宋鐸等

doi：10.3969/j.issn.1007-614x.2017.20.70

摘要 目的：探討胰腺癌中TBOX2表達(dá)狀況及其與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系。方法：采用免疫組化法檢測(cè)48例胰腺癌及12例癌旁正常組織標(biāo)本中TBOX2表達(dá)狀況，分析胰腺癌表達(dá)水平與臨床病理的關(guān)系。結(jié)果：TBOX2在胰腺癌組織中強(qiáng)表達(dá)例數(shù)明顯高于正常胰腺標(biāo)本（P<0.01）。TBOX2表達(dá)與腫瘤分化程度、腫瘤轉(zhuǎn)移程度呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：TBOX2表達(dá)陽性可能有助于診斷胰腺癌分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。TBOX2可能參與了胰腺癌的發(fā)生與發(fā)展，對(duì)胰腺癌的早期診斷與預(yù)后判斷有重要意義。

關(guān)鍵詞 胰腺癌；免疫組化；TBOX2

近年來，研究結(jié)果表明，轉(zhuǎn)錄因子TBOX2與人類的多種癌癥如乳腺癌、惡性黑色素瘤等疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。但是，到目前為止TBOX2基因起到的作用還不清楚。本文通過免疫組化方法進(jìn)一步研究TBOX2的表達(dá)與胰腺癌臨床病理特征之間的關(guān)系，可為胰腺癌診斷和治療提供新的思路。

資料與方法

收集中國(guó)醫(yī)科大學(xué)盛京醫(yī)院及沈陽市第四人民醫(yī)院病理科2009年5月-2013年3月手術(shù)切除的胰腺癌石蠟標(biāo)本，男33例，女15例，平均年齡55.2歲，所有患者術(shù)前未接受任何放射或者化學(xué)抗癌治療。切取癌旁正常胰腺組織12例作為對(duì)照正常胰腺組織標(biāo)本。所有胰腺癌組織和正常胰腺組織都經(jīng)病理科確認(rèn)。

方法：標(biāo)本常規(guī)固定，石蠟包埋，切片。應(yīng)用免疫組化ABC法測(cè)定TBOX2蛋白。鼠抗人TBOX2多克隆一抗及ABC試劑盒（日本Santa Cruz公司，含有正常羊血清、生物素標(biāo)記的羊抗鼠二抗）。

判斷標(biāo)準(zhǔn)：陽性為棕黃色或棕褐色。計(jì)數(shù)著色細(xì)胞數(shù)和染色強(qiáng)度（兩人單獨(dú)計(jì)數(shù)）：整張切片中著色的癌細(xì)胞或癌旁細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)<1%、2%～30%、31%～70%、71%～100%分別為0、1、2、3。染色強(qiáng)度分為強(qiáng)、中、弱和無，分別為3、2、1、0。兩種計(jì)分結(jié)果相加綜合打分，Ⅰ度無表達(dá)（分?jǐn)?shù)為0分），Ⅱ度弱表達(dá)（分?jǐn)?shù)為1～2分），Ⅲ度中表達(dá)（分?jǐn)?shù)為3～4分）和Ⅳ度強(qiáng)表達(dá)（分?jǐn)?shù)為5～6分）。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：試驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理，多組比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK法分析數(shù)據(jù)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

免疫組織化學(xué)染色的結(jié)果：以染色呈Ⅲ和Ⅳ度為強(qiáng)表達(dá)，與染色呈Ⅰ和Ⅱ度為弱表達(dá)對(duì)比。在48例胰臟癌標(biāo)本，有29例（60.4%）可見免疫組化染色呈強(qiáng)表達(dá)，而在癌旁正常胰腺標(biāo)本中沒有發(fā)現(xiàn)強(qiáng)表達(dá)的免疫組化染色。TBOX2在胰腺癌組織中強(qiáng)表達(dá)例數(shù)明顯高于正常胰腺標(biāo)本（P<0.01），見表1。

