尹情勝，任翠麗，俞敏，張勇強(qiáng)

（1.合肥工業(yè)大學(xué)控釋藥物研究室，安徽合肥 230009；2.合肥中人科技有限責(zé)任公司，安徽合肥 230038）

鹽酸多柔比星（DOX）是周期非特異性細(xì)胞毒類(lèi)抗腫瘤藥物，作用于DNA分子結(jié)構(gòu)，具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性，臨床上廣泛用于治療急性白血病、惡性淋巴瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、肝癌等［1-2］。鹽酸多柔比星植入劑是供體內(nèi)植入使用的長(zhǎng)效低毒的新型緩釋制劑，現(xiàn)已進(jìn)入臨床研究階段。該制劑由DOX和生物可降解高分子材料組成，DOX和本品輔料具有較強(qiáng)的引濕性［3］，本品在制備、存儲(chǔ)時(shí)易吸潮，影響高分子輔料的穩(wěn)定性，進(jìn)而影響本品的質(zhì)量。故有必要建立水分測(cè)定方法，用于監(jiān)測(cè)本品中的水分。

藥品中水分測(cè)定大多采用卡爾-費(fèi)休氏容量滴定法［4］。測(cè)定溶劑通常為甲醇，若樣品溶解于甲醇中，可直接加入滴定杯中滴定［5-8］。本品輔料不溶于甲醇，在優(yōu)選的混合溶劑中溶解也緩慢，因此，無(wú)法直接加樣滴定。通過(guò)查閱文獻(xiàn)［9-10］和試驗(yàn)研究，本品用 N，N-二甲基甲酰胺（DMF）-甲醇混合溶解后轉(zhuǎn)移至滴定杯中測(cè)定，該方法的精密度和回收率均良好。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 梅特勒AE240電子天平；梅特勒ET08水分儀；XW-80漩渦混合器（海門(mén)其林貝爾有限公司）。

1.2 試藥 單組分卡爾-費(fèi)休試劑（無(wú)吡啶型），無(wú)水甲醇（分析純），N，N-二甲基甲酰胺（色譜純），5A分子篩；鹽酸多柔比星植入劑（批號(hào)20160402、20160505、20160920、20161105、20161123）。

2 方法與結(jié)果

2.1 水-甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（10 g水／L）配制方法［11］取干燥的100 mL量瓶，加入干燥的甲醇（取甲醇約500 mL，加入干燥的5A分子篩約50 g，具塞，靜置過(guò)夜，取上清液使用）約50 mL，精密加入純化水1 mL，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，密封，即得。

2.2 卡爾-費(fèi)休氏試液標(biāo)定 環(huán)境濕度小于60%。滴定杯中加入甲醇約30 mL，預(yù)滴定至終點(diǎn)，加入水-甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液約1 mL，精密稱(chēng)定，滴定，連續(xù)標(biāo)定3次，結(jié)果應(yīng)在±1%以?xún)?nèi)，計(jì)算費(fèi)休氏試液的滴定度F，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 卡爾-費(fèi)休氏試液標(biāo)定結(jié)果

2.3 DMF-甲醇（4∶1）混合溶劑中水分的測(cè)定 移取混合溶劑約10 mL，精密稱(chēng)定，以甲醇為溶劑，滴定。經(jīng)測(cè)定，混合溶劑水分（W0）為0.020 77%，RSD為0.08%（n＝3）。

2.4 供試品中水分測(cè)定方法

2.4.1 供試品溶液制備方法 稱(chēng)取DOX植入劑約200 mg，精密稱(chēng)定（M1），置于25 mL量瓶中，加入DMF約8 mL，精密稱(chēng)定（M2），具塞密封，渦旋至植入劑粒子消失，再加入無(wú)水甲醇約2 mL，精密稱(chēng)定（M3），具塞密封，渦旋至澄清，得供試品溶液，密封，備用。

