王昊

[摘要]目的探討2型糖尿病合并Hp感染胃潰瘍患者外周血中T淋巴細(xì)胞亞群的變化及其臨床意義。方法選取45例2型糖尿病合并Hp感染的胃潰瘍組作為研究對(duì)象（DM組），同期住院的50例不伴有2型糖尿病僅存在Hp感染的胃潰瘍組作為對(duì)照組，采用流式細(xì)胞儀免疫熒光法檢測(cè)兩組T淋巴細(xì)胞亞群的百分?jǐn)?shù)并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，并觀察兩組患者白介素-17（IL-17）以及C-反應(yīng)蛋白水平（CRP）。結(jié)果DM組和對(duì)照組CD4⁺和CD4⁺/CD8⁺的測(cè)定結(jié)果相比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，DM組的CD4⁺呈顯著負(fù)相關(guān)（P<0.01），CD4⁺/CD8⁺呈顯著負(fù)相關(guān)（P<0.05）。DM組患者IL-17、CRP水平明顯高于對(duì)照組。結(jié)論2型糖尿病合并Hp感染的胃潰瘍患者存在細(xì)胞免疫功能紊亂，提示與Hp感染相關(guān)。

[關(guān)鍵詞]2型糖尿??；Hp感染；胃潰瘍；T淋巴細(xì)胞亞群

[中圖分類號(hào)]R587.1；R573.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B [文章編號(hào)]2095-0616（2017）17-227-03

胃潰瘍（gastric ulcer，GU）是指發(fā)生于胃的潰瘍，是常見的消化道疾病。幽門螺桿菌（helicobacterpylori，Hp）感染是GU最常見的病因，根除Hp已成為治療Hp相關(guān)性GU的共識(shí)。研究發(fā)現(xiàn)Hp與胃腸外疾病也存在一定的關(guān)系，如慢性阻塞性肺疾病、糖尿病等。近年來，2型糖尿病合并消化性潰瘍相關(guān)研究受到越來越多重視，T淋巴細(xì)胞是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞群，可維持機(jī)體正常的免疫功能。本研究通過對(duì)伴和不伴2型糖尿病合并Hp感染的胃潰瘍患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的測(cè)定探討2型糖尿病合并胃潰瘍機(jī)體細(xì)胞免疫的變化。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2014年10月-2015年10月我院消化內(nèi)科收治的經(jīng)胃鏡、病理、快速尿素酶和呼氣試驗(yàn)檢查明確診斷Hp陽(yáng)性的胃潰瘍患者，并排除患有感染性及免疫性疾病，心腦血管疾病及惡性腫瘤，近期未用質(zhì)子泵抑制劑，H₂受體拮抗劑或抗生素者，入選105例患者分為兩組，其中DM組為伴有2型糖尿病者的GU組（2型DM診斷符合國(guó)際糖尿病聯(lián)盟的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)）45例，男28例，女17例，年齡（60.7±4.9）歲；對(duì)照組為不伴糖尿病的GU組50例，男32例，女18例，年齡（63.6±5.3）歲，兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2儀器和方法

1.2.1胃鏡檢查和C¹³尿素酶呼氣實(shí)驗(yàn) 患者就診時(shí)行胃鏡檢查明確診斷胃潰瘍，且經(jīng)活檢組織尿素酶試驗(yàn)和C¹³呼氣實(shí)驗(yàn)兩項(xiàng)均陽(yáng)性定為Up感染?；顧z組織尿素酶試驗(yàn)：患者行胃鏡檢查時(shí)統(tǒng)一取距幽門2cm內(nèi)胃竇小彎側(cè)組織1塊經(jīng)快速尿素酶試驗(yàn)盒（由珠海市克迪科技開發(fā)有限公司提供）顯色。C¹³呼氣實(shí)驗(yàn)（由河北省協(xié)和藥業(yè)有限公司提供）：患者空腹漱口后在維持正常呼氣情況下，用吸管將氣緩慢呼入1號(hào)樣品管維持4-5s，拔出吸管后立即扭緊試管蓋。此收集為0min呼氣。后用80-100mL涼飲用水送服一袋尿素[¹³C]散劑后靜坐。30min后按上述收集呼氣方法再次收集呼氣進(jìn)入2號(hào)樣品管，扭緊試管蓋。將收集的2個(gè)編號(hào)的樣品管分別在相應(yīng)的儀器上進(jìn)行¹³CO₂檢測(cè)。結(jié)果判定：通常以30min樣品所測(cè)¹³CO₂的δ‰值的差值表示，即檢測(cè)值=δ%。（30min）-δ%（0min）。檢測(cè)值≥4.0±0.4時(shí)，判定受試者為Hp陽(yáng)性。

1.2.2T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)方法患者晨起空腹坐位取肘正中靜脈血4mL，采用流式細(xì)胞儀（購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)有限公司）單克隆免疫熒光法，用乙二胺四乙酸抗凝，取CD3+、CD4+和CD8+細(xì)胞單克隆抗體試劑各20μL（均購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)有限公司）加入到全血100μL中混勻，置15min，制備標(biāo)本后放流式入細(xì)胞儀分別進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)，每個(gè)標(biāo)本計(jì)數(shù)5000個(gè)細(xì)胞，計(jì)算CD3+、CD4+和CD8+細(xì)胞百分率。

