)行疫病的檢測(cè)，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和科學(xué)性。

BE·斯特勞， BD.阿萊爾， WJ·蒙加林， DJ·泰勒.豬病學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2003:33-34.

[2] 房大學(xué),朱義霞.河南省第十三屆豬病研討會(huì)論文集[C].鄭州：中原農(nóng)民出版社,2009:70-73.