對(duì)48例胰腺癌臨床病理特征的進(jìn)一步分析，顯示出TBOX2表達(dá)與腫瘤分化程度呈正相關(guān)。TNM分期為Ⅲ和Ⅳ期病例的TBOX2表達(dá)明顯高于TNM分期Ⅰ和Ⅱ的病例（P<0.05）。在腫瘤轉(zhuǎn)移方面，已發(fā)生轉(zhuǎn)移病例的TBOX2表達(dá)也明顯高于沒有轉(zhuǎn)移的病例。TBOX2表達(dá)變化與年齡、性別、腫瘤直徑和位置差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

討論

胰腺癌是一種惡性度較高的消化道腫瘤，近年來其發(fā)病率有明顯增高的趨勢(shì)。目前在美國(guó)胰腺癌死亡率在所有的惡性腫瘤中居第5位，在消化道癌中胰腺癌的發(fā)病率和死亡率僅次于結(jié)直腸癌，居第2位。在我國(guó)胰腺癌是因癌癥死亡的第6位常見惡性腫瘤。胰腺癌作為人體重要的內(nèi)臟實(shí)體瘤，迄今無論在早期診斷和治療上均是最困難的惡性腫瘤之一。胰腺癌惡性程度高，起病隱匿，不易早期發(fā)現(xiàn)，臨床診斷病例多為中晚期，預(yù)后極差，根治率及生存率均很低，手術(shù)切除率很低（10%～15%），術(shù)后5年生存率低于4%。因此從基因水平研究胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)理，并選擇胰腺癌特異性基因進(jìn)行基因治療已成為這一領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。

本研究結(jié)果顯示，在48例胰腺癌標(biāo)本中，有29例（60.4%）可見免疫組化染色呈強(qiáng)表達(dá)，而在癌旁正常胰腺標(biāo)本中沒有發(fā)現(xiàn)強(qiáng)表達(dá)的免疫組化染色，TBOX2在胰腺癌組織中強(qiáng)表達(dá)例數(shù)明顯高于正常胰腺標(biāo)本（P<0.01）。TBOX2的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤直徑和位置無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而TBOX2的表達(dá)與腫瘤轉(zhuǎn)移存在顯著相關(guān)。在腫瘤轉(zhuǎn)移方面，已發(fā)生轉(zhuǎn)移病例的TBOX2表達(dá)高于沒有轉(zhuǎn)移的病例。提示TBOX2的表達(dá)與胰腺癌的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本研究還發(fā)現(xiàn)，TBOX2表達(dá)與腫瘤分化程度呈正相關(guān)。病理分期中，Ⅰ期與Ⅱ期病例相比，其表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但進(jìn)一步分析表明，Ⅰ期和Ⅱ期與Ⅲ期和Ⅳ期病例相比，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明在晚期病例中TBOX2的表達(dá)更為顯著。總之，TBOX2的表達(dá)在組織細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化后增高，并隨著腫瘤TNM分期的進(jìn)展而進(jìn)一步增加，而且還與腫瘤的浸潤(rùn)程度及轉(zhuǎn)移情況呈正相關(guān)，與腫瘤細(xì)胞的分化程度呈負(fù)相關(guān)。由此可見，組織細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化后，一定程度增高的TBOX2表達(dá)能夠反映組織表型變化和病程進(jìn)展情況，包括細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化、腫瘤組織分化程度和TNM分期，提示TBOX2基因高表達(dá)可能標(biāo)志著在腫瘤進(jìn)展中的一個(gè)關(guān)鍵性轉(zhuǎn)變。

綜上所述，TBOX2在中低分化胰腺癌的表達(dá)顯著高于高分化胰腺癌，提示中低分化胰腺癌的生物學(xué)行為可能與TBOX2有關(guān)。TBOX2表達(dá)情況與患者年齡、性別、腫瘤直徑和位置無明顯相關(guān)性。TBOX2表達(dá)陽性可能有助于診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。endprint