1.2.3IL-17、CRP水平檢測(cè)方法采用Elisa法（試劑盒購(gòu)自上海賣約爾生物科技有限公司）檢測(cè)IL-17水平；免疫比濁法檢測(cè)CRP水平（試劑盒由北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司提供）。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0軟件統(tǒng)計(jì)，計(jì)算各組均值，數(shù)據(jù)均值用（x±s）表示，組間比較用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組患者外周T淋巴細(xì)胞亞群水平比較

兩組的CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺比較見表1，DM組較對(duì)照組的CD4⁺，CD4⁺/CD8⁺具有顯著差異，DM組水平顯著低于對(duì)照組，而CD3⁺，CD8⁺則無明顯差異。即2型糖尿病合并Hp感染的胃潰瘍患者較不伴2型糖尿病的胃潰瘍患者機(jī)體存在細(xì)胞免疫功能紊亂。見表1。

2.2兩組患者血清IL-17、CRP水平比較

DM組患者IL-17水平高于對(duì)照組，DM組CRP水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3討論

胃潰瘍（gastric ulcer，GU）是臨床常見的消化道疾病，因胃酸，胃蛋白酶，Hp感染或各種理化等致病因素破壞能力超過胃黏膜防御能力時(shí)，就可能發(fā)生胃潰瘍。幽門螺桿菌（helicobacterpylori，Hp）是一種覆蓋胃黏膜的黏液層與胃上皮細(xì)胞定居繁殖的革蘭陰性螺旋狀桿菌，目前Hp感染是胃潰瘍重要的致病因素，2型糖尿?。╠iabetesmellitus，DM）是以慢性高血糖為特征的代謝性疾病，容易引發(fā)一系列的代謝紊亂。常由于糖代謝紊亂，免疫功能受損等因素，易引起其胃黏膜，呼吸道等部位合并感染。研究發(fā)現(xiàn)Hp感染率較高，易合并糖尿病慢性并發(fā)癥。糖尿病患者胃黏膜毛細(xì)血管基底膜增厚，微血管內(nèi)皮細(xì)胞增生腫脹，致使胃黏膜血流量明顯減少，細(xì)胞再生修復(fù)能力下降，黏膜防御能力減弱，使Hp更易于對(duì)胃黏膜造成嚴(yán)重的損害。因此，Hp感染是糖尿病合并消化道潰瘍發(fā)病主要病因之一。T淋巴細(xì)胞是人體重要的免疫細(xì)胞群，外周血成熟T細(xì)胞主要有CD4⁺（輔助性T細(xì)胞）和CD8⁺（細(xì)胞毒性T細(xì)胞）2個(gè)亞群，正常情況下，它們?cè)隗w內(nèi)進(jìn)行免疫應(yīng)答時(shí)相互協(xié)同，相互制約，以維持免疫應(yīng)答的相對(duì)平衡，平衡失調(diào)會(huì)導(dǎo)致免疫功能紊亂，影響機(jī)體的免疫保護(hù)機(jī)制。Hp相關(guān)性胃潰瘍患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平較低，有效根除Hp治療后，患者T淋巴細(xì)胞亞群水平增高，提示Hp感染機(jī)體后，患者機(jī)體內(nèi)存在的胃黏膜細(xì)胞損傷及免疫防御系統(tǒng)破壞。T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫異常可造成胰島β細(xì)胞的損傷，在2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。2型糖尿病患者體內(nèi)的代謝紊亂可使淋巴細(xì)胞、樹突細(xì)胞等免疫細(xì)胞有不同程度損傷，導(dǎo)致T2DM患者免疫功能紊亂，這可能也是T2DM患者容易發(fā)生感染的原因之一。

本研究顯示，2型糖尿病合并Hp陽(yáng)性的胃潰瘍患者與對(duì)照組相比較，CD4⁺，CD4⁺/CD8⁺顯著降低，而CD3⁺，CD8⁺變化不明顯，提示機(jī)體存在細(xì)胞免疫紊亂和功能缺陷，Hp在其中發(fā)揮重要作用。一般認(rèn)為循環(huán)中CD3⁺及CD4⁺減少，CD4⁺/CD8⁺比例降低是免疫缺陷的重要特征。在觀察IL-17和CRP水平上發(fā)現(xiàn)，DM組IL-17、CRP水平明顯高于對(duì)照組。IL-17是促炎性細(xì)胞因子，IL-17水平升高提示人體發(fā)生炎癥反應(yīng)，對(duì)人體免疫功能產(chǎn)生影響。CRP是人體血漿急性時(shí)相蛋白，參與細(xì)胞凋亡、激活補(bǔ)體功能，調(diào)理感染，CRP水平升高也顯示有明顯感染。對(duì)于合并糖尿病的患者，Hp感染通過釋放內(nèi)毒素入血不僅促進(jìn)胃潰瘍發(fā)生，還使炎性因子和氧自由基生成增加，加重胰島素抵抗，造成患者血糖難以控制，加速糖尿病并發(fā)癥的進(jìn)程，具體機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。由此可推斷，對(duì)于合并糖尿病的胃潰瘍患者，提高Hp根除率，同時(shí)有效控制血糖，可提高胃潰瘍的愈合率。

（收稿日期：2017-06-05）