2.4.2 測(cè)定方法 滴定杯中加入混合溶劑約30 mL，預(yù)滴定至終點(diǎn)，移入供試品溶液約10 mL，精密稱(chēng)定（M4），滴定至終點(diǎn)，記錄消耗試液的體積（V）。按下式計(jì)算供試品中的含水量（Wt）：

式中，F(xiàn)1為供試品溶液中溶劑的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，F(xiàn)1＝（M2＋M3）／（M1＋M2＋M3）。

2.5 方法的準(zhǔn)確度考察 取本品1批（批號(hào)：20160402），混合均勻后，稱(chēng)取7份，每份取約200 mg，精密稱(chēng)定；其中2份按2.4項(xiàng)測(cè)定植入劑水分；另外5份在制備供試品溶液時(shí)，稱(chēng)量加入水-甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液約1 mL，搖勻后，轉(zhuǎn)移溶液，測(cè)定水分。

經(jīng)測(cè)定，供試樣品中含水量為1.122%，RSD為1.44%。加標(biāo)回收試驗(yàn)的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

2.6 方法的重復(fù)性和中間精密度考察 取本品（批號(hào)：20160505），混合均勻后，稱(chēng)取6份，每份約200 mg，精密稱(chēng)定，按2.4項(xiàng)測(cè)定水分，得方法的重復(fù)性；隔日另取6份，同法測(cè)定，得方法的中間精密度。本方法的精密度和重復(fù)性考察結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 方法的重復(fù)性與中間精密度考察結(jié)果

2.7 供試品水分測(cè)定 3批鹽酸多柔比星植入劑水分測(cè)定的結(jié)果見(jiàn)表4。

表2 方法的準(zhǔn)確度（加標(biāo)回收率）考察結(jié)果

表4 3批供試樣品水分測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 樣品溶解溶劑的選擇 本品在甲醇中不溶解，在DMF中溶解不完全，呈渾濁狀。經(jīng)試驗(yàn)，本品在DMF-甲醇混合溶劑中可完全溶解，但溶解速度較慢，在漩渦情況下需要20 min。本方法先用DMF溶解植入劑后，植入劑粒子很快分散消失，再加入少量甲醇后震搖后，即可得到澄清溶液。

3.2 溶解轉(zhuǎn)移法測(cè)定本品水分 本品在混合溶劑中溶解時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，直接加樣滴定時(shí)間較長(zhǎng)，水分漂移嚴(yán)重，故不適合。本研究根據(jù)王晨等［9］報(bào)道的溶解轉(zhuǎn)移法，將供試品在量瓶中溶解溶液后定量轉(zhuǎn)移至反應(yīng)杯中迅速滴定，可以有效地解決樣品溶解時(shí)間長(zhǎng)和水分漂移問(wèn)題。樣品在溶解過(guò)程中應(yīng)具塞密封，防止溶劑的溢出損失。

3.3 卡爾-費(fèi)休氏試液的稀釋 本品屬于貴重藥品，取樣量不宜太多。200 mg樣品含水約2～3 mg，因此，需低強(qiáng)度費(fèi)休氏試液。本研究采用在費(fèi)休氏試液中加入一定比例的無(wú)水甲醇，搖勻后使用，強(qiáng)度每毫升可降至1～2 mg水，滴定體積達(dá)到1～5 mL，減少系統(tǒng)誤差。

3.4 水-甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定費(fèi)休氏試液強(qiáng)度 卡爾-費(fèi)休氏試液的標(biāo)定一般采用10μL進(jìn)樣針加樣，連續(xù)3次標(biāo)定結(jié)果應(yīng)在±1%［11］。由于加樣量太少，精度差，因此難以達(dá)到要求，需連續(xù)多次標(biāo)定。本文參照GB／T 6283-2008方法，稱(chēng)取水-甲醇標(biāo)液進(jìn)行標(biāo)定，精密度高，易達(dá)到規(guī)定要求。

［1］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典臨床用藥須知-化學(xué)藥和生物制品卷［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2011：874-876.

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［3］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典（二部）［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：955